Využití časosběrné morfologické kinetiky při výběru blastocyst (Embryoscope)

Materiály a metody:

Výběr pacienta:

Pacientkám podstupujícím IVF cyklus na klinice reprodukční endokrinologie a neplodnosti Cleveland Clinic s plánem transferu embrya (embryí) bude nabídnuta možnost zúčastnit se této studie. Chtěli bychom celkem 300 pacientů se 150 v každé skupině. Vyloučeni budou pouze pacienti podstupující preimplantační genetické testování a/nebo screening chromozomů.

Uspořádání studie Půjde o prospektivní randomizovanou kontrolovanou studii, ve které budou všichni pacienti, kteří souhlasí s účastí, randomizováni k selekci embryí pro transfer pouze na základě konvenčních kritérií nebo alternativně konvenčních kritérií ve spojení s morfokinetickými kritérii.

Zápis:

Pacienti budou zapsáni do IVF centra Beachwood lékaři REI v době konzultace IVF. Informovaný souhlas se studií podepíší v době, kdy podepíší souhlas s léčbou IVF, kterou provádějí sestry IVF. Informovaný souhlas se studií bude uchován v tabulce pacientů v centru IVF v Beachwood spolu se souhlasem IVF.

Randomizace:

Pacienti budou randomizováni v poměru 1:1 na konvenční selekci embryí vs. selekci embryí pomocí počítačem generované sekvence náhodných čísel. Skupinové zadání bude napsáno na kus papíru a vloženo do po sobě jdoucích očíslovaných neprůhledných obálek výzkumným personálem, který se nepodílí na selekci embryí. Každé randomizované pacientce bude přiděleno další po sobě jdoucí číslo a kritéria výběru embrya budou odhalena v době odběru oocytů. Pacienti, lékaři a personál REI a sonografisté budou zaslepeni, pokud jde o způsob výběru embryí. Pouze embryolog a personál laboratoře budou vědět, do které skupiny jsou pacienti randomizováni. To bude zajištěno tím, že skupina nebude umístěna do počítačového lékařského záznamu nebo klinického diagramu, ale pouze do laboratorního diagramu a výzkumné databáze.

Velikost vzorku Odůvodnění O časosběrném zobrazování a selekci lidských embryí pro přenos je k dispozici málo publikovaných údajů. Na EmbryoScope nejsou k dispozici žádné publikace randomizovaných kontrolovaných studií. Odhad velikosti vzorku byl konzultován se statistikem Benjaminem Nutterem. Zpočátku, na základě výsledků z roku 2012, byla míra těhotenství 49%. Pro mocninu 80 %, abychom detekovali zvýšení míry těhotenství na 55 % podle nových směrnic pro výběr, bychom museli randomizovat 1088 pacientek. Abychom viděli nárůst na 60% míru těhotenství, museli bychom randomizovat 320 pacientek.

V této studii se zaměříme na ty pacienty, kteří mají blastocysty k dispozici pro přenos, protože blastocysty jsou embrya, u kterých potřebujeme nejvíce pomoci s výběrem. Četnost otěhotnění v této podskupině pacientek je v současnosti 70 % a k detekci nárůstu na 80 % by bylo zapotřebí randomizace 231 pacientek. Na základě těchto čísel se domníváme, že je rozumné začít s cílem 300 pacientů v této studii, protože budou někteří pacienti, kteří nedosáhnou odběru, někteří bez oplodnění a někteří, u kterých žádná embrya neprojdou k přenosu. Počínaje cílem 300 pacientek nám, doufejme, poskytne dostatečně velký odběr vzorků, abychom mohli provést předběžnou analýzu embryí vedoucí ke klinicky zjevnému těhotenství definovanému pozitivní srdeční frekvencí plodu.

Vzhledem k tomu, že výsledkem této studie je míra těhotenství, vyhodnotíme data shromážděná po šesti měsících, abychom vyhodnotili, zda existuje jasný rozdíl mezi skupinami. Pokud v té době dojde k významnému rozdílu, může být studie ukončena, aby všichni pacienti mohli mít výhodu lepší metody.

Postup výzkumu Základní používané laboratorní protokoly IVF budou stejné jako u všech pacientů. Oocyty budou získány transvaginální aspirací folikulů pod ultrazvukovou kontrolou. Oocyty budou inseminovány intracytoplazmatickou injekcí spermie nebo koinkubací se spermatem. Příští ráno budou identifikovány normálně oplodněné oocyty a přesunuty do jednotlivých jamek v komůrce na sklíčka a umístěny do EmbryoScope.

Ti, kteří byli randomizováni do klasického hodnocení, budou mít svá embrya klasifikována na základě konvenčního denního hodnocení ve specifikovaných denních časových bodech. Tato kritéria zahrnují včasný vývoj ke konkrétním kritériím ve 20, 26, 44, 68, 92, 116 a 140 hodinách po inseminaci.

Snímky budou pocházet z EmbryoScope, ale budou statické v čase a nebudou pokrývat časový rozsah. Embrya budou klasifikována a vybrána pro přenos podle konvenčních kritérií laboratoře. Ti, kteří byli randomizováni do klasického hodnocení plus morfokinetických parametrů, budou mít hodnocení embryí prováděno ve stejných definovaných intervalech, ale s použitím softwaru pro analýzu dat a zachycených časosběrných snímků, aby zahrnovaly načasování mitotických intervalů, rovin štěpení, načasování zhutnění a kavitace v embryích vedoucích k tvorba blastocyst.

Pacientům, kteří se rozhodnou neúčastnit se studie, budou jejich embrya stále kultivována v EmbryoScope a k identifikaci embryí před přenosem by byla použita konvenční kritéria výběru embryí.