Effekter af en kortvarig kaloriebegrænsning på T-celleaktivering i fedt

Formålet med denne forskning er at undersøge, om fedtvævets immunometaboliske egenskaber og de inflammatoriske celler i det kan modificeres af kortvarige ændringer i ernæringsstatus.

Efter annoncering af undersøgelsen, vil interesserede potentielle deltagere blive bedt om at kontakte Chief Investigator for yderligere information via e-mail/telefonkorrespondance. Der vil være en indledende vurdering af berettigelse baseret på inklusions-/udelukkelseskriterier, og hvis disse krav er opfyldt, vil den potentielle deltager blive inviteret til et møde for at diskutere forsøget yderligere. Efter at de har læst deltagerinformationsarket og set flowdiagrammet, der skitserer tidslinjen for undersøgelsen, vil de blive bedt om at underskrive en samtykkeerklæring, hvis de ønsker at deltage. Datoer vil derefter blive planlagt for nogle foreløbige antropometriske målinger, 1 uges diæt og fysisk aktivitetsovervågning og 3 dages kaloriebegrænsning med forsøgsdatoer på begge sider.

Foreløbige mål:

Indledende test vil omfatte antropometriske målinger af højde, vægt, talje- og hofteomkreds, sagittal taljehøjde og blodtryk. Deltagerne vil også få vurderet deres kropssammensætning præcist ved hjælp af et dobbeltenergi røntgenabsorptiometer (DEXA). Disse målinger vil finde sted på University of Bath Physiology Laboratories.

Overvågning af energibalance:

I 1 uge vil deltagerne blive udstyret med en fysisk aktivitetsmonitor (Actiheart™) og bedt om at optage en tilsvarende dagbog over deres fysiske aktivitet i denne periode for at hjælpe med fortolkningen og muliggøre en mere nøjagtig beregning af det gennemsnitlige daglige energiforbrug. Deltagerne vil også blive bedt om at registrere deres mad- og drikkeindtag i denne periode, så deres tilsvarende energiindtag i denne periode kan analyseres og dermed deres 'energibalance' kan estimeres. Deltagerne bør ikke foretage bevidste ændringer i deres normale livsstilsvaner/rutiner i denne periode. Denne analyse vil derefter blive brugt til at skrive en 'diætrecept' i de 3 dage for at sikre, at deltageren vil modtage 50 % af deres 'normale' kalorieindtag ved at bruge fødevarer, de normalt ville indtage.

Hovedprøve dag 1:

I de 2 dage forud for den første hovedforsøgsdag bør deltagerne afstå fra at udføre anstrengende fysisk aktivitet. Inden for 24 timer før bør deltagerne også afstå fra at indtage alkohol eller koffein. Deltagerne skal ankomme til det fysiologiske hvilelaboratorium om morgenen efter en 10 timers faste (ca. kl. 8), hvor blodtrykket vil blive målt og en spytprøve udtaget. En kanyle vil blive indsat i en underarmsvene og baseline-blodprøve(r) taget til analyse af metaboliske/inflammatoriske markører og isolering af T-celler. En fedtprøve vil også blive opnået ved hjælp af en nålespirationsteknik. Deltageren vil derefter blive bedt om at indtage en glukosedrik bestående af 75 g vandfri glukose (113 mL Polycal og 87 mL vand) og en kanyleblodprøve taget hvert 15. minut i de følgende 2 timer.

Intervention - 3 dages kaloriebegrænsning:

I de følgende 3 dage vil deltagerne blive instrueret i at indtage en diæt, der er beregnet til at være 50 % af deres 'normale' energiindtag ved at reducere andelen af ​​den normale forbrugte diæt. Ingen anstrengende fysisk aktivitet bør udføres af deltageren i de sidste 2 dage af denne 3-dages periode, og på den sidste dag af denne intervention bør der ikke indtages koffein eller alkohol.

Hovedprøve dag 2:

Den følgende dag efter de 3 dages kaloriebegrænsning ankommer deltagerne til laboratoriet på samme tid som på hovedforsøgsdag 1 (for at minimere variationen i tidspunktet for prøvetagning) og vil gennemgå nøjagtig de samme procedurer.

Analyse:

På dagen for forsøget vil fuldblod blive analyseret for antal hvide blodlegemer. Plasma- og serumprøver vil blive ekstraheret fra fuldblodet via centrifugering og opbevaret ved -80 grader C. Monocytter og T-lymfocytter (populationer af hvide blodlegemer) vil også blive isoleret fra fuldblod og opbevaret for senere at vurdere ændringer i deres proportioner og aktivering efter kaloriebegrænsningsperioden. I hver fedtprøve vil separate portioner af enten fedtvæv eller adipocytter (isoleret fra de andre celler i fedtvævet ved hjælp af en fordøjelsesmetode) blive dyrket og medier indsamlet til senere undersøgelser. De resterende celler fra fedtvævet (SVF) vil også blive opbevaret til senere analyse af cellepopulationer og deres aktivering ved hjælp af flowcytometri og ekspression/sekretionsanalyse. mRNA-ekspression vil også blive undersøgt i fedtvæv.