Использование покадровой морфологической кинетики в отборе бластоцист (Embryoscope)

Материалы и методы:

Выбор пациента:

Пациентам, проходящим цикл ЭКО в клинике репродуктивной эндокринологии и бесплодия Cleveland Clinic с планом переноса эмбрионов, будет предложена возможность принять участие в этом исследовании. Мы хотели бы набрать 300 пациентов по 150 в каждой группе. Единственными исключенными пациентами будут пациенты, проходящие преимплантационное генетическое тестирование и/или хромосомный скрининг.

Дизайн исследования Это будет проспективное рандомизированное контролируемое исследование, в котором все пациенты, согласившиеся на участие, будут рандомизированы для отбора эмбрионов для переноса исключительно на основании общепринятых критериев или, альтернативно, общепринятых критериев в сочетании с морфокинетическими критериями.

Регистрация:

Пациенты будут зачислены в центр ЭКО Бичвуд врачами REI во время консультации по ЭКО. Они подпишут информированное согласие на исследование одновременно с подписанием согласия на ЭКО-лечение, которое делают медсестры ЭКО. Информированное согласие на исследование будет храниться в карте пациента в центре ЭКО Бичвуд вместе с согласием на ЭКО.

Рандомизация:

Пациенты будут рандомизированы в соотношении 1:1 между обычным отбором эмбрионов и отбором с помощью эмбриоскопа с использованием компьютерной последовательности случайных чисел. Групповое задание будет написано на листе бумаги и помещено в последовательно пронумерованные непрозрачные конверты научным персоналом, не участвующим в отборе эмбрионов. Каждому рандомизированному пациенту будет присвоен следующий последовательный номер, а критерии отбора эмбрионов будут раскрыты во время извлечения ооцитов. Пациенты, врачи и персонал REI, а также специалисты по УЗИ не будут знать, как отбираются эмбрионы. Только эмбриолог и персонал лаборатории будут знать, в какую группу рандомизированы пациенты. Это будет обеспечено размещением группы не в компьютеризированной медицинской карте или истории болезни, а только в лабораторной карте и исследовательской базе данных.

Обоснование размера выборки Доступно мало опубликованных данных о покадровой визуализации и отборе человеческих эмбрионов для переноса. В EmbryoScope нет публикаций о рандомизированных контролируемых исследованиях. Для оценки размера выборки были проведены консультации со статистиком Бенджамином Наттером. Первоначально, по результатам 2012 г., частота наступления беременности составляла 49%. Для мощности 80%, чтобы обнаружить увеличение частоты наступления беременности до 55% в соответствии с новыми рекомендациями по отбору, нам потребуется рандомизировать 1088 пациентов. Чтобы увидеть увеличение частоты наступления беременности до 60%, нам потребуется рандомизировать 320 пациентов.

В этом исследовании мы сосредоточимся на тех пациентах, у которых есть бластоцисты, доступные для переноса, поскольку бластоцисты — это эмбрионы, которым мы больше всего нуждаемся в помощи при отборе. Частота наступления беременности в этой подгруппе пациентов в настоящее время составляет 70%, и для обнаружения увеличения до 80% потребуется рандомизация 231 пациентки. Основываясь на этих цифрах, мы считаем разумным начать с цели в 300 пациентов в этом исследовании, поскольку будут некоторые пациенты, которые не доживут до извлечения, у некоторых не будет оплодотворения, а у некоторых нет эмбрионов, которые перейдут к переносу. Мы надеемся, что, начав с цели в 300 пациентов, мы получим достаточно большую выборку для проведения предварительного анализа эмбрионов, что приведет к клинически очевидной беременности, определяемой положительной частотой сердечных сокращений плода.

Учитывая, что результатом этого исследования является частота наступления беременности, мы оценим данные, собранные через шесть месяцев, чтобы определить, есть ли четкая разница между группами. Если в это время будет значительная разница, исследование может быть прекращено, чтобы все пациенты могли воспользоваться преимуществом более совершенного метода.

Процедура исследования Основные используемые лабораторные протоколы ЭКО будут такими же, как и для всех пациентов. Ооциты извлекаются путем трансвагинальной аспирации фолликулов под контролем УЗИ. Ооциты будут осеменены интрацитоплазматической инъекцией спермы или совместной инкубацией со спермой. На следующее утро будут идентифицированы нормально оплодотворенные ооциты, которые будут перемещены в отдельные лунки в камере для предметных стекол и помещены в EmbryoScope.

Эмбрионы, рандомизированные для классической оценки, будут оцениваться на основе обычной ежедневной оценки в определенные моменты времени. Эти критерии включают своевременное развитие до определенных контрольных показателей через 20, 26, 44, 68, 92, 116 и 140 часов после осеменения.

Изображения будут получены из EmbryoScope, но будут статичными во времени и не будут охватывать временной диапазон. Эмбрионы будут классифицированы и отобраны для переноса в соответствии с общепринятыми критериями лаборатории. Тем, кто рандомизирован для классической оценки плюс морфокинетические параметры, будет проводиться оценка эмбрионов с теми же определенными интервалами, но с использованием программного обеспечения для анализа данных и захваченных покадровых изображений, чтобы включить время митотических интервалов, плоскостей дробления, время уплотнения и кавитации в эмбрионах, ведущих к образование бластоцисты.

Пациенты, решившие не участвовать в исследовании, все равно будут культивировать свои эмбрионы в EmbryoScope, и для идентификации эмбрионов для переноса будут применяться обычные критерии отбора эмбрионов.