FISH w diagnostyce zwężenia dróg żółciowych

Postępowanie w przypadku zwężeń dróg żółciowych zależy od ich prawidłowej oceny przedoperacyjnej, która pozostaje wyzwaniem. Zwężenia dróg żółciowych mają różną etiologię (urazową, zapalną, nowotworową, niedokrwienną itp.), których poznanie jest niezbędne do prawidłowego postępowania terapeutycznego. Pomimo pojawiających się mnóstwa nowych możliwości diagnostycznych, nadal istnieje duża liczba błędnie zdiagnozowanych zwężeń dróg żółciowych, co ma głęboki negatywny wpływ na wyniki leczenia pacjentów. Dylemat, który istnieje, polega na tym, jak zrównoważyć ryzyko utraty szansy na operację wyleczenia niektórych nowotworów złośliwych i zapobieganie niepotrzebnym operacjom niektórych pacjentów z łagodnej etiologii i nie marnować czasu. Różne konwencjonalne metody pobierania próbek (takie jak cytologia pędzlowa, biopsje kleszczowe podczas ECPW, endoskopowa aspiracja cienkoigłowa – EUS-FNA) mają stosunkowo niską czułość. W takich przypadkach cholangioskopia przezustna wykazuje trafność diagnostyczną na poziomie 90%. Ta metoda pozostaje zależna od ekspertów, kosztowna i może powodować powikłania zapalenia dróg żółciowych w 3-5% przypadków. Potrzebne są techniki lub inne metody mniej skomplikowane i poprawiające przedoperacyjną diagnostykę zwężeń dróg żółciowych. Wykazano, że fluorescencyjna hybrydyzacja in situ (FISH) poprawia wydajność diagnostyczną rutynowej cytologii.

Niniejsze badanie wykaże wykonalność i miejsce kliniczne FISH w diagnostyce zwężeń dróg żółciowych oraz oceni wpływ FISH na postępowanie z pacjentami ze zwężeniami dróg żółciowych.

FISH (Fluorcent In Situ Hybridization) to molekularna metoda cytogenetyczna, która umożliwia wykrycie znakowanych fluorescencyjnie sond DNA/RNA lub oligonukleotydów zhybrydyzowanych do metafazy/interfazy. Wykorzystuje sondy do wiązania się z określonymi sekwencjami DNA/RNA. Umożliwia to wykrycie aneuploidii chromosomów 3, 7, 17 i utraty 9p21 u pacjentów z podejrzeniem złośliwego zwężenia dróg żółciowych.

Zastosowano różne metody pobierania próbek z miejsca zwężenia. Cytologia pędzlowa i biopsje kleszczowe dokanałowe podczas ECPW i FNA (aspiracja cienkoigłowa) podczas EUS (endosonografia). Te techniki pobierania próbek mają stosunkowo niską specyficzność i czułość. Powód, dla którego połączymy FISH z metodami pobierania próbek, aby zmaksymalizować nasze szanse na wczesne określenie etiologii zwężenia i uniknąć marnowania czasu i niepotrzebnej cholangioskopii. W tym badaniu pozytywność FISH dla chromosomów 3,7,17 ​​jest definiowana przez obecność polisomii tych chromosomów, a pozytywność FISH dla regionu chromosomalnego jest definiowana przez obecność delecji heterozygotycznej lub delecji homozygotycznej dla 9p21. Polisomię definiuje się jako przyrost 2 lub więcej chromosomów w 4 komórkach. W przypadku regionu chromosomalnego delecję lub utratę 9p21 należy zaobserwować w 12 komórkach.

Metody:

• Próbki tkanek uzyskane za pomocą cytologii szczoteczkowej, biopsji kleszczowej lub aspiracji cienkoigłowej podczas ERCP lub endosonografii (EUS) badano rutynowymi metodami cytologicznymi lub histologicznymi (RC).
• Ponadto przeprowadzono FISH przy użyciu fluorescencyjnych sond polinukleotydowych ukierunkowanych na chromosomy 3, 7, 17 i locus 9p21 (ZytoVysion®).

Powodzenie (pozytywność) jest definiowane przez obecność polisomii dla chromosomów 3, 7, 17 i/lub obecność delecji lub utraty regionu chromosomalnego 9p21 u pacjentów z podejrzeniem złośliwego zwężenia dróg żółciowych.

Złotym standardem ostatecznego rozpoznania powinien być histologia z resekcji chirurgicznej. U pacjentów bez operacji 12-miesięczna obserwacja będzie uważana za wystarczającą do wykluczenia lub potwierdzenia złośliwej etiologii zwężeń.