Uso de la cinética morfológica de lapso de tiempo en la selección de blastocistos (Embryoscope)

Materiales y métodos:

Selección de pacientes:

A los pacientes que se sometan a un ciclo de FIV en la Clínica de Infertilidad y Endocrinología Reproductiva de la Clínica Cleveland con el plan de transferencia de embrión(es) se les ofrecerá la oportunidad de participar en este estudio. Nos gustaría una inscripción total de 300 pacientes con 150 en cada grupo. Los únicos pacientes excluidos serán los que se sometan a pruebas genéticas preimplantacionales y/o cribado cromosómico.

Diseño del estudio Este será un ensayo controlado aleatorizado prospectivo en el que todas las pacientes que acepten participar serán aleatorizadas para seleccionar embriones para transferir basándose únicamente en criterios convencionales o, alternativamente, en criterios convencionales junto con criterios morfocinéticos.

Inscripción:

Los médicos de REI inscribirán a los pacientes en el centro de FIV de Beachwood en el momento de la consulta de FIV. Firmarán el consentimiento informado para el estudio en el momento en que firman el consentimiento para el tratamiento de FIV, que es realizado por las enfermeras de FIV. El consentimiento informado para el estudio se mantendrá en el expediente del paciente en el centro de FIV de Beachwood junto con el consentimiento de FIV.

Aleatorización:

Los pacientes serán aleatorizados 1:1 a la selección de embriones convencional frente a la selección de embriones usando una secuencia de números aleatorios generada por computadora. La asignación del grupo se escribirá en una hoja de papel y se colocará en sobres opacos numerados consecutivamente por personal de investigación que no participe en la selección de embriones. A cada paciente aleatorizada se le asignará el siguiente número consecutivo y los criterios de selección de embriones se revelarán en el momento de la recuperación de los ovocitos. Los pacientes, los médicos y el personal de REI y los ecografistas no sabrán cómo se seleccionan los embriones. Solo el embriólogo y el personal del laboratorio sabrán en qué grupo se asignan aleatoriamente los pacientes. Esto se asegurará no colocando al grupo en la historia clínica informatizada o en la ficha clínica, sino únicamente en la ficha de laboratorio y en la base de datos de la investigación.

Justificación del tamaño de la muestra Hay pocos datos publicados disponibles sobre imágenes de lapso de tiempo y selección de embriones humanos para transferencia. No hay publicaciones de ensayos controlados aleatorios disponibles en EmbryoScope. Se consultó al estadístico Benjamin Nutter para la estimación del tamaño de la muestra. Inicialmente, según los resultados de 2012, hubo una tasa de embarazo del 49 %. Para un poder del 80 %, a fin de detectar un aumento de las tasas de embarazo al 55 % según las nuevas pautas de selección, necesitaríamos aleatorizar a 1088 pacientes. Para ver un aumento del 60 % en las tasas de embarazo, necesitaríamos aleatorizar a 320 pacientes.

En este estudio, nos centraremos en aquellas pacientes que tienen blastocistos disponibles para la transferencia, ya que los blastocistos son los embriones para los que más ayuda necesitamos en la selección. La tasa de embarazo en este subconjunto de pacientes es actualmente del 70 % y para detectar un aumento al 80 % sería necesaria la aleatorización de 231 pacientes. Con base en estos números, creemos que es razonable comenzar con una meta de 300 pacientes en este estudio, ya que habrá algunas pacientes que no lograrán la recuperación, algunas que no tendrán fertilización y otras que no tendrán embriones en progreso para transferir. Comenzar con una meta de 300 pacientes con suerte nos dará una muestra lo suficientemente grande como para hacer un análisis preliminar de embriones que den como resultado un embarazo clínicamente evidente definido por una frecuencia cardíaca fetal positiva.

Dado que el resultado de este estudio es la tasa de embarazo, evaluaremos los datos recopilados después de seis meses para evaluar si existe una diferencia clara entre los grupos. Si hay una diferencia significativa en ese momento, el estudio puede terminarse para permitir que todos los pacientes se beneficien del método superior.

Procedimiento de investigación Los protocolos básicos de laboratorio de FIV utilizados serán los mismos que se utilizan para todos los pacientes. Los ovocitos se recuperarán mediante aspiración transvaginal de folículos bajo control ecográfico. Los ovocitos se inseminarán mediante inyección intracitoplasmática de espermatozoides o coincubación con espermatozoides. A la mañana siguiente, los ovocitos normalmente fertilizados se identificarán y trasladarán a pocillos individuales en una cámara de portaobjetos y se colocarán en el EmbryoScope.

Los embriones asignados al azar a la evaluación clásica se clasificarán según la evaluación diaria convencional en puntos de tiempo diarios especificados. Estos criterios abarcan el desarrollo oportuno de puntos de referencia específicos a las 20, 26, 44, 68, 92, 116 y 140 horas posteriores a la inseminación.

Las imágenes serán del EmbryoScope, pero serán estáticas en el tiempo y no abarcarán un rango de tiempo. Los embriones serán clasificados y seleccionados para la transferencia de acuerdo con los criterios convencionales del laboratorio. Aquellos aleatorizados a la evaluación clásica más parámetros morfocinéticos tendrán una evaluación embrionaria realizada en los mismos intervalos definidos pero utilizando el software de análisis de datos y las imágenes de lapso de tiempo capturadas para incluir el tiempo de los intervalos mitóticos, los planos de división, el momento de la compactación y la cavitación en los embriones que conducen a formación de blastocistos.

Los embriones de los pacientes que decidan no participar en el estudio seguirán siendo cultivados en el EmbryoScope y se aplicarán los criterios convencionales de selección de embriones para identificar los embriones para la transferencia.