Mastcelleaktiveringstest ved allergisk sygdom

Formålet med denne undersøgelse er at vurdere, om patienter med alvorlige allergiske sygdomme udviser høje niveauer af mastcelleaktivering som bestemt af den diagnostiske mastcelleaktiveringstest, som efterforskerne har udviklet. De forventer, at patienter med en historie med alvorlige allergiske reaktioner vil vise sig som høje respondere i den blodbaserede diagnostiske mastcelleaktiveringstest. Ved at bruge mikroarray-analyse som tilgang til genekspressionsundersøgelser forudser de desuden, at genomiske biomarkører, der er korreleret med den høje funktionelle aktivering af in vitro-mastceller afledt af disse patienter, let kan identificeres.

Omkring 100 ml perifert veneblod fra individuelle patienter vil blive trukket ind i hepariniserede sprøjter og opsamlet i en blodopsamlingspose/rør indeholdende silica. Posen/røret vil straks blive behandlet til generering af primære humane mastcellekulturer ved hjælp af den protokol, der tidligere er blevet udviklet [Inflammation Research 66: 25 (2017). Efter dyrkning i 9 uger vil de resulterende humane mastceller blive analyseret for både deres funktionelle aktivitet i form af histaminfrigivelse som reaktion på aktiveringen af ​​højaffinitetsimmunoglobulin E (IgE)-receptorer i disse celler og deres genekspressionsprofiler ved hjælp af mikroarray-analyse . In vitro funktionelle data og genomiske data vil blive korreleret med specifikke diagnoser og målinger af blodprostaglandin D2 (PGD2), PGD2 metabolitter, tryptase og histamin niveauer i blodet. Til mediatorassays vil plasma fra hvert individ blive opsamlet efter klynge af differentierings-34-positive (CD34+)-isoleringstrin, og prøverne vil blive uddelt og frosset ved -80 grader celsius til efterfølgende analyse.