Ajastetun morfologisen kineetiikan käyttö blastokystien valinnassa (Embryoscope)

Materiaalit ja menetelmät:

Potilasvalinta:

Potilaille, jotka käyvät läpi IVF-syklin Cleveland Clinicin lisääntymis-endokrinologian ja hedelmättömyyden klinikalla ja jotka suunnittelevat alkioiden siirtoa, tarjotaan mahdollisuus osallistua tähän tutkimukseen. Toivomme, että potilasta otetaan yhteensä 300 ja kussakin ryhmässä 150. Ainoat potilaat, joille tehdään implantaatiota edeltävä geneettinen testaus ja/tai kromosomiseulonta, jätetään pois.

Tutkimussuunnitelma Tämä on prospektiivinen satunnaistettu kontrolloitu tutkimus, jossa kaikki potilaat, jotka suostuvat osallistumaan, satunnaistetaan saamaan alkionvalinta siirtoa varten yksinomaan tavanomaisten kriteerien tai vaihtoehtoisesti tavanomaisten kriteerien ja morfokineettisten kriteerien perusteella.

Ilmoittautuminen:

REI:n lääkärit rekisteröivät potilaat Beachwoodin IVF-keskukseen IVF-konsultaation aikana. He allekirjoittavat tietoisen suostumuksen tutkimukseen samalla, kun he allekirjoittavat suostumuksen IVF-hoitoon, jonka tekevät IVF-hoitajat. Tietoinen suostumus tutkimukseen säilytetään Beachwoodin IVF-keskuksen potilaskartassa IVF-suostumuksen kanssa.

Satunnaistaminen:

Potilaat satunnaistetaan suhteessa 1:1 tavanomaiseen alkionvalintaan vs. alkionvalintaan käyttämällä tietokoneella luotua satunnaislukusekvenssiä. Alkionvalintaan kuulumaton tutkimushenkilöstö kirjoittaa ryhmätehtävän paperille ja panee ne peräkkäin numeroituihin läpinäkymättömiin kirjekuoriin. Kullekin satunnaistetulle potilaalle annetaan seuraava peräkkäinen numero ja alkion valintakriteerit paljastetaan oosyyttihaun yhteydessä. Potilaat, REI:n lääkärit ja henkilökunta sekä sonografit sokeutuvat alkioiden valinnan suhteen. Vain embryologi ja laboratorion henkilökunta tietävät, mihin ryhmään potilaat on satunnaistettu. Tämä varmistetaan siten, että ryhmää ei sijoiteta tietokoneistettuun sairauskertomukseen tai kliiniseen karttaan, vaan ainoastaan ​​laboratoriokaavioon ja tutkimustietokantaan.

Näytteen koko Perustelu Aikaviivetystä kuvantamisesta ja ihmisalkioiden valinnasta siirtoa varten on vain vähän julkaistuja tietoja. EmbryoScopessa ei ole saatavilla julkaisuja satunnaistetuista kontrolloiduista tutkimuksista. Otoskoon arvioinnissa kysyttiin tilastotieteilijä Benjamin Nutterilta. Aluksi vuoden 2012 tulosten perusteella raskausaste oli 49 %. 80 prosentin teholla, jotta havaitsemme uusien valintaohjeiden mukaisen raskauden lisääntymisen 55 prosenttiin, meidän olisi satunnaistettava 1 088 potilasta. Jotta raskausaste nousisi 60 prosenttiin, meidän olisi satunnaistettava 320 potilasta.

Tässä tutkimuksessa keskitymme potilaisiin, joilla on siirrettävissä olevia blastokytoja, koska blastokystat ovat niitä alkioita, joiden valinnassa tarvitsemme eniten apua. Raskausaste tässä potilaiden alaryhmässä on tällä hetkellä 70 %, ja lisääntymisen havaitseminen 80 prosenttiin edellyttäisi 231 potilaan satunnaistamista. Näiden lukujen perusteella katsomme, että tässä tutkimuksessa on järkevää aloittaa tavoitteella 300 potilasta, sillä osa potilaista, jotka eivät pääse noutoon, osa, joilla ei ole hedelmöitystä, ja osa, joilla ei ole alkioita, etenee siirtoon. Aloittamalla tavoitteesta 300 potilasta, toivottavasti saamme tarpeeksi suuren näytteenoton, jotta voimme tehdä alustavan analyysin alkioista, mikä johtaa kliinisesti ilmeiseen raskauteen, joka määritellään sikiön positiivisen sykkeen perusteella.

Koska tämän tutkimuksen tulos on raskausaste, arvioimme kerätyt tiedot kuuden kuukauden kuluttua arvioidaksemme, onko ryhmien välillä selvää eroa. Jos tuolloin on merkittävä ero, tutkimus voidaan lopettaa, jotta kaikki potilaat voivat hyötyä paremmasta menetelmästä.

Tutkimusmenettely Käytettävät IVF-laboratorion perusprotokollat ​​ovat samat kuin kaikilla potilailla. Munasolut otetaan talteen aspiroimalla munarakkuloita transvaginaalisesti ultraääniohjauksessa. Oosyytit inseminoidaan intrasytoplasmisella siittiöinjektiolla tai yhdessä siittiöiden kanssa inkuboimalla. Seuraavana aamuna normaalisti hedelmöittyneet munasolut tunnistetaan ja siirretään yksittäisiin kuoppiin objektilasikammiossa ja asetetaan EmbryoScopeen.

Klassiseen arviointiin satunnaistettujen alkiot luokitellaan tavanomaisen päivittäisen arvioinnin perusteella tiettyinä päivittäisinä aikoina. Nämä kriteerit sisältävät oikea-aikaisen kehittämisen tiettyihin vertailuarvoihin 20, 26, 44, 68, 92, 116 ja 140 tunnin kuluttua siemennyksestä.

Kuvat ovat peräisin EmbryoScopesta, mutta ne ovat staattisia ajassa eivätkä kata aikaväliä. Alkiot luokitellaan ja valitaan siirtoa varten laboratorion tavanomaisten kriteerien mukaan. Niille, jotka on satunnaistettu klassiseen arviointiin plus morfokineettisiin parametreihin, alkioiden arviointi suoritetaan samoin määritellyin väliajoin, mutta käyttämällä data-analyysiohjelmistoa ja kaapattuja time-lapse kuvia sisältämään mitoottisten intervallien ajoituksen, katkaisutasot, tiivistymisen ja kavitaatioiden ajoituksen alkioissa, jotka johtavat blastokystin muodostuminen.

Potilaat, jotka eivät halua osallistua tutkimukseen, viljelevät edelleen alkioitaan EmbryoScopessa ja tavanomaisia ​​alkioiden valintakriteereitä sovellettaisiin alkioiden tunnistamiseen siirtoa varten.