Wykorzystanie kinetyki morfologicznej poklatkowej w selekcji blastocyst (Embryoscope)

Materiały i metody:

Wybór pacjenta:

Pacjenci poddawani cyklowi IVF w klinice Cleveland Clinic Reproductive Endocrinology and Infertility z planem transferu zarodka (zarodków) otrzymają możliwość udziału w tym badaniu. Chcielibyśmy łącznie zarejestrować 300 pacjentów po 150 w każdej grupie. Jedynymi wykluczonymi pacjentami będą pacjenci poddawani przedimplantacyjnym testom genetycznym i/lub badaniom przesiewowym chromosomów.

Projekt badania Będzie to prospektywne, randomizowane, kontrolowane badanie, w którym wszyscy pacjenci, którzy wyrażą zgodę na udział, zostaną losowo przydzieleni do grupy, której selekcja zarodków do transferu będzie oparta wyłącznie na konwencjonalnych kryteriach lub alternatywnie konwencjonalnych kryteriach w połączeniu z kryteriami morfokinetycznymi.

Zapisy:

Pacjenci będą rejestrowani w ośrodku Beachwood IVF przez lekarzy REI w czasie konsultacji IVF. Świadomą zgodę na badanie podpiszą w momencie podpisania zgody na zabieg IVF, który jest wykonywany przez pielęgniarki IVF. Świadoma zgoda na badanie będzie przechowywana w karcie pacjenta w ośrodku Beachwood IVF wraz ze zgodą na IVF.

Randomizacja:

Pacjenci zostaną losowo przydzieleni w stosunku 1:1 do konwencjonalnej selekcji zarodków vs. selekcji embrioskopowej przy użyciu wygenerowanej komputerowo sekwencji liczb losowych. Przydział do grupy zostanie zapisany na kartce papieru i umieszczony w kolejno ponumerowanych nieprzejrzystych kopertach przez personel badawczy niezaangażowany w selekcję zarodków. Każdemu zrandomizowanemu pacjentowi zostanie przydzielony kolejny kolejny numer, a kryteria selekcji zarodków zostaną ujawnione w momencie pobrania komórki jajowej. Pacjenci, lekarze i personel REI oraz ultrasonografowie nie będą wiedzieć, w jaki sposób wybierane są zarodki. Tylko embriolog i personel laboratorium będą świadomi, do której grupy zostaną losowo przydzieleni pacjenci. Zapewni to nieumieszczanie grupy w komputerowej dokumentacji medycznej lub karcie klinicznej, a jedynie w karcie laboratoryjnej i bazie badawczej.

Uzasadnienie dotyczące wielkości próbki Dostępnych jest niewiele opublikowanych danych na temat obrazowania poklatkowego i selekcji embrionów ludzkich do transferu. W EmbryoScope nie są dostępne żadne publikacje badań z randomizacją. W celu oszacowania wielkości próby skonsultowano się ze statystykiem Benjaminem Nutterem. Początkowo, w oparciu o wyniki z 2012 roku, wskaźnik ciąż wynosił 49%. Aby uzyskać moc 80%, aby wykryć wzrost wskaźnika ciąż do 55% zgodnie z nowymi wytycznymi dotyczącymi selekcji, musielibyśmy zrandomizować 1088 pacjentek. Aby zaobserwować wzrost wskaźnika ciąż do 60%, musielibyśmy zrandomizować 320 pacjentek.

W tym badaniu skupimy się na tych pacjentach, u których dostępne są blastocysty do transferu, ponieważ blastocysty są zarodkami, których selekcji potrzebujemy najbardziej. Wskaźnik ciąż w tej podgrupie pacjentek wynosi obecnie 70%, a wykrycie wzrostu do 80% wymagałoby randomizacji 231 pacjentek. W oparciu o te liczby uważamy, że rozsądne jest rozpoczęcie od celu 300 pacjentów w tym badaniu, ponieważ niektóre pacjentki nie dotrą do pobrania, niektóre nie będą miały zapłodnienia, a niektóre nie będą miały postępu w transferze zarodków. Począwszy od celu 300 pacjentek, miejmy nadzieję, że uzyskamy wystarczająco dużą próbkę, aby przeprowadzić wstępną analizę zarodków, w wyniku której uzyskamy klinicznie widoczną ciążę, zdefiniowaną przez dodatnie tętno płodu.

Biorąc pod uwagę, że wynikiem tego badania jest odsetek ciąż, ocenimy dane zebrane po sześciu miesiącach, aby ocenić, czy istnieje wyraźna różnica między grupami. Jeśli w tym czasie wystąpi znacząca różnica, badanie można zakończyć, aby umożliwić wszystkim pacjentom skorzystanie z lepszej metody.

Procedura badawcza Podstawowe stosowane protokoły laboratoryjne IVF będą takie same, jak stosowane w przypadku wszystkich pacjentów. Komórki jajowe zostaną pobrane przez pochwową aspirację pęcherzyków pod kontrolą USG. Oocyty będą inseminowane przez intracytoplazmatyczną iniekcję plemników lub koinkubację z plemnikami. Następnego ranka normalnie zapłodnione oocyty zostaną zidentyfikowane i przeniesione do poszczególnych dołków w komorze szkiełek i umieszczone w EmbryoScope.

Zarodki przydzielone losowo do klasycznej oceny będą oceniane na podstawie konwencjonalnej codziennej oceny w określonych dziennych punktach czasowych. Kryteria te obejmują terminowe osiągnięcie określonych wzorców po 20, 26, 44, 68, 92, 116 i 140 godzinach po inseminacji.

Obrazy będą pochodzić z EmbryoScope, ale będą statyczne w czasie i nie będą obejmować przedziału czasowego. Zarodki zostaną ocenione i wybrane do transferu zgodnie z konwencjonalnymi kryteriami laboratorium. W przypadku osób losowo przydzielonych do oceny klasycznej oraz parametrów morfokinetycznych ocena zarodków zostanie przeprowadzona w tych samych określonych odstępach czasu, ale przy użyciu oprogramowania do analizy danych i przechwyconych obrazów poklatkowych w celu uwzględnienia czasu interwałów mitotycznych, płaszczyzn cięcia, czasu zagęszczania i kawitacji w zarodkach, co prowadzi do powstawanie blastocysty.

Pacjenci, którzy zdecydują się nie uczestniczyć w badaniu, nadal będą hodować swoje zarodki w EmbryoScope, a do identyfikacji zarodków do transferu stosowane będą konwencjonalne kryteria selekcji zarodków.