Цитотоксичность, индуцированная опухолевым лизатом импульсных дендритных клеток против аутологичных клеток гепатоцеллюлярной карциномы

Гепатома занимает первые два места в списке смертности от рака на Тайване, и в настоящее время не существует эффективных вариантов лечения распространенного ГЦК. Поэтому необходимы новые медицинские вмешательства для улучшения выживаемости и качества жизни этих пациентов. Дендритные клетки являются наиболее мощным типом антигенпрезентирующих клеток в организме человека и участвуют в регуляции как врожденного, так и адоптивного иммунного ответа. Предполагается, что созревшие антигенпрезентирующие клетки, подвергнутые in vitro импульсному воздействию соответствующих опухолеассоциированных антигенов в оптимальных условиях активации, могут генерировать или активировать ответ цитотоксических Т-лимфоцитов против опухолевых клеток и тем самым ингибировать рост опухоли (1,2).

Несмотря на впечатляющие результаты противоопухолевой вакцины на животных моделях, успешных клинических испытаний не хватает. Необходимо решить некоторые проблемы, такие как иммунный дефицит у больных раком, дефект рецепторов Т-клеток или уклонение опухоли от иммунитета. На эффективность противоопухолевой вакцины в основном влияют как гетерогенность опухолевых клеток, так и сложность опухолевых антигенов. Предполагается, что лизаты опухолей, которые включают несколько антигенов, являются хорошим источником опухолевых антигенов (3-7). Целью данного исследования является изучение способности аутологичных дендритных клеток (ДК), полученных из моноцитов периферической крови, от пациентов с гепатомой, которым вводили аутологичный опухолевой лизат, вызывать цитотоксичность Т-клеток против клеток гепатомы ex vivo. Мы планируем получить первичную культуру ГЦК, а ДК получают из моноцитов периферической крови путем запуска дифференцировки рекомбинантным фактором, стимулирующим колонии макрофагов гранулоцитов человека (rhGM-CSF) и интерлейкином-4 (rhIL-4), в незрелые ДК. Незрелые DC будут импульсно обработаны аутологичными лизатами клеток гепатомы и созрели с использованием цитокинового коктейля. Экспрессию поверхностных молекул на DCs будут анализировать с помощью проточной цитометрии. Способность импульсных ДК стимулировать пролиферацию аутологичных Т-клеток будет оцениваться с помощью окрашивания карбоксифлуоресцеиндиацетатом, сукцинимидиловым эфиром (CFSE). Цитотоксичность ДК-стимулированных Т-клеток в отношении первично культивируемых клеток гепатомы будет оцениваться с использованием теста исключения трипанового синего. Цель состоит в том, чтобы исследовать способность аутологичных дендритных клеток (ДК), полученных из моноцитов периферической крови, от пациентов с гепатомой, подвергнутых импульсному воздействию аутологичного лизата опухоли, вызывать цитотоксичность Т-клеток против клеток гепатомы ex vivo.

Ссылка

1. Liu KJ, Wang CC, Chen LT, Cheng AL, Lin DT, Wu YC, Yu WL, Hung YM, Yang HY, Juan SH, Whang-Peng J. Генерация карциноэмбрионального антигена (CEA)-специфических Т-клеточных ответов в HLA -A*0201 и HLA-A*2402 пациентов с поздней стадией колоректального рака после вакцинации дендритными клетками, нагруженными пептидами СЕА. Клин Рак Рез. 2004 г., 15 апреля; 10(8):2645-51. PMID: 15102666
2. Chan RC, Pang XW, Wang YD, Chen WF, Xie Y. Трансдукция дендритных клеток рекомбинантным аденовирусом, кодирующим HCA661, активирует аутологичные цитотоксические Т-лимфоциты для нацеливания на клетки гепатомы. Бр Дж Рак. 2004 г., 19 апреля; 90(8):1636-43. PMID: 15083197
3. Ивасита Ю., Тахара К., Гото С., Сасаки А., Кай С., Сейке М., Чен С.Л., Кавано К., Китано С. Исследование I фазы аутологичной иммунотерапии на основе дендритных клеток у пациентов с нерезектабельным первичным раком печени. Рак Иммунол Иммунотер. 2003 март; 52(3):155-61. Epub 2003, 06 февраля. PMID: 12649744
4. Лэдхэмс А., Шмидт С., Синг Г., Баттерворт Л., Филдинг Г., Тезар П., Стронг Р., Леггетт Б., Пауэлл Л., Мэддерн Г., Эллем К., Куксли Г. Лечение нерезектабельной гепатоцеллюлярной карциномы аутологичными дендритными клетками с опухолевым импульсом . J Гастроэнтерол Гепатол. 2002 авг; 17 (8): 889-96. PMID: 12164965
5. Параджули П., Слоан А.Э. Иммунотерапия злокачественных глиом на основе дендритных клеток. Рак Инвест. 2004;22(3):405-16. PMID: 15493362
6. Песня SY, Ким HS. Стратегии улучшения иммунотерапии рака на основе дендритных клеток. Yonsei Med J. 2004 30 июня; 45 Приложение: 48-52. PMID: 15250050
7. Фигдор К.Г., де Врис И.Дж., Лестерхейс В.Дж., Мелиеф К.Дж. Иммунотерапия дендритными клетками: определение пути. Нат Мед. 2004 май; 10 (5): 475-80. PMID: 15122249