Влияние кратковременного ограничения калорийности на активацию Т-клеток в жире

Целью этого исследования является изучение того, могут ли иммунометаболические свойства жировой ткани и воспалительных клеток, расположенных в ней, быть изменены кратковременными изменениями в нутритивном статусе.

После объявления об исследовании заинтересованным потенциальным участникам будет предложено связаться с главным исследователем для получения дополнительной информации по электронной почте/телефонной переписке. Будет проведена первоначальная оценка приемлемости на основе критериев включения/исключения, и, если эти требования соблюдены, потенциальный участник будет приглашен на встречу для дальнейшего обсуждения испытания. После того, как они прочитают информационный лист участника и увидят блок-схему с указанием сроков исследования, если они захотят принять участие, их попросят подписать форму согласия. Затем будут назначены даты некоторых предварительных антропометрических измерений, 1 неделя диеты и мониторинга физической активности и 3 дня ограничения калорий с датами испытаний с обеих сторон.

Предварительные измерения:

Предварительное тестирование будет включать антропометрические измерения роста, веса, окружности талии и бедер, сагиттальной высоты талии и артериального давления. Участникам также будет проведена точная оценка состава их тела с помощью двухэнергетического рентгеновского абсорбциометра (DEXA). Эти измерения будут проводиться в лабораториях физиологии Университета Бата.

Мониторинг энергетического баланса:

На 1 неделю участникам снабдят монитором физической активности (Actiheart™) и попросят вести соответствующий дневник их физической активности в течение этого периода, чтобы облегчить его интерпретацию и обеспечить более точный расчет среднего ежедневного расхода энергии. Участников также попросят записывать потребление пищи и напитков в течение этого периода, чтобы можно было проанализировать их соответствующее потребление энергии в течение этого периода и, таким образом, можно было оценить их «энергетический баланс». Участники не должны вносить какие-либо сознательные изменения в свой обычный образ жизни/распорядок в течение этого периода. Затем этот анализ будет использован для написания «рецепта диеты» на 3 дня, чтобы гарантировать, что участник будет получать 50% своего «нормального» потребления калорий, используя продукты, которые они обычно потребляют.

Основной пробный день 1:

За 2 дня до первого дня основного испытания участники должны воздерживаться от любых физических нагрузок. За 24 часа до начала участники также должны воздерживаться от употребления алкоголя или кофеина. Участники должны прибыть в лабораторию физиологии отдыха утром после 10-часового голодания (примерно в 8 утра), где будет измерено артериальное давление и взят образец слюны. Канюля будет вставлена ​​​​в вену предплечья и взяты исходные образцы крови для анализа метаболических / воспалительных маркеров и выделения Т-клеток. Образец жира также будет получен с использованием метода аспирации иглой. Затем участнику будет предложено выпить напиток с глюкозой, состоящий из 75 г безводной глюкозы (113 мл Polycal и 87 мл воды) и образца крови из канюли, взятого каждые 15 минут в течение следующих 2 часов.

Вмешательство - 3-дневное ограничение калорий:

В течение следующих 3 дней участникам будет предложено соблюдать диету, рассчитанную на 50% от их «нормального» потребления энергии, путем уменьшения пропорций потребляемой обычной диеты. Участник не должен выполнять напряженную физическую активность в течение последних 2 дней этого 3-дневного периода, а в последний день этого вмешательства нельзя употреблять кофеин или алкоголь.

Основной пробный день 2:

На следующий день после 3 дней ограничения калорий участники прибудут в лабораторию в то же время, что и в первый день основного испытания (чтобы свести к минимуму разницу во времени сбора образцов), и пройдут точно такие же процедуры.

Анализ:

В день испытания цельная кровь будет проанализирована на количество лейкоцитов. Образцы плазмы и сыворотки будут извлечены из цельной крови путем центрифугирования и сохранены при температуре -80°C. Моноциты и Т-лимфоциты (популяции лейкоцитов) также будут выделены из цельной крови и сохранены для последующей оценки изменений их пропорций и активации. после периода ограничения калорий. В каждом образце жира будут культивироваться отдельные порции либо жировой ткани, либо адипоцитов (выделенных из других клеток жировой ткани с помощью метода расщепления), а среда будет собираться для последующих исследований. Остальные клетки из жировой ткани (SVF) также будут храниться для последующего анализа клеточных популяций и их активации с использованием проточной цитометрии и анализа экспрессии/секреции. Экспрессию мРНК также исследуют в жировой ткани.