Brug af time-lapse morfologisk kinetik i udvælgelsen af ​​blastocyster (Embryoscope)

Materialer og metoder:

Patientvalg:

Patienter, der gennemgår en IVF-cyklus på Cleveland Clinic Reproductive Endocrinology and Infertility-klinikken med planen for overførsel af embryo(r) vil blive tilbudt muligheden for at deltage i denne undersøgelse. Vi vil gerne have en samlet indskrivning på 300 patienter med 150 i hver gruppe. De eneste udelukkede patienter vil være dem, der gennemgår præ-implantation genetisk testning og/eller kromosomscreening.

Studiedesign Dette vil være et prospektivt randomiseret kontrolleret forsøg, hvor alle patienter, der accepterer at deltage, vil blive randomiseret til at få embryoselektion til overførsel udelukkende baseret på konventionelle kriterier eller alternativt konventionelle kriterier i forbindelse med morfokinetiske kriterier.

Tilmelding:

Patienter vil blive tilmeldt Beachwood IVF-centeret af REI-lægerne på tidspunktet for IVF-konsultationen. De underskriver det informerede samtykke til undersøgelsen på det tidspunkt, hvor de underskriver samtykket til IVF-behandling, som udføres af IVF-sygeplejerskerne. Informeret samtykke til undersøgelsen vil blive opbevaret i patientskemaet i Beachwood IVF-centeret sammen med IVF-samtykket.

Randomisering:

Patienter vil blive randomiseret 1:1 til konventionel embryoselektion vs. embryoskopudvælgelse ved hjælp af en computergenereret tilfældig talsekvens. Gruppeopgaven vil blive skrevet på et stykke papir og lagt i fortløbende nummererede uigennemsigtige kuverter af forskningspersonale, der ikke er involveret i embryoudvælgelse. Hver randomiseret patient vil blive tildelt det næste fortløbende nummer, og embryoselektionskriterierne vil blive afsløret på tidspunktet for oocytudtagning. Patienter, REI-læger og -personale og sonografer vil blive blindet med hensyn til, hvordan embryoner udvælges. Kun embryologen og laboratoriepersonalet vil være klar over, hvilken gruppe patienterne er randomiseret i. Dette sikres ved ikke at placere gruppen i den elektroniske journal eller det kliniske skema, men kun i laboratorieskemaet og forskningsdatabasen.

Prøvestørrelse Begrundelse Kun få offentliggjorte data er tilgængelige om time-lapse-billeddannelse og udvælgelse af menneskelige embryoner til overførsel. Ingen publikationer af randomiserede kontrollerede forsøg er tilgængelige på EmbryoScope. Statistiker Benjamin Nutter blev konsulteret for estimering af prøvestørrelse. Oprindeligt var der baseret på 2012-resultaterne en graviditetsrate på 49 %. For en styrke på 80 % ville vi være nødt til at randomisere 1088 patienter for at opdage en stigning til 55 % graviditetsrater under de nye retningslinjer for udvælgelse. For at se en stigning til 60 % graviditetsrater skal vi randomisere 320 patienter.

I denne undersøgelse vil vi fokusere på de patienter, der har blastocyster til rådighed for overførsel, da blastocyster er de embryoner, som vi har mest brug for hjælp til selektion. Graviditetsraten i denne undergruppe af patienter er i øjeblikket 70 %, og for at opdage en stigning til 80 % ville det kræve randomisering af 231 patienter. Baseret på disse tal mener vi, at det er rimeligt at starte med et mål på 300 patienter i denne undersøgelse, da der vil være nogle patienter, der ikke kommer til udtagning, nogle som ikke har nogen befrugtning, og nogle som ikke har nogen embryoner fremskridt til overførsel. At starte med et mål på 300 patienter vil forhåbentlig give os en stor nok prøve til at foretage en foreløbig analyse af embryoner, hvilket resulterer i en klinisk tydelig graviditet som defineret ved positiv føtal hjertefrekvens.

Da resultatet af denne undersøgelse er graviditetsraten, vil vi vurdere de indsamlede data efter seks måneder for at vurdere, om der er en klar forskel mellem grupperne. Hvis der er en signifikant forskel på det tidspunkt, kan undersøgelsen afsluttes for at give alle patienter mulighed for at få gavn af den overlegne metode.

Forskningsprocedure De grundlæggende IVF-laboratorieprotokoller, der anvendes, vil være de samme som dem, der anvendes for alle patienter. Oocytter vil blive udvundet ved transvaginal aspiration af follikler under ultralydsvejledning. Oocytter vil blive insemineret ved intracytoplasmatisk sædinjektion eller co-inkubation med sæd. Næste morgen vil normalt befrugtede oocytter blive identificeret og flyttet til individuelle brønde i et objektglaskammer og placeret i EmbryoScope.

De, der er randomiseret til klassisk evaluering, vil få deres embryoner bedømt baseret på konventionel daglig evaluering på bestemte daglige tidspunkter. Disse kriterier omfatter rettidig udvikling til specifikke benchmarks 20, 26, 44, 68, 92, 116 og 140 timer efter insemination.

Billederne vil være fra EmbryoScope, men vil være statiske i tid og vil ikke spænde over et tidsinterval. Embryoer vil blive klassificeret og udvalgt til overførsel i henhold til laboratoriets konventionelle kriterier. De, der er randomiseret til klassisk evaluering plus morfokinetiske parametre, vil få embryonevaluering udført med de samme definerede intervaller, men ved hjælp af dataanalysesoftwaren og de optagne time-lapse-billeder til at inkludere timing af mitotiske intervaller, spaltningsplaner, timing af komprimering og kavitation i embryoner, der fører til blastocystdannelse.

Patienter, der vælger ikke at deltage i undersøgelsen, vil stadig få deres embryoner dyrket i EmbryoScope, og konventionelle embryoselektionskriterier vil blive anvendt til at identificere embryoner ved overførsel.