Cytotoksyczność indukowana przez impulsowe komórki dendrytyczne z lizatem guza przeciwko autologicznym komórkom raka wątrobowokomórkowego

Wątrobiak zajmuje pierwsze dwa miejsca na liście śmiertelności z powodu raka na Tajwanie, a obecnie nie ma skutecznych opcji leczenia zaawansowanego HCC. Dlatego potrzebna jest nowa interwencja medyczna, aby poprawić przeżywalność i jakość życia tych pacjentów. Komórki dendrytyczne są najsilniejszym typem komórek prezentujących antygen w ludzkim ciele i biorą udział w regulacji zarówno wrodzonych, jak i przybranych odpowiedzi immunologicznych. Przyjmuje się, że dojrzałe komórki prezentujące antygen poddane pulsacji in vitro odpowiednimi antygenami związanymi z nowotworem w optymalnych warunkach aktywacji mogą generować lub aktywować cytotoksyczną odpowiedź limfocytów T przeciwko komórkom nowotworowym, a tym samym hamować wzrost guza(1,2).

Chociaż istnieją ekscytujące wyniki szczepionki przeciwnowotworowej na modelach zwierzęcych, brakuje jednak udanych prób klinicznych. Istnieją pewne problemy, które należy rozwiązać, takie jak niedobór odporności u pacjentów z rakiem, defekt receptorów limfocytów T lub unikanie guza przez układ immunologiczny. Na skuteczność szczepionki przeciwnowotworowej wpływa głównie heterogenność komórek nowotworowych i złożoność antygenów nowotworowych. Lizaty nowotworowe zawierające wiele antygenów mają być dobrym źródłem antygenów nowotworowych(3-7). Celem tego badania jest zbadanie zdolności autologicznych komórek dendrytycznych pochodzących z monocytów krwi obwodowej (DC) od pacjentów z wątrobiakiem pulsowanych autologicznym lizatem guza do wywołania cytotoksyczności komórek T przeciwko komórkom wątrobiaka ex vivo. Planujemy przeprowadzić pierwotną hodowlę HCC, a DC uzyskano z monocytów krwi obwodowej poprzez wywołanie różnicowania z rekombinowanym ludzkim czynnikiem stymulującym tworzenie kolonii makrofagów granulocytów (rhGM-CSF) i interleukiną-4 (rhIL-4) do niedojrzałych DC. Niedojrzałe DC będą pulsowane autologicznymi lizatami komórek wątrobiaka i dojrzewane przy użyciu koktajlu cytokin. Ekspresja cząsteczek powierzchniowych na DC zostanie przeanalizowana za pomocą cytometrii przepływowej. Zdolność pulsowanych DC do stymulacji autologicznej proliferacji limfocytów T będzie oceniana za pomocą barwienia dioctanem karboksyfluoresceiny, estrem sukcynoimidylu (CFSE). Cytotoksyczność limfocytów T stymulowanych DC w stosunku do pierwotnie hodowanych komórek wątrobiaka zostanie oszacowana za pomocą testu wykluczenia z błękitem trypanu. Celem jest zbadanie zdolności autologicznych komórek dendrytycznych (DC) pochodzących z monocytów krwi obwodowej od pacjentów z wątrobiakiem, którym podawano autologiczny lizat nowotworu, w celu wywołania cytotoksyczności limfocytów T przeciwko komórkom wątrobiaka ex vivo.

Odniesienie

1. Liu KJ, Wang CC, Chen LT, Cheng AL, Lin DT, Wu YC, Yu WL, Hung YM, Yang HY, Juang SH, Whang-Peng J. Wytwarzanie specyficznych dla antygenu rakowo-płodowego (CEA) odpowiedzi komórek T w HLA -A*0201 i HLA-A*2402 pacjentów z późnym stadium raka jelita grubego po szczepieniu komórkami dendrytycznymi obciążonymi peptydami CEA. Clin Cancer Res. 2004 15 kwietnia;10(8):2645-51. PMID: 15102666
2. Chan RC, Pang XW, Wang YD, Chen WF, Xie Y. Transdukcja komórek dendrytycznych rekombinowanym adenowirusem kodującym HCA661 aktywuje autologiczne cytotoksyczne limfocyty T do docelowych komórek wątrobiaka. Br J Rak. 2004 19 kwietnia;90(8):1636-43. PMID: 15083197
3. Iwashita Y, Tahara K, Goto S, Sasaki A, Kai S, Seike M, Chen CL, Kawano K, Kitano S. Badanie fazy I autologicznej immunoterapii opartej na komórkach dendrytycznych u pacjentów z nieoperacyjnym pierwotnym rakiem wątroby. Odporność na raka Immunol. 2003 marzec;52(3):155-61. Epub 2003 06 lutego. PMID: 12649744
4. Ladhams A, Schmidt C, Sing G, Butterworth L, Fielding G, Tesar P, Strong R, Leggett B, Powell L, Maddern G, Ellem K, Cooksley G. Leczenie nieoperacyjnego raka wątrobowokomórkowego autologicznymi komórkami dendrytycznymi pulsującymi w guzie . J Gastroenterol Hepatol. 2002 sierpień;17(8):889-96. PMID: 12164965
5. Parajuli P, Sloan AE. Immunoterapia złośliwych glejaków na bazie komórek dendrytycznych. Inwestuj w raka. 2004;22(3):405-16. PMID: 15493362
6. Piosenka SY, Kim HS. Strategie poprawy immunoterapii opartej na komórkach dendrytycznych przeciwko rakowi. Yonsei Med J. 2004 30 czerwca;45 Suppl:48-52. PMID: 15250050
7. Figdor CG, de Vries IJ, Lesterhuis WJ, Melief CJ. Immunoterapia komórkami dendrytycznymi: mapowanie drogi. Nat Med. 2004 maj;10(5):475-80. PMID: 15122249