FISH dans le diagnostic de la sténose biliaire

La prise en charge des sténoses biliaires dépend de leur bonne évaluation préopératoire qui reste difficile. Les sténoses biliaires ont des étiologies diverses (traumatiques, inflammatoires, tumorales, ischémiques…) qu'il est nécessaire de connaître pour la bonne approche thérapeutique. Malgré les multitudes émergentes de nouvelles opportunités de diagnostic, il existe encore un grand nombre de sténoses biliaires mal diagnostiquées avec un impact négatif profond sur les résultats des patients. Le dilemme qui existe est de savoir comment équilibrer le risque de rater la chance d'une chirurgie curative pour certaines tumeurs malignes et d'empêcher certains patients de subir une chirurgie inutile pour des étiologies bénignes et de ne pas perdre de temps. Les différentes méthodes d'échantillonnage conventionnelles (telles que Brush-cytology, biopsies au forceps pendant la CPRE, aspiration à l'aiguille fine guidée par endoscopie-EUS-FNA) ont une sensibilité relativement faible. Dans de tels cas, la cholangioscopie perorale prouve une précision diagnostique de 90 %. Cette méthode reste experte, coûteuse et peut entraîner des complications d'angiocholite dans 3 à 5 % des cas. Des techniques ou autres méthodes moins compliquées et améliorant le diagnostic préopératoire des sténoses biliaires sont nécessaires. Il a été démontré que l'hybridation fluorescente in situ (FISH) améliore le rendement diagnostique de la cytologie de routine.

Cette étude prouvera la faisabilité et la place clinique de la FISH dans le diagnostic des sténoses biliaires et évaluera l'impact de la FISH sur la prise en charge des patients atteints de sténoses biliaires.

La FISH (Fluorecent In Situ Hybridization) est une méthode de cytogénétique moléculaire qui permet la détection de sondes ADN/ARN ou oligonucléotidiques marquées par fluorescence hybridées en métaphase/interphase. Il utilise des sondes pour se lier à des séquences d'ADN/ARN spécifiques. Cela permet la détection de l'aneuploïdie pour les chromosomes 3, 7, 17 et la perte du 9p21 chez les patients suspects de sténoses biliaires malignes.

Différentes méthodes ont été utilisées pour prélever des échantillons au site de la sténose. Brosse-cytologie et biopsies de forceps endocanal pendant CPRE et FNA (aspiration à l'aiguille fine) pendant EUS (endosonographie). Ces techniques d'échantillonnage ont une spécificité et une sensibilité relativement faibles. Raison pour laquelle nous combinerons FISH avec les méthodes d'échantillonnage pour maximiser nos chances de déterminer précocement l'étiologie de la sténose et éviter une perte de temps et une cholangioscopie inutile. Dans cette étude, la positivité du FISH pour les chromosomes 3,7,17 ​​est définie par une présence de polysomie de ces chromosomes et la positivité du FISH pour la région chromosomique définie par la présence d'une délection hétérozygote ou homozygote pour 9p21. La polysomie est définie par un gain de 2 chromosomes ou plus dans 4 cellules. Pour la région chromosomique, la délection ou la perte de 9p21 doit être observée dans 12 cellules.

Méthodes :

• Les échantillons de tissus obtenus par cytologie au pinceau, biopsie au forceps ou aspiration à l'aiguille fine pendant la CPRE ou l'endosonographie (EUS) ont été examinés par des méthodes de cytologie ou d'histologie (RC) de routine.
• De plus, une FISH utilisant des sondes polynucléotidiques fluorescentes ciblant les chromosomes 3, 7, 17 et le locus 9p21 a été réalisée (ZytoVysion®).

Le succès (positivité) est défini par la présence d'une polysomie pour les chromosomes 3, 7, 17 et/ou la présence d'une déviation ou d'une perte de la région chromosomique 9p21 chez les patients suspects de sténoses biliaires malignes.

L'étalon-or pour le diagnostic final devrait être l'histologie de la résection chirurgicale. Chez les patients non opérés, un suivi de 12 mois sera considéré comme suffisant pour exclure ou confirmer l'étiologie maligne des stries.