Durch Tumorlysat-gepulste dendritische Zellen induzierte Zytotoxizität gegen autologe hepatozelluläre Karzinomzellen

Hepatom rangiert auf den ersten beiden der Krebssterblichkeitsliste in Taiwan, und es gibt derzeit keine wirksamen Behandlungsoptionen für fortgeschrittenes HCC. Daher sind neuartige medizinische Eingriffe erforderlich, um das Überleben und die Lebensqualität dieser Patienten zu verbessern. Dendritische Zellen sind die stärkste Art von Antigen-präsentierenden Zellen im menschlichen Körper und sind an der Regulierung sowohl der angeborenen als auch der adoptiven Immunantwort beteiligt. Es wird angenommen, dass gereifte Antigen-präsentierende Zellen, die in vitro mit geeigneten Tumor-assoziierten Antigenen unter optimalen Aktivierungsbedingungen gepulst wurden, eine zytotoxische T-Lymphozyten-Antwort gegen Tumorzellen erzeugen oder aktivieren und dadurch das Tumorwachstum hemmen könnten(1,2).

Zwar gibt es spannende Ergebnisse der Tumorvakzine im Tiermodell, aber erfolgreiche klinische Versuche fehlen. Es gibt einige Probleme, die gelöst werden müssen, wie z. B. die Immunschwäche der Krebspatienten, der Defekt von T-Zell-Rezeptoren oder die Immunumgehung des Tumors. Die Wirksamkeit von Tumorimpfstoffen wird hauptsächlich sowohl durch die Heterogenität der Tumorzellen als auch durch die Komplexität der Tumorantigene beeinflusst. Tumorlysate, die mehrere Antigene enthalten, sollen eine gute Quelle für Tumorantigene sein (3-7). Der Zweck dieser Studie ist die Untersuchung der Fähigkeit von autologen peripheren Blut-Monozyten-abgeleiteten dendritischen Zellen (DCs) von Hepatom-Patienten, die mit autologem Tumorlysat gepulst wurden, T-Zellen-Zytotoxizität gegen Hepatom-Zellen ex vivo hervorzurufen. Wir planen eine HCC-Primärkultur und DCs werden aus peripheren Blutmonozyten gewonnen, indem wir die Differenzierung mit rekombinantem humanem Granulozyten-Makrophagen-Kolonie-stimulierendem Faktor (rhGM-CSF) und Interleukin-4 (rhIL-4) zu unreifen DCs auslösen. Unreife DCs werden mit autologen Hepatomzelllysaten gepulst und mit einem Zytokincocktail gereift. Die Expression von Oberflächenmolekülen auf DCs wird durch Durchflusszytometrie analysiert. Die Fähigkeit der gepulsten DCs, die Proliferation autologer T-Zellen zu stimulieren, wird unter Verwendung von Carboxyfluoresceindiacetat, Succinimidylester (CFSE)-Färbung bewertet. Die Zytotoxizität von DC-stimulierten T-Zellen gegen primär kultivierte Hepatomzellen wird unter Verwendung des Trypanblau-Ausschlusstests abgeschätzt. Der Zweck besteht darin, die Fähigkeit von autologen peripheren Blutmonozyten-abgeleiteten dendritischen Zellen (DCs) von Hepatompatienten, die mit autologem Tumorlysat gepulst wurden, zu untersuchen, T-Zellen-Zytotoxizität gegen Hepatomzellen ex vivo hervorzurufen.

Referenz

1. Liu KJ, Wang CC, Chen LT, Cheng AL, Lin DT, Wu YC, Yu WL, Hung YM, Yang HY, Juang SH, Whang-Peng J. Erzeugung karzinoembryonaler Antigen (CEA)-spezifischer T-Zell-Antworten in HLA -A*0201- und HLA-A*2402-Patienten mit Darmkrebs im Spätstadium nach Impfung mit dendritischen Zellen, die mit CEA-Peptiden beladen sind. Clinic Cancer Res. 15. April 2004;10(8):2645-51. PMID: 15102666
2. RC Chan, XW Pang, YD Wang, WF Chen, Y. Xie. Br J Krebs. 19. April 2004;90(8):1636-43. PMID: 15083197
3. Iwashita Y, Tahara K, Goto S, Sasaki A, Kai S, Seike M, Chen CL, Kawano K, Kitano S. Eine Phase-I-Studie zur autologen dendritischen Zell-basierten Immuntherapie für Patienten mit inoperablem primärem Leberkrebs. Cancer Immunol Immunother. 2003 März;52(3):155-61. Epub 06. Februar 2003. PMID: 12649744
4. A. Ladhams, C. Schmidt, G. Sing, L. Butterworth, G. Fielding, P. Tesar, R. Strong, B. Leggett, L. Powell, G. Maddern, K. Ellem, G. Cooksley . J Gastroenterol Hepatol. 2002 Aug;17(8):889-96. PMID: 12164965
5. Parajuli P, Sloan AE. Dendritische zellbasierte Immuntherapie maligner Gliome. Krebs investieren. 2004;22(3):405-16. PMID: 15493362
6. Lied SY, Kim HS. Strategien zur Verbesserung der auf dendritischen Zellen basierenden Immuntherapie gegen Krebs. Yonsei Med J. 2004 Jun 30;45 Suppl:48-52. PMID: 15250050
7. Figdor CG, de Vries IJ, Lesterhuis WJ, Melief CJ. Immuntherapie mit dendritischen Zellen: Wegweiser. Nat Med. Mai 2004;10(5):475-80. PMID: 15122249