Cytotoksicitet induceret af tumorlysat pulserede dendritiske celler mod autologe hepatocellulære karcinomceller

Hepatom rangerer de to første af kræftdødelighedslisten i Taiwan, og der er i øjeblikket ingen effektive behandlingsmuligheder for avanceret HCC. Derfor er ny medicinsk intervention nødvendig for at forbedre overlevelsen og livskvaliteten for disse patienter. Dendritiske celler er den mest potente type antigenpræsenterende celler i den menneskelige krop og er involveret i reguleringen af ​​både medfødte og adoptive immunresponser. Det antages, at modne antigenpræsenterende celler pulseret in vitro med passende tumorassocierede antigener under optimale aktiveringsbetingelser kan generere eller aktivere et cytotoksisk T-lymfocytrespons mod tumorceller og derved hæmme tumorvækst(1,2).

Selvom der er spændende resultater af tumorvaccine i dyremodeller, mangler vellykkede kliniske forsøg. Der er nogle problemer, der skal løses, såsom immundefekt hos kræftpatienter, defekt i T-cellereceptorer eller immunundvigelse af tumor. Effektiviteten af ​​tumorvaccine påvirkes hovedsageligt af både tumorcellernes heterogenicitet og tumorantigeners kompleksitet. Tumorlysater, som omfatter flere antigener, formodes at være en god kilde til tumorantigener(3-7). Formålet med denne undersøgelse er at undersøge evnen af ​​autologe perifere blodmonocyt-afledte dendritiske celler (DC'er) fra hepatompatienter pulseret med autologt tumorlysat til at fremkalde T-cellers cytotoksicitet mod hepatomceller ex vivo. Vi planlægger at lave HCC primær kultur og DC'er er afledt af perifere blodmonocytter ved at udløse differentiering med rekombinant human granulocyt makrofag kolonistimulerende faktor (rhGM-CSF) og interleukin-4 (rhIL-4) til umodne DC'er. Umodne DC'er vil blive pulseret med autologe hepatomcellelysater og modnet ved hjælp af en cytokincocktail. Overflademolekyleekspression på DC'er vil blive analyseret ved flowcytometri. De pulserede DC'ers evne til at stimulere autolog T-celleproliferation vil blive vurderet ved at bruge carboxyfluoresceindiacetat, succinimidylester (CFSE) farvning. Cytotoksiciteten af ​​DC-stimulerede T-celler mod primært dyrkede hepatomceller vil blive estimeret ved at bruge trypanblåt udelukkelsestest. Formålet er at undersøge evnen hos autologe perifere blodmonocyt-afledte dendritiske celler (DC'er) fra hepatompatienter pulseret med autologt tumorlysat til at fremkalde T-cellers cytotoksicitet mod hepatomceller ex vivo.

Reference

1. Liu KJ, Wang CC, Chen LT, Cheng AL, Lin DT, Wu YC, Yu WL, Hung YM, Yang HY, Juang SH, Whang-Peng J. Generering af carcinoembryonalt antigen (CEA)-specifikke T-celleresponser i HLA -A*0201 og HLA-A*2402 patienter med kolorektal cancer i sent stadium efter vaccination med dendritiske celler fyldt med CEA-peptider. Clin Cancer Res. 2004 15. april;10(8):2645-51. PMID: 15102666
2. Chan RC, Pang XW, Wang YD, Chen WF, Xie Y. Transduktion af dendritiske celler med rekombinant adenovirus, der koder for HCA661, aktiverer autologe cytotoksiske T-lymfocytter til at målrette hepatomceller. Br J Kræft. 2004 apr 19;90(8):1636-43. PMID: 15083197
3. Iwashita Y, Tahara K, Goto S, Sasaki A, Kai S, Seike M, Chen CL, Kawano K, Kitano S. En fase I undersøgelse af autolog dendritisk celle-baseret immunterapi til patienter med ikke-operabel primær levercancer. Cancer Immunol Immunother. 2003 Mar;52(3):155-61. Epub 2003 6. februar. PMID: 12649744
4. Ladhams A, Schmidt C, Sing G, Butterworth L, Fielding G, Tesar P, Strong R, Leggett B, Powell L, Maddern G, Ellem K, Cooksley G. Behandling af ikke-resekterbart hepatocellulært karcinom med autologe tumorpulserede dendritiske celler . J Gastroenterol Hepatol. 2002 Aug;17(8):889-96. PMID: 12164965
5. Parajuli P, Sloan AE. Dendritisk cellebaseret immunterapi af maligne gliomer. Cancer Invest. 2004;22(3):405-16. PMID: 15493362
6. Sang SY, Kim HS. Strategier til forbedring af dendritisk celle-baseret immunterapi mod cancer. Yonsei Med J. 2004 Jun 30;45 Suppl:48-52. PMID: 15250050
7. Figdor CG, de Vries IJ, Lesterhuis WJ, Melief CJ. Dendritisk celle immunterapi: kortlægning af vejen. Nat Med. 2004 maj;10(5):475-80. PMID: 15122249