Test d'activation des mastocytes dans les maladies allergiques

L'objectif de cette étude est d'évaluer si les patients atteints de maladies allergiques graves présentent des niveaux élevés d'activation des mastocytes, tels que déterminés par le test de diagnostic d'activation des mastocytes que les chercheurs ont mis au point. Ils prévoient que les patients ayant des antécédents de réactions allergiques graves apparaîtront comme des répondeurs élevés dans le test de diagnostic d'activation des mastocytes à base de sang. De plus, en utilisant l'analyse des microréseaux comme approche pour les études d'expression génique, ils prévoient en outre que les biomarqueurs génomiques qui sont corrélés à l'activation fonctionnelle élevée des mastocytes in vitro dérivés de ces patients peuvent être facilement identifiés.

Environ 100 ml de sang veineux périphérique de patients individuels seront prélevés dans des seringues héparinées et recueillis dans un sac/tube de prélèvement sanguin contenant de la silice. Le sac/tube sera rapidement traité pour la génération de cultures primaires de mastocytes humains en utilisant le protocole qui a été précédemment développé [Inflammation Research 66 : 25 (2017). Après 9 semaines de culture, les mastocytes humains résultants seront analysés à la fois pour leur activité fonctionnelle en termes de libération d'histamine en réponse à l'activation des récepteurs d'immunoglobuline E (IgE) de haute affinité dans ces cellules et leurs profils d'expression génique à l'aide d'une analyse par microréseau . Les données fonctionnelles et génomiques in vitro seront corrélées avec des diagnostics spécifiques et des mesures de la prostaglandine sanguine D2 (PGD2), des métabolites PGD2, des niveaux de tryptase et d'histamine dans le sang. Pour les dosages de médiateurs, le plasma de chaque sujet sera collecté après l'étape d'isolement du groupe de différenciation 34 positifs (CD34 +) et les échantillons seront aliquotés et congelés à -80 degrés centigrades pour une analyse ultérieure.