FISH 在胆道狭窄诊断中的应用

胆道狭窄的管理取决于正确的术前评估，这仍然具有挑战性。 胆管狭窄有多种病因（创伤性、炎症性、肿瘤性、缺血性等），必须了解这些病因才能采取正确的治疗方法。 尽管出现了大量新的诊断机会，但仍有大量胆道狭窄被误诊，对患者的预后产生深远的负面影响。 存在的困境是如何平衡错过某些恶性肿瘤治愈性手术机会的风险和防止某些患者因良性病因而进行不必要的手术而不是浪费时间的风险。 不同的常规取样方法（如刷细胞学、ERCP 期间的镊子活检、内窥镜引导的细针穿刺-EUS-FNA）的灵敏度相对较低。 在这种情况下，经口胆管镜检查证明诊断准确率为 90%。 这种方法仍然依赖于专家，成本高，并且可能在 3-5% 的病例中导致胆管炎并发症。 需要更简单的技术或其他方法来改进胆道狭窄的术前诊断。 荧光原位杂交 (FISH) 被证明可以提高常规细胞学的诊断率。

本研究将证明 FISH 在胆道狭窄诊断中的可行性和临床地位，并评估 FISH 对胆道狭窄患者管理的影响。

FISH（荧光原位杂交）是一种分子细胞遗传学方法，可以检测与中期/间期杂交的荧光标记的 DNA/RNA 或寡核苷酸探针。 它使用探针结合特定的 DNA/RNA 序列。 这使得能够检测疑似恶性胆管狭窄患者的 3、7、17 号染色体非整倍体和 9p21 缺失。

使用不同的方法从狭窄部位采集样本。 EUS（超声内镜）期间的 ERCP 和 FNA（细针穿刺）期间的刷细胞学和管内钳活检。 这些采样技术具有相对较低的特异性和敏感性。 我们之所以将 FISH 与取样方法相结合，以最大限度地提高我们早期确定狭窄病因的机会，避免浪费时间和不必要的胆管镜检查。 在这项研究中，FISH 对染色体 3、7、17 的阳性定义为这些染色体存在多体性，而 FISH 对染色体区域的阳性定义为存在 9p21 的杂合缺失或纯合缺失。 多体性定义为在 4 个细胞中增加 2 条或更多条染色体。 对于染色体区域，必须在 12 个细胞中观察到 9p21 的缺失或缺失。

方法：

• 通过常规细胞学或组织学 (RC) 方法检查在 ERCP 或超声内镜 (EUS) 期间通过刷细胞学、镊子活检或细针穿刺获得的组织标本。
• 此外，使用基于荧光的多核苷酸探针靶向染色体 3、7、17 和基因座 9p21 进行了 FISH (ZytoVysion®)。

成功（阳性）定义为疑似恶性胆管狭窄的患者存在 3、7、17 号染色体多体性和/或染色体 9p21 区域缺失或缺失。

最终诊断的金标准应该是手术切除的组织学。 对于未接受手术的患者，12 个月的随访将被认为足以排除或确认狭窄的恶性病因。