Mastcelactiveringstest bij allergische aandoeningen

Het doel van deze studie is om te beoordelen of patiënten met ernstige allergische aandoeningen hoge niveaus van mestcelactivatie vertonen, zoals bepaald door de diagnostische test voor mestcelactivatie die de onderzoekers hebben ontwikkeld. Ze verwachten dat patiënten met een voorgeschiedenis van ernstige allergische reacties zullen verschijnen als high-responders in de op bloed gebaseerde diagnostische test voor mestcelactivatie. Bovendien anticiperen ze, met behulp van microarray-analyse als benadering voor genexpressiestudies, verder dat genomics-biomarkers die gecorreleerd zijn met de hoge functionele activering van de in vitro mestcellen afkomstig van deze patiënten, gemakkelijk kunnen worden geïdentificeerd.

Ongeveer 100 ml perifeer veneus bloed van individuele patiënten wordt opgezogen in gehepariniseerde injectiespuiten en opgevangen in een bloedverzamelzak/buis die silica bevat. De zak/buis zal direct worden verwerkt voor het genereren van primaire menselijke mestcelculturen met behulp van het protocol dat eerder is ontwikkeld [Inflammation Research 66: 25 (2017). Na 9 weken kweken, zullen de resulterende menselijke mestcellen worden geanalyseerd op zowel hun functionele activiteit in termen van histamine-afgifte als reactie op de activering van Immunoglobuline E (IgE)-receptoren met hoge affiniteit in deze cellen als hun genexpressieprofielen met behulp van microarray-analyse. . De in-vitro functionele en genomics data zullen gecorreleerd worden met specifieke diagnoses en metingen van bloed prostaglandine D2 (PGD2), PGD2 metabolieten, tryptase en histamine niveaus in het bloed. Voor mediatorassays wordt plasma van elke proefpersoon verzameld na de cluster van differentiatie 34 positieve (CD34+) isolatiestap en de monsters worden verdeeld en ingevroren bij -80 graden Celsius voor daaropvolgende analyse.