Uso da cinética morfológica de lapso de tempo na seleção de blastocistos (Embryoscope)

Materiais e métodos:

Seleção do paciente:

Os pacientes submetidos a um ciclo de fertilização in vitro na clínica de endocrinologia reprodutiva e infertilidade da Cleveland Clinic com o plano de transferência de embriões terão a oportunidade de participar deste estudo. Gostaríamos de uma inscrição total de 300 pacientes com 150 em cada grupo. Os únicos pacientes excluídos serão aqueles submetidos a testes genéticos pré-implantação e/ou triagem cromossômica.

Desenho do estudo Este será um estudo prospectivo randomizado controlado em que todos os pacientes que concordarem em participar serão randomizados para seleção de embriões para transferência com base apenas em critérios convencionais ou, alternativamente, em critérios convencionais em conjunto com critérios morfocinéticos.

Inscrição:

Os pacientes serão inscritos no centro de fertilização in vitro de Beachwood pelos médicos do REI no momento da consulta de fertilização in vitro. Eles assinarão o consentimento informado para o estudo no momento em que assinarem o consentimento para o tratamento de fertilização in vitro, que é feito pelas enfermeiras de fertilização in vitro. O consentimento informado para o estudo será mantido no prontuário do paciente no centro de fertilização in vitro de Beachwood, juntamente com o consentimento da fertilização in vitro.

Randomization:

Os pacientes serão randomizados 1:1 para seleção de embrião convencional vs. seleção de embrioscopia usando uma sequência numérica aleatória gerada por computador. A atribuição do grupo será escrita em um pedaço de papel e colocada em envelopes opacos numerados consecutivamente por pessoal de pesquisa não envolvido na seleção de embriões. Cada paciente randomizado receberá o próximo número consecutivo e os critérios de seleção do embrião serão revelados no momento da coleta do oócito. Pacientes, médicos e funcionários do REI e ultrassonografistas não saberão como os embriões são selecionados. Somente o embriologista e a equipe do laboratório saberão em qual grupo os pacientes serão randomizados. Isso será garantido não colocando o grupo no prontuário computadorizado ou no prontuário clínico, mas apenas no prontuário laboratorial e no banco de dados da pesquisa.

Justificativa do tamanho da amostra Poucos dados publicados estão disponíveis sobre imagens de lapso de tempo e seleção de embriões humanos para transferência. Nenhuma publicação de ensaios controlados randomizados está disponível no EmbryoScope. O estatístico Benjamin Nutter foi consultado para a estimativa do tamanho da amostra. Inicialmente, com base nos resultados de 2012, havia uma taxa de gravidez de 49%. Para um poder de 80%, a fim de detectar um aumento para 55% nas taxas de gravidez sob as novas diretrizes de seleção, precisaríamos randomizar 1.088 pacientes. Para ver um aumento de 60% nas taxas de gravidez, precisaríamos randomizar 320 pacientes.

Neste estudo, vamos nos concentrar nos pacientes que têm blastocistos disponíveis para transferência, pois os blastocistos são os embriões que mais precisam de ajuda na seleção. A taxa de gravidez neste subconjunto de pacientes é atualmente de 70% e para detectar um aumento para 80% seria necessária a randomização de 231 pacientes. Com base nesses números, achamos razoável começar com uma meta de 300 pacientes neste estudo, pois haverá alguns pacientes que não chegarão à recuperação, alguns que não terão fertilização e alguns que não terão embriões progredindo para transferência. Começar com uma meta de 300 pacientes nos dará uma amostra grande o suficiente para fazer uma análise preliminar dos embriões, resultando em uma gravidez clinicamente evidente, definida pela frequência cardíaca fetal positiva.

Dado que o resultado deste estudo é a taxa de gravidez, avaliaremos os dados coletados após seis meses para avaliar se há uma diferença clara entre os grupos. Se houver uma diferença significativa nesse momento, o estudo pode ser encerrado para permitir que todos os pacientes tenham o benefício do método superior.

Procedimento de pesquisa Os protocolos básicos de laboratório de fertilização in vitro utilizados serão os mesmos usados ​​para todos os pacientes. Os ovócitos serão recuperados por aspiração transvaginal dos folículos sob orientação ultrassonográfica. Os oócitos serão inseminados por injeção intracitoplasmática de espermatozoides ou co-incubação com espermatozoides. Na manhã seguinte, os oócitos normalmente fertilizados serão identificados e movidos para poços individuais em uma câmara de lâminas e colocados no EmbryoScope.

Aqueles randomizados para avaliação clássica terão seus embriões classificados com base na avaliação diária convencional em pontos de tempo diários especificados. Esses critérios abrangem o desenvolvimento oportuno para referências específicas em 20, 26, 44, 68, 92, 116 e 140 horas após a inseminação.

As imagens serão do EmbryoScope, mas serão estáticas no tempo e não abrangerão um intervalo de tempo. Os embriões serão classificados e selecionados para transferência de acordo com os critérios convencionais do laboratório. Aqueles randomizados para avaliação clássica mais parâmetros morfocinéticos terão a avaliação do embrião realizada nos mesmos intervalos definidos, mas usando o software de análise de dados e as imagens de lapso de tempo capturadas para incluir o tempo de intervalos mitóticos, planos de clivagem, tempo de compactação e cavitação em embriões levando a formação de blastocisto.

Os pacientes que optassem por não participar do estudo ainda teriam seus embriões cultivados no EmbryoScope e os critérios convencionais de seleção de embriões seriam aplicados para identificar embriões para transferência.