Effecten van een caloriebeperking op korte termijn op T-celactivering in vet

Het doel van dit onderzoek is na te gaan of de immunometabolische eigenschappen van vetweefsel en de ontstekingscellen die zich daarin bevinden kunnen worden gewijzigd door kortetermijnveranderingen in de voedingstoestand.

Na aankondiging van het onderzoek zullen geïnteresseerde potentiële deelnemers worden gevraagd contact op te nemen met de hoofdonderzoeker voor meer informatie via e-mail/telefooncorrespondentie. Er zal een eerste beoordeling plaatsvinden van geschiktheid op basis van inclusie-/uitsluitingscriteria en, als aan deze vereisten is voldaan, zal de potentiële deelnemer worden uitgenodigd voor een bijeenkomst om de studie verder te bespreken. Nadat ze het deelnemersinformatieblad hebben gelezen en het stroomschema met de tijdlijn voor het onderzoek hebben gezien, zullen ze, als ze willen deelnemen, worden gevraagd een toestemmingsformulier te ondertekenen. Er worden dan data ingepland voor enkele voorlopige antropometrische metingen, 1 week dieet- en fysieke activiteitsmonitoring en 3 dagen caloriebeperking met proefdata aan weerszijden.

Voorlopige metingen:

Voorafgaande tests omvatten antropometrische metingen van lengte, gewicht, taille- en heupomtrek, sagittale taillehoogte en bloeddruk. Deelnemers zullen ook hun lichaamssamenstelling nauwkeurig laten beoordelen met behulp van een dual energy X-ray absorptiometer (DEXA). Deze metingen zullen plaatsvinden bij de University of Bath Physiology Laboratories.

Bewaking van de energiebalans:

Gedurende 1 week zullen de deelnemers worden uitgerust met een fysieke activiteitsmonitor (Actiheart™) en gevraagd om een ​​bijbehorend dagboek bij te houden van hun fysieke activiteit tijdens deze periode om de interpretatie te vergemakkelijken en een nauwkeurigere berekening van het gemiddelde dagelijkse energieverbruik voor activiteiten mogelijk te maken. Deelnemers wordt ook gevraagd hun inname van eten en drinken tijdens deze periode vast te leggen, zodat hun overeenkomstige energie-inname tijdens deze periode kan worden geanalyseerd en zo hun 'energiebalans' kan worden geschat. Deelnemers mogen tijdens deze periode geen bewuste veranderingen aanbrengen in hun normale levensstijl/routines. Deze analyse zal vervolgens worden gebruikt om een ​​'dieetrecept' voor de 3 dagen uit te schrijven om ervoor te zorgen dat de deelnemer 50% van zijn 'normale' calorie-inname binnenkrijgt met voedsel dat hij normaal zou consumeren.

Hoofdproefdag 1:

In de 2 dagen voorafgaand aan de eerste hoofdproefdag dienen deelnemers af te zien van zware fysieke activiteiten. In de 24 uur voorafgaand moeten deelnemers ook afzien van het nuttigen van alcohol of cafeïne. Deelnemers moeten 's ochtends aankomen in het fysiologisch rustlaboratorium na 10 uur vasten (ongeveer 8 uur) waar de bloeddruk wordt gemeten en een speekselmonster wordt verzameld. Er wordt een canule in een ader van de onderarm ingebracht en basislijnbloedmonster(s) worden genomen voor analyse van metabole/inflammatoire markers en isolatie van T-cellen. Er zal ook een vetmonster worden verkregen met behulp van een naaldaspiratietechniek. De deelnemer wordt vervolgens gevraagd om een ​​glucosedrank te consumeren bestaande uit 75 g watervrije glucose (113 ml Polycal en 87 ml water) en een bloedmonster via een canule dat gedurende de volgende 2 uur elke 15 minuten wordt afgenomen.

Interventie - 3 dagen caloriebeperking:

Gedurende de volgende 3 dagen krijgen de deelnemers de instructie om een ​​dieet te consumeren dat berekend is op 50% van hun 'normale' energie-inname door de proporties van het normale dieet te verminderen. Gedurende de laatste 2 dagen van deze periode van 3 dagen mag de deelnemer geen zware lichamelijke activiteit uitoefenen en op de laatste dag van deze interventie mag er geen cafeïne of alcohol worden geconsumeerd.

Hoofdproefdag 2:

De volgende dag, na de 3 dagen caloriebeperking, arriveren de deelnemers op hetzelfde tijdstip als op dag 1 van het hoofdonderzoek in het laboratorium (om variatie in de timing van de monsterafname te minimaliseren) en ondergaan ze exact dezelfde procedures.

Analyse:

Op de dag van de proef wordt volbloed geanalyseerd op het aantal witte bloedcellen. Plasma- en serummonsters zullen via centrifugatie uit het volbloed worden gehaald en bij -80 ° C worden bewaard. Monocyten en T-lymfocyten (populaties van witte bloedcellen) zullen ook uit volbloed worden geïsoleerd en opgeslagen om later veranderingen in hun proporties en activering te beoordelen. na de calorierestrictieperiode. In elk vetmonster worden afzonderlijke delen van vetweefsel of adipocyten (geïsoleerd van de andere cellen in het vetweefsel met behulp van een verteringsmethode) gekweekt en media verzameld voor later onderzoek. De resterende cellen van het vetweefsel (SVF) zullen ook worden opgeslagen voor latere analyse van celpopulaties en hun activering met behulp van flowcytometrie en expressie-/secretieanalyse. mRNA-expressie zal ook in vetweefsel worden onderzocht.