Тест активации тучных клеток при аллергических заболеваниях

Целью данного исследования является оценка того, проявляются ли у пациентов с тяжелыми аллергическими заболеваниями высокие уровни активации тучных клеток, что определяется диагностическим тестом активации тучных клеток, разработанным исследователями. Они ожидают, что пациенты с тяжелыми аллергическими реакциями в анамнезе будут проявлять высокий ответ в диагностическом тесте активации тучных клеток на основе крови. Кроме того, используя анализ микрочипов в качестве подхода к изучению экспрессии генов, они ожидают, что геномные биомаркеры, которые коррелируют с высокой функциональной активацией тучных клеток in vitro, полученных от этих пациентов, могут быть легко идентифицированы.

Около 100 мл периферической венозной крови от отдельных пациентов набирают в гепаринизированные шприцы и собирают в мешок/пробирку для сбора крови, содержащую кремнезем. Пакет/пробирка будет быстро обработана для получения первичных культур тучных клеток человека с использованием ранее разработанного протокола [Inflammation Research 66: 25 (2017). После культивирования в течение 9 недель полученные тучные клетки человека будут проанализированы как на их функциональную активность с точки зрения высвобождения гистамина в ответ на активацию высокоаффинных рецепторов иммуноглобулина Е (IgE) в этих клетках, так и на профили экспрессии их генов с использованием микрочипового анализа. . Функциональные и геномные данные in vitro будут коррелированы с конкретными диагнозами и измерениями уровня простагландина D2 (PGD2) в крови, метаболитов PGD2, уровней триптазы и гистамина в крови. Для анализа медиаторов плазма от каждого субъекта будет собираться после этапа выделения кластера дифференцировки 34 положительных (CD34+), и образцы будут разделены на аликвоты и заморожены при -80 градусах по Цельсию для последующего анализа.