Effekter av en kortvarig kalorirestriksjon på T-celleaktivering i fett

Målet med denne forskningen er å undersøke om de immunmetabolske egenskapene til fettvev og de inflammatoriske cellene som befinner seg i det kan modifiseres av kortsiktige endringer i ernæringsstatus.

Etter annonsering av studien vil interesserte potensielle deltakere bli bedt om å kontakte hovedetterforskeren for ytterligere informasjon via e-post/telefonkorrespondanse. Det vil være en innledende vurdering av kvalifisering basert på inkluderings-/eksklusjonskriterier, og hvis disse kravene er oppfylt, vil den potensielle deltakeren bli invitert til et møte for å diskutere prøven videre. Etter at de har lest deltakerinformasjonsarket og sett flytskjemaet som skisserer tidslinjen for studien, hvis de ønsker å delta, vil de bli bedt om å signere et samtykkeskjema. Datoer vil da bli planlagt for noen foreløpige antropometriske målinger, 1 uke med kosthold og fysisk aktivitetsovervåking og 3 dager med kalorirestriksjon med prøvedatoer på hver side.

Foreløpige mål:

Foreløpig testing vil omfatte antropometriske målinger av høyde, vekt, midje- og hofteomkrets, sagittal midjehøyde og blodtrykk. Deltakerne vil også få kroppssammensetningen nøyaktig vurdert ved hjelp av et dobbeltenergi røntgenabsorptiometer (DEXA). Disse målingene vil finne sted ved University of Bath Physiology Laboratories.

Overvåking av energibalansen:

I 1 uke vil deltakerne bli utstyrt med en fysisk aktivitetsmonitor (Actiheart™) og bedt om å registrere en tilsvarende dagbok over deres fysiske aktivitet i løpet av denne perioden for å hjelpe til med tolkningen og tillate en mer nøyaktig beregning av gjennomsnittlig daglig aktivitetsenergiforbruk. Deltakerne vil også bli bedt om å registrere mat- og drikkeinntaket i denne perioden slik at deres tilsvarende energiinntak i denne perioden kan analyseres og dermed deres 'energibalanse' kan estimeres. Deltakere bør ikke gjøre noen bevisste endringer i sine vanlige livsstilsvaner/rutiner i denne perioden. Denne analysen vil deretter bli brukt til å skrive en "diettresept" for de 3 dagene for å sikre at deltakeren vil motta 50 % av sitt "normale" kaloriinntak ved å bruke mat de normalt ville konsumert.

Hovedprøve dag 1:

I løpet av de 2 dagene før den første hovedprøvedagen, bør deltakerne avstå fra å utføre anstrengende fysisk aktivitet. I løpet av 24 timer før bør deltakerne også avstå fra å innta alkohol eller koffein. Deltakerne bør ankomme fysiologisk hvilelaboratorium om morgenen etter en 10 timers faste (omtrent kl. 08.00) hvor blodtrykket vil bli målt og en spyttprøve tatt. En kanyle vil bli satt inn i en underarmsvene og baseline blodprøve(r) tatt for analyse av metabolske/inflammatoriske markører og isolering av T-celler. En fettprøve vil også bli tatt med en nålespirasjonsteknikk. Deltakeren vil deretter bli bedt om å innta en glukosedrikk bestående av 75 g vannfri glukose (113 ml Polycal og 87 ml vann) og en kanyleblodprøve tatt hvert 15. minutt i de følgende 2 timene.

Intervensjon - 3 dagers kaloribegrensning:

I de påfølgende 3 dagene vil deltakerne bli bedt om å innta en diett beregnet til å være 50 % av deres "normale" energiinntak ved å redusere proporsjonene av den normale dietten som konsumeres. Ingen anstrengende fysisk aktivitet skal utføres av deltakeren de siste 2 dagene av denne 3-dagersperioden, og på den siste dagen av denne intervensjonen skal ingen koffein eller alkohol inntas.

Hovedprøve dag 2:

Den påfølgende dagen etter de 3 dagene med kalorirestriksjon, vil deltakerne ankomme laboratoriet på samme tid som på hovedforsøksdag 1 (for å minimere variasjonen i tidspunktet for prøvetaking) og vil gjennomgå nøyaktig de samme prosedyrene.

Analyse:

På prøvedagen vil fullblod bli analysert for antall hvite blodlegemer. Plasma- og serumprøver vil bli ekstrahert fra fullblodet via sentrifugering og lagret ved -80 grader C. Monocytter og T-lymfocytter (populasjoner av hvite blodlegemer) vil også bli isolert fra fullblod og lagret for senere å vurdere endringer i proporsjoner og aktivering. etter kalorirestriksjonsperioden. I hver fettprøve vil separate porsjoner av enten fettvev eller adipocytter (isolert fra de andre cellene i fettvevet ved hjelp av en fordøyelsesmetode) dyrkes og media samles inn for senere undersøkelser. De gjenværende cellene fra fettvevet (SVF) vil også bli lagret for senere analyse av cellepopulasjoner og deres aktivering ved bruk av flowcytometri, og ekspresjons/sekresjonsanalyse. mRNA-ekspresjon vil også bli undersøkt i fettvev.