Postrandiaalinen metabolomi ja aineenvaihdunta joustavuus

Ilmoittautuneita kohteita seurataan joka viikko yhden kuukauden ajan. Jokaisessa vierailussa kyselylomakkeessa arvioidaan energiamenojen, yleisen terveydentilan, mukaan lukien tarttuvat oireet ja vahvistus sosiaalisten ja demografisten ominaispiirteiden päivittäiset aikatoimintamalleja. Ruokavalion saanti arvioidaan elintarviketaajuuskyselyllä ja monivaiheisella 24 tunnin ruokavalion palauttamisella kvantitatiivista analyysiä varten. Jos infektion oireita esiintyy, osallistujia hoidetaan ad-hoc-laajoilla antibiooteilla. Antropometriset tiedot saadaan. Koehenkilöt satunnaistetaan sitten saamaan aineenvaihduntahaasteet eri järjestyksessä. Menettelyt suoritetaan ennen (paasto; 8-10 tuntia) ja aineenvaihduntahaasteiden kulutuksen jälkeen. Kapillaariverinäytteet (40µ) saadaan aamulla 8 tunnin paaston jälkeen ja testiaterian kulutuksen jälkeen. Kapillaariverinäytteen saamiseksi steriloi rengas sormi alkoholilla ja anna sen kuivua. Punkasta sitten alue steriilillä 2 mm pitkä lancet. Kun veren pudotus on muodostettu, se sijoitetaan suoraan CardCheck Plus® -kasettiin glukoositriglyseridin, LDL-kolesterolin, HDL-kolesterolin ja kokonaiskolesterolin määrittämiseksi. Toinen tippa kapillaariveriä on asetettava suodatinpaperille (S&S 903), kunnes suodatinpaperi -ympyrä on täytetty verellä paperin kyllästymiseksi koko sen paksuuteen. Insuliinipitoisuus on määritettävä kuivattujen veren protokollan jälkeen, joka standardisoidaan laboratoriossa. Suoritetaan myös epäsuora paastokalorimetria. Epäsuoran kalorimetrian jälkeen suoritetaan metabolinen ja hormonaalinen vaste testi -ateriaan.

Jokainen haaste tulisi kuluttaa 15 minuutin sisällä. Viiden minuutin lepoajan jälkeen epäsuora kalorimetria on jälkikäteen kestäviä 30 minuuttia. Kapillaariveri on saatava seuraavina aikoina: 15-30-45-60-90 ja 120 minuuttia ruoan nauttimisen jälkeen.

Standardisoidun aterian ja aterian ravintoaineiden koostumus.

• Korkea hiilihydraattihaaste: energia, 479,6 kcal; Hiilihydraatti, 83,6%; Lipidit, 12,4% ja proteiini, 4,0% (70 g kuumaa kakkua, 100 g mangoa, 270 ml persikka-nektaria ja 40 g mansikkahilloa)
• Korkea lipidihaaste: energia, 1043,4 kcal; Hiilihydraatti, 4,9%; Lipidit, 86,8% ja proteiini, 8,3% (60 g Manchego -juustoa, 25 g munaa, valkoista, kuivattua, 24 g pekonia, 5 ml öljyä, 65 g kermajuustoa, 70 g kermaa ja 16 g Poblano -pippuria)
• Korkeaproteiinihaaste: energia, 441,3 kcal; Hiilihydraatti, 1,6%; Lipidit, 5,1% ja proteiini, 93,3% (2 Scoop Isopuren nolla hiilihydraattia, 180 g kananrinta, 20 g salaattia ja 24 g kinkkua kalkkunanrinta)

Metaboliittien määrittäminen kuivatussa veressä metaboliittien (aminohappojen ja asyyli-karnitiinien) pitoisuuden määrittämiseksi, halkaisijaltaan 3 mm: n ympyrä on rei'itettävä suodatinpaperista ja asetettava 96-kuoppalevyyn. Lisää 100 ui asyylikarnitiini- ja aminohappostandardeja Neobase PerkinElmer -sarjasta. Seuraavaksi seuraa valmistajan ohjeita metaboliittien määrittämiseksi nestekromatografialla, joka on kytketty massaspektrometriaan (LC-MS).

Hengitysosamäärän (RQ) määrittäminen hengitys- jaosamäärän (RQ = VMAXCO2/ VMAXO2) ja lipidi- ja hiilihydraattien hapettumiskokeiden, sydänvalmentajan CO2 Vmax Encore 29 -järjestelmän kalorimetriohjelmiston (Korr, Inc, UT, USA) määrittämiseksi käytetään tavaran ohjeiden mukaisesti. Tutkimukset suoritetaan aina aamulla (8: 00-9: 00 AM) termoneutraaliympäristössä, jossa on hallittu paine, kosteus ja lämpötila potilaan makuulla, mutta hereillä. Tutkijat tutkivat korkeintaan kaksi henkilöä päivässä. Hapenkulutus ja hiilidioksidin tuotanto saatiin katolla ja niitä tarkkailtiin jatkuvasti 30 minuutin ajan. Mittauksen alkuperäiset 10 minuuttia hylätään laskelmasta suuremman datan homogeenisuuden varmistamiseksi. O2 -kulutus ja CO2 -tuotanto kirjataan jatkuvasti 30 minuutin ajan. VO2- ja VCO2 -arvoja käytetään Weirin ehdottamassa yhtälössä (energiamenot = [3.941 (VO2) + 1,11 (VCO2)] x 1440 min/päivä), jota pidetään standardimenetelmänä [34]. Lisäksi päivää ennen testiä koehenkilöitä kehotetaan paastoamaan 8 tuntia eikä harjoittamaan fyysistä aktiivisuutta tai kuluttamaan kofeiinia päivää ennen tenttiä. Kaikkia osallistujia pyydetään syömään sama illallinen illalla ennen jokaista testiä. Illallinen tarjoaa 15% päivittäisestä energiankulutuksesta; 20 g proteiinia, 7 g lipidejä ja 34 g hiilihydraatteja)