Gebruik van time-lapse morfologische kinetiek bij de selectie van blastocysten (Embryoscope)

Materialen en methodes:

Patiënt selectie:

Patiënten die een IVF-cyclus ondergaan bij de Cleveland Clinic Reproductive Endocrinology and Infertility clinic met het plan voor het terugplaatsen van embryo('s) zullen de kans krijgen om aan dit onderzoek deel te nemen. We willen een totale inschrijving van 300 patiënten met 150 in elke groep. De enige uitgesloten patiënten zijn degenen die pre-implantatie genetische testen en/of chromosoomscreening ondergaan.

Onderzoeksopzet Dit wordt een prospectieve, gerandomiseerde, gecontroleerde studie waarbij alle patiënten die ermee instemmen om deel te nemen, gerandomiseerd worden voor selectie van embryo's voor terugplaatsing, uitsluitend op basis van conventionele criteria of alternatieve conventionele criteria in combinatie met morfokinetische criteria.

Inschrijving:

Patiënten worden door de REI-artsen ingeschreven in het Beachwood IVF-centrum op het moment van het IVF-consult. Zij ondertekenen de geïnformeerde toestemming voor het onderzoek op het moment dat zij de toestemming voor de IVF-behandeling ondertekenen, wat wordt gedaan door de IVF-verpleegkundigen. Geïnformeerde toestemming voor het onderzoek wordt samen met de IVF-toestemming bewaard in de patiëntenkaart in het Beachwood IVF-centrum.

Randomisatie:

Patiënten worden 1:1 gerandomiseerd naar conventionele embryoselectie vs. embryoscopische selectie met behulp van een computergegenereerde willekeurige nummerreeks. De groepsopdracht wordt op een stuk papier geschreven en in opeenvolgend genummerde ondoorzichtige enveloppen gestoken door onderzoekspersoneel dat niet betrokken is bij embryoselectie. Elke gerandomiseerde patiënt krijgt het volgende opeenvolgende nummer toegewezen en de embryoselectiecriteria worden onthuld op het moment van het ophalen van de eicel. Patiënten, REI-artsen en -personeel en sonografen zullen verblind zijn over hoe embryo's worden geselecteerd. Alleen de embryoloog en het laboratoriumpersoneel weten in welke groep de patiënten worden gerandomiseerd. Dit wordt gewaarborgd door de groep niet in het geautomatiseerd medisch dossier of het klinisch dossier te plaatsen, maar enkel in het laboratoriumdossier en de onderzoeksdatabank.

Steekproefomvang Motivering Er zijn weinig gepubliceerde gegevens beschikbaar over time-lapse-beeldvorming en selectie van menselijke embryo's voor terugplaatsing. Er zijn geen publicaties van gerandomiseerde gecontroleerde onderzoeken beschikbaar op de EmbryoScope. Statisticus Benjamin Nutter werd geraadpleegd voor schatting van de steekproefomvang. Aanvankelijk was er op basis van de resultaten van 2012 een zwangerschapspercentage van 49%. Voor een power van 80%, om een ​​toename tot 55% zwangerschapspercentages onder de nieuwe selectierichtlijnen te detecteren, zouden we 1088 patiënten moeten randomiseren. Om een ​​stijging tot 60% zwangerschapspercentages te zien, zouden we 320 patiënten moeten randomiseren.

In deze studie zullen we ons concentreren op die patiënten die blastocysten beschikbaar hebben voor overdracht, aangezien blastocysten de embryo's zijn die we het meest nodig hebben bij selectie. Het zwangerschapspercentage in deze subgroep van patiënten is momenteel 70% en om een ​​toename tot 80% te detecteren zou randomisatie van 231 patiënten nodig zijn. Op basis van deze aantallen denken we dat het redelijk is om te beginnen met een doel van 300 patiënten in deze studie, aangezien er enkele patiënten zullen zijn die het ophalen niet halen, sommigen die geen bevruchting hebben en sommigen die geen embryo's hebben om terug te plaatsen. Beginnend met een doel van 300 patiënten, zullen we hopelijk een voldoende grote steekproef hebben om een ​​voorlopige analyse van embryo's uit te voeren, wat resulteert in een klinisch evidente zwangerschap zoals gedefinieerd door een positieve foetale hartslag.

Aangezien de uitkomst van deze studie het zwangerschapspercentage is, zullen we de verzamelde gegevens na zes maanden beoordelen om te evalueren of er een duidelijk verschil is tussen de groepen. Als er op dat moment een significant verschil is, kan de studie worden beëindigd om ervoor te zorgen dat alle patiënten kunnen profiteren van de superieure methode.

Onderzoeksprocedure De gebruikte standaard IVF-laboratoriumprotocollen zullen dezelfde zijn als die voor alle patiënten. Oöcyten worden teruggewonnen door transvaginale aspiratie van follikels onder echogeleide. Eicellen worden geïnsemineerd door intracytoplasmatische sperma-injectie of co-incubatie met sperma. De volgende ochtend worden normaal bevruchte oöcyten geïdentificeerd en verplaatst naar individuele wells in een objectglaasjeskamer en in de EmbryoScope geplaatst.

Van degenen die gerandomiseerd zijn naar klassieke evaluatie, zullen hun embryo's worden beoordeeld op basis van conventionele dagelijkse evaluatie op gespecificeerde dagelijkse tijdstippen. Deze criteria omvatten tijdige ontwikkeling naar specifieke benchmarks op 20, 26, 44, 68, 92, 116 en 140 uur na inseminatie.

De afbeeldingen zijn afkomstig van de EmbryoScope, maar zijn statisch in de tijd en beslaan geen tijdsbereik. Embryo's worden beoordeeld en geselecteerd voor overdracht volgens de conventionele criteria van het laboratorium. Bij degenen die gerandomiseerd zijn naar klassieke evaluatie plus morfokinetische parameters, wordt de embryo-evaluatie uitgevoerd met dezelfde gedefinieerde intervallen, maar met behulp van de data-analysesoftware en de vastgelegde time-lapse-beelden om timing van mitotische intervallen, splitsingsvlakken, timing van verdichting en cavitatie in embryo's op te nemen die leiden tot vorming van blastocysten.

Patiënten die ervoor kiezen om niet aan het onderzoek deel te nemen, zouden hun embryo's nog steeds laten kweken in de EmbryoScope en conventionele selectiecriteria voor embryo's zouden worden toegepast om embryo's voor terugplaatsing te identificeren.