N2-(1-carboxyethyl)-2'Deoxyguanosin (CEdG) en potentiel biomarkør for diabetes

Primært mål er at replikere og validere CEdG-assayet til brug i mennesker. Et fuldt automatiseret assay for urin-CEdG er blevet udviklet. efterforskerne vil validere observationerne i diabetiske dyremodeller hos mennesker med og uden type 2 diabetes mellitus (T2DM). Specifikt vil efterforskerne undersøge og etablere inter- og intra-assay-koefficienterne for variabilitet hos mennesker.

Sekundært mål er at bestemme sammenhængen mellem CEdG-niveauer og hæmoglobulin A1c (HbA1c) hos mennesker med T2DM og responsen på diabetisk behandling og at definere forholdet mellem CEdG og diabetiske komplikationer. Efterforskerne vil undersøge forholdet mellem CEdG og glykæmisk kontrol baseret på HbA1c, som er den nuværende guldstandard, hos både patienter med type 1 og type 2 diabetes. Efterforskerne sammenligner også ændringerne i CEdG- og Hb1Ac-niveauer som reaktion på diabetesbehandling hos diabetespatienter. Forholdet mellem CEdG og diabetiske komplikationer vil også blive undersøgt hos diabetespatienter.

Statistiske overvejelser for det primære mål:

Prøvestørrelse: Fordi der er mange flere variabler i menneskelige forsøgspersoner, beregnede efterforskerne prøvestørrelsen baseret på en meget mere konservativ antagelse end hvad efterforskerne observerede fra diabetiske dyremodeller. Efterforskerne planlægger en undersøgelse af en kontinuerlig responsvariabel fra uafhængige kontrol- og forsøgspersoner med 1 kontrol pr. forsøgsperson. Baseret på dyredataene forventer efterforskerne, at resultaterne inden for hver faggruppe er normalfordelt med en standardafvigelse på 0,3. Hvis den sande forskel i middelværdien mellem diabetiske og ikke-diabetiske grupper er 0,5, vil efterforskerne skulle studere 9 diabetikere og 9 ikke-diabetikere for at kunne afvise nulhypotesen om, at populationen betyder for forsøgs- og kontrolgrupperne. er lig med sandsynlighed (potens) 0,9. Type I fejlsandsynligheden forbundet med denne test af denne nulhypotese er 0,05. For at tage højde for en mulig nedslidningsrate på 30 %, vil efterforskerne akkumulere 12 diabetikere og 12 ikke-diabetikere til undersøgelsen.

Statistisk analyse: Effekten af ​​diabetisk status på urin-CEdG-niveauer vil blive sammenlignet ved hjælp af en Students t-test. Forskelle i kontinuerte variable mellem grupperne af emner vil blive testet med enten envejs ANOVA eller Students t-test, når det er relevant. Forskelle i proportioner vil blive evalueret ved en chi-kvadrat test. De kontinuerte variable, som ikke normalitetstesten, vil blive logaritmisk transformeret før analyse. For at undersøge indflydelsen af ​​konfunderende variabler vil en trinvis regressionsanalyse blive brugt. En p-værdi mindre end 0,05 vil blive betragtet som statistisk signifikant.

I henhold til NIH-retningslinjerne for validering af analysemetoder for biomarkører anvendt i lægemiddeludvikling, for små molekyler, bioanalytiske assays, hvor analysekørslen er accepteret som gyldig, når mindst 67 % (4/6) af kvalitetskontrollerne falder inden for 15 % af deres nominelle værdi. Konsistensen af ​​6 gentagne kørsler vil blive evalueret ved Grubbs test for repeterbarhed inden for hvert emne. Den overordnede konsistens af CEdG-målinger kan kvantificeres ved andelen af ​​forsøgspersoner med 1+ identificerede outliers blandt de 6 gentagne kørsler. For at opnå et basisestimat af konsistensen af ​​CEdG-analysen vil efterforskerne tage antallet af disse seks målinger, der falder inden for 15 % af gennemsnittet, som vores resultatmål. Definitiv validering af en biomarkør vil kræve definitive kvantitative eller relative kvantitative analysemetoder.

Statistiske overvejelser for det sekundære mål:

Efterforskerne vil regressere undersøgelsesdeltagernes værdier af y-var (HbA1c) mod x-var (CEdG). Tidligere data indikerer, at standardafvigelsen for x-var er 0,15, og standardafvigelsen for regressionsfejlene vil være 0,15. Hvis den sande hældning af linjen opnået ved at regressere y-var mod x-var er 0,3, skal efterforskerne studere 89 forsøgspersoner for at kunne afvise nulhypotesen om, at denne hældning er lig med nul med sandsynlighed (potens) 0,8. Type I fejlsandsynligheden forbundet med denne test af denne nulhypotese er 0,05. Derfor vil 100 forsøgspersoner blive rekrutteret til undersøgelsen for at tage højde for potentiel nedslidning af forsøgspersoner.

Patientdemografiske og klinikkarakteristika vil blive opstillet i tabelform ved hjælp af statistik over gennemsnit, standardafvigelse, median, interval, antal og procent, når det er relevant. CEdG-data vil blive analyseret som en kontinuerlig eller transformeret variabel for det målte ekspressionsniveau. Den univariate korrelation mellem CEdG-ekspressionen og hvert kvantitativt klinisk mål vil blive evalueret ved hjælp af Pearson-korrelation og dets 95 % konfidensinterval. Tidstendensen i longitudinelle data og dens mulige interaktion med andre risikofaktorer vil blive udforsket ved hjælp af boxplots, tilpassede kurver, generaliserede lineære modeller og generaliserede estimeringsligninger efter behov. Estimerede korrelationer mellem CEdG-data og kliniske endepunkter og dets mulige tidstendenser i løbet af 12-månedersperioden vil give værdifuld information til valg af det primære endepunkt og stikprøvestørrelse i et fremtidigt større korrelationsstudie.