Autologe mononukleære blodceller i perifert blod hos diabetiske fodpatienter med kritisk ekstrem iskæmi uden valgmuligheder

Dette er et interventionsstudie med historisk kontrolgruppe udført for at vurdere som primært resultat større amputationer, samlet dødelighed, antal helbredte patienter i en gruppe af patienter, der modtog gentagne intramuskulære implantater af PBMNC'er (3 gange; 4-ugers interval) i sammenligning til en historisk intern kontrolgruppe med 1:1 case-control ratio. Sekundære udfald er TCPO2, helingstid og hvilesmerter.

Kritisk lemmeriskæmi uden mulighed er defineret ved tegn på, at pedalkar ikke løber af, svigt efter flere perkutane indgreb og ikke længere mulig re-intervention, svigt efter infragenikulær bypass-transplantation, ingen gangkapacitet med alvorlige komorbiditeter uegnet til kirurgisk eller endovaskulære procedurer.

Inklusionskriterier er: a) sår med utilstrækkelig perfusion, som angivet ved en transkutan oxygentrykværdi (TcpO2) <30 mmHg; b) sår med grad I eller II eller III og stadium C som defineret af Texas University Classification System eller W1,2,3 - I 3 - FI 0,1 som defineret af WiFI Classification System c) ikke kvalificerede til angioplastik eller vaskulær kirurgi eller efter mislykket revaskularisering; d) mulighed for at spare fodstøtte.

Eksklusionskriterier er: a) læsionssted over tibial-tarsalleddet; b) moderat eller svær infektion ifølge WiFI-klassifikationssystemet; c) NYHA klasse IV; d) Anæmi (Hb<8g/dl); e) koagulationsforstyrrelse/trombocytopeni (PLT < 50.000 pr. mikroliter); f) aktiv cancer/leukæmi eller lymfom hæmatologisk sygdom.

Standard for behandling i begge grupper inkluderer: maksimering af diabeteskontrol af diabetologen, omfattende fodvurdering af sygeplejersken sammen med diabetologen, herunder bestemmelse af vibrationsopfattelsestærskel, 10-g monofilamenttest og TcpO2-måling, forbindinger, aflastning og systemisk terapi i henhold til IWGDF-retningslinjerne.

Informeret samtykke til deltagelse i undersøgelsen under forløbet af det kliniske forsøg opnås fra alle forsøgspersoner.

Koncentration af PB-MNCs autolog celleterapi er produceret af en filtreringsbaseret point-of-care-enhed med det beregnede til brug intra-operativt, fra 120 ml antikoaguleret blod. Alle procedurer udføres i operationsstuen med anæstesiologisk støtte (propofol og/eller perifer blok). Blodudtagning (120 ml) opsamles gennem en perifer venøs adgang og fyldes og tyngdekraftfiltrering tillades i ca. 10 minutter. Under filtrering fanges MNC'er i filteret, mens plasma, blodplader (PLT'er) og røde blodlegemer (RBC'er) ikke tilbageholdes. Efter passende kirurgisk debridering af sårlejet injiceres flere perilesionelle og intramuskulære injektioner af PBMNC-celler suspension (0,2-0,3cc i bolus) langs den relevante akse under knæet, med intervaller på 1-2 cm og til en gennemsnitlig dybde på 1,5- 2 cm med en 21G nål. Denne procedure gentages på hver patient i tre gange med intervaller på 30-45 dage fra hinanden.

Fodbesparende kirurgi, fjernelse af alt ulevedygtigt væv og rekonstruktion af foden for at tillade en funktionel deambulering, udføres samtidig med det sidste implantat hos patienter med øget TcpO2-værdi over 30 mmHg. Mellem implantaterne evaluerede diabetologer sammen med sygeplejersker ændringer i smerte, infektionstegn, sårstørrelse, afgrænsning af nekrosen, granulationsvævsdannelse, perilesionel vævstrofisme og TcpO2-værdi for at optimere plejestandarden. Efter første behandling registreres en to års opfølgning med evaluering ved 1-3-6-12-18-24 måneder.

Der udføres en baseline vurdering for at estimere eventuelle forskelle mellem tilfælde og kontroller før behandlingen. Statistisk evaluering inkluderer ikke-parametriske test (Mann-Whitney U-test for uafhængige prøver for kontinuerlige variable og Cochrane chi-square-test for diskrete variabler), evaluering af relativ risiko (RR), absolut risikoreduktion (ARR), relativ risikoreduktion (RRR). ) og Number Needed to Treat (NNT), multivariat overlevelsesanalyse (Kaplan-Meiers overlevelsesanalysemodel).