Autologe periphere mononukleäre Blutzellen bei diabetischen Fußpatienten mit kritischer Extremitätenischämie ohne Option

Dies ist eine Interventionsstudie mit historischer Kontrollgruppe, die durchgeführt wurde, um als primäres Ergebnis Major-Amputationen, Gesamtmortalität, Anzahl geheilter Patienten in einer Gruppe von Patienten, die wiederholt intramuskuläre Implantate von PBMNC (3 Mal; 4-Wochen-Intervall) erhielten, im Vergleich zu bewerten zu einer historischen internen Kontrollgruppe mit einem Fall-Kontroll-Verhältnis von 1:1. Sekundäre Endpunkte sind TCPO2, Heilungszeit und Ruheschmerz.

Eine kritische Extremitätenischämie ohne Option ist definiert durch den Nachweis, dass keine Pedalgefäße abfließen, ein Versagen nach mehreren perkutanen Eingriffen und nicht mehr möglicher erneuter Intervention, ein Versagen nach einer infragenikulären Bypass-Operation, keine Gehfähigkeit mit schweren Komorbiditäten, die für einen chirurgischen Eingriff ungeeignet sind, oder endovaskuläre Verfahren.

Einschlusskriterien sind: a) Ulzera mit unzureichender Durchblutung, angezeigt durch einen transkutanen Sauerstoffdruckwert (TcpO2) < 30 mmHg; b) Geschwüre mit Grad I oder II oder III und Stadium C gemäß Definition des Klassifikationssystems der Texas University oder W1,2,3 - I 3 - FI 0,1 gemäß Definition des WiFI-Klassifikationssystems c) nicht geeignet für Angioplastie oder vaskulär Operation oder nach fehlgeschlagener Revaskularisierung; d) Möglichkeit, die Fußstütze einzusparen.

Ausschlusskriterien sind: a) Läsionsstelle oberhalb des Tibia-Tarsal-Gelenks; b) mittelschwere oder schwere Infektion gemäß dem WiFI-Klassifizierungssystem; c) NYHA-Klasse IV; d) Anämie (Hb < 8 g/dl); e) Gerinnungsstörung/Thrombozytopenie (PLT < 50.000 pro Mikroliter); f) aktive hämatologische Krebs-/Leukämie- oder Lymphomerkrankung.

Der Behandlungsstandard in beiden Gruppen umfasst: Maximierung der Diabeteskontrolle durch den Diabetologen, umfassende Fußbewertung durch die Pflegekraft zusammen mit dem Diabetologen, einschließlich Bestimmung der Vibrationswahrnehmungsschwelle, 10-g-Monofilamenttest und TcpO2-Messung, Verbände, Entlastung und systemische Therapie gemäß den IWGDF-Richtlinien .

Die informierte Zustimmung zur Teilnahme an der Studie während des Fortschritts der klinischen Studie wird von allen Probanden eingeholt.

Die Konzentration der autologen Zelltherapie von PB-MNCs wird durch ein filtrationsbasiertes Point-of-Care-Gerät mit dem für den intraoperativen Gebrauch vorgesehenen Gerät aus 120 ml antikoaguliertem Blut hergestellt. Alle Eingriffe werden im Operationssaal mit anästhesiologischer Unterstützung (Propofol und/oder periphere Blockade) durchgeführt. Die Blutentnahme (120 ml) wird durch einen peripheren venösen Zugang gesammelt, dann in etwa 10 Minuten geladen und durch Schwerkraft filtriert. Während der Filtration werden MNCs im Filter eingefangen, während Plasma, Blutplättchen (PLTs) und rote Blutkörperchen (RBCs) nicht zurückgehalten werden. Nach einem geeigneten chirurgischen Debridement des Wundbetts werden mehrere periläsionale und intramuskuläre Injektionen von PBMNC-Zellsuspensionen (0,2–0,3 ml in Boli) entlang der relevanten Achse unterhalb des Knies in Intervallen von 1–2 cm und bis zu einer mittleren Tiefe von 1,5– 2 cm, unter Verwendung einer 21G-Nadel. Dieses Verfahren wird bei jedem Patienten dreimal in Abständen von 30–45 Tagen wiederholt.

Die fußerhaltende Operation, die Entfernung des gesamten nicht lebensfähigen Gewebes und die Rekonstruktion des Fußes, um eine funktionelle Deambulation zu ermöglichen, wird gleichzeitig mit der letzten Implantation bei Patienten mit erhöhtem TcpO2-Wert über 30 mmHg durchgeführt. Zwischen den Implantaten bewerteten Diabetologen zusammen mit Pflegekräften die Veränderung von Schmerz, Infektionszeichen, Wundgröße, Abgrenzung der Nekrose, Bildung von Granulationsgewebe, periläsionalem Gewebetrophismus und TcpO2-Wert, um den Behandlungsstandard zu optimieren. Nach der ersten Behandlung wird eine zweijährige Nachsorge registriert, mit Auswertung nach 1-3-6-12-18-24 Monaten.

Eine Ausgangsbewertung wird durchgeführt, um etwaige Unterschiede zwischen Fällen und Kontrollen vor der Behandlung abzuschätzen. Die statistische Auswertung umfasst nichtparametrische Tests (Mann-Whitney-U-Test für unabhängige Stichproben für kontinuierliche Variablen und Cochrane-Chi-Quadrat-Test für diskrete Variablen), die Bewertung des relativen Risikos (RR), der absoluten Risikominderung (ARR), der relativen Risikominderung (RRR). ) und Number Needed to Treat (NNT), multivariate Überlebensanalyse (Überlebensanalysemodell nach Kaplan-Meier).