FISH i diagnosticering af galdestriktur

Håndteringen af ​​galdeforsnævringer afhænger af deres korrekte præoperative evaluering, som fortsat er udfordrende. Galdeforsnævringer har forskellige ætiologier (traumatiske, inflammatoriske, tumorale, iskæmiske osv.), som nødvendigvis er nødvendige for at være kendt for den korrekte terapeutiske tilgang. På trods af de nye væld af nye diagnostiske muligheder, er der stadig et stort antal galdestenoser, der er fejldiagnosticeret med en dyb negativ indvirkning på patienternes resultat. Det dilemma, der eksisterer, er, hvordan man afbalancerer risikoen for at gå glip af chancen for helbredende kirurgi for en vis malignitet og forhindrer nogle patienter i unødvendig operation for godartede ætiologier og for ikke at spilde tid. Forskellige konventionelle prøveudtagningsmetoder (som Brush-cytology, pincetbiopsier under ERCP, endoskopisk guidet finnålsaspiration-EUS-FNA) har relativt lav følsomhed. I sådanne tilfælde viser den perorale kolangioskopi en diagnostisk nøjagtighed på 90 %. Denne metode forbliver ekspertafhængig, dyr og kan resultere i komplikationer af kolangitis i 3-5 % af tilfældene. Teknikker eller andre metoder, der er mindre komplicerede og forbedrer den præoperative diagnose af galdeforsnævringer er nødvendige. Fluorescerende in Situ Hybridization (FISH) viste sig at forbedre det diagnostiske udbytte af rutinemæssig cytologi.

Denne undersøgelse vil bevise gennemførligheden og den kliniske plads for FISH i diagnosticering af galdeforsnævringer og evaluere virkningen af ​​FISH på behandlingen af ​​patienter med galdeforsnævringer.

FISH (Fluorecent In Situ Hybridization) er en molekylær cytogenetisk metode, som muliggør påvisning af fluorescensmærkede DNA/RNA eller oligonukleotidprober hybridiseret til metafase/interfase. Det bruger prober til at binde til specifikke DNA/RNA-sekvenser. Dette muliggør påvisning af aneuploidi for kromosom 3, 7, 17 og tab af 9p21 hos patienter med mistanke om maligne galdeforsnævringer.

Forskellige metoder blev brugt til at tage prøver fra stedet for stenosen. Børste-cytologi og endocanal pincet biopsier under ERCP og FNA (finnålsaspiration) under EUS (endosonografi). Disse prøvetagningsteknikker har relativt lav specificitet og sensitivitet. Grunden til, at vi vil kombinere FISH med prøvetagningsmetoderne for at maksimere vores chance for tidligt at bestemme ætiologien af ​​stenose og undgå at spilde tid og unødvendig kolangioskopi. I denne undersøgelse er positiviteten af ​​FISH for kromosomerne 3,7,17 ​​defineret af tilstedeværelsen af ​​polysomi af disse kromosomer og positiviteten af ​​FISH for kromosomregionen defineret af en tilstedeværelse af heterozygot deletion eller homozygot deletion for 9p21. Polysomi er defineret ved en forstærkning på 2 eller flere kromosomer i 4 celler. For den kromosomale region skal deletionen eller tabet af 9p21 observeres i 12 celler.

Metoder:

• Vævsprøver opnået via enten børstecytologi, pincetbiopsi eller finnålsaspiration under ERCP eller endosonografi (EUS) blev undersøgt ved rutinemæssige cytologi- eller histologimetoder (RC).
• Derudover blev FISH udført med fluorescensbaserede polynukleotidprober rettet mod kromosomerne 3, 7, 17 og locus 9p21 (ZytoVysion®).

Succes (positivitet) er defineret ved tilstedeværelsen af ​​polysomi for kromosomerne 3, 7, 17 og/eller tilstedeværelsen af ​​deletion eller tab af den kromosomale region 9p21 hos patienter med mistanke om maligne galdeforsnævringer.

Guldstandarden for endelig diagnose bør være histologien fra operationsresektion. Hos patienter uden kirurgi vil en opfølgning på 12 måneder blive betragtet som tilstrækkelig til at udelukke eller bekræfte malign ætiologi af striturerne.