FISH sappirakon diagnoosissa

Sappien ahtaumien hoito riippuu niiden oikeasta ennen leikkausta tehdystä arvioinnista, mikä on edelleen haastavaa. Sappien ahtaumat ovat erilaisia ​​(traumaattisia, tulehduksellisia, kasvaimia, iskeemisiä jne.), joita tarvitaan välttämättä oikean terapeuttisen lähestymistavan tuntemiseksi. Huolimatta esiin tulevista lukuisista uusista diagnostisista mahdollisuuksista, suuri määrä sappistenoosia diagnosoidaan edelleen väärin, mikä vaikuttaa syvästi negatiivisesti potilaiden lopputulokseen. Ongelmana on se, kuinka tasapainottaa riskiä menettää parantavan leikkauksen mahdollisuus joidenkin pahanlaatuisten kasvainten vuoksi ja estää joitain potilaita tekemästä tarpeettomia leikkauksia hyvänlaatuisten syiden vuoksi, ja olla hukkaamatta aikaa. Erilaiset tavanomaiset näytteenottomenetelmät (kuten sivellinsytologia, pihdibiopsiat ERCP:n aikana, endoskooppinen ohjattu hienoneulan aspiraatio-EUS-FNA) ovat suhteellisen alhaisia. Tällaisissa tapauksissa peroraalinen kolangioskooppi todistaa 90 %:n diagnostisen tarkkuuden. Tämä menetelmä on asiantuntijariippuvainen, kallis ja voi johtaa kolangiitin komplikaatioihin 3-5 %:ssa tapauksista. Tarvitaan tekniikoita tai muita menetelmiä, jotka ovat vähemmän monimutkaisia ​​ja parantavat sappireumaten leikkausta edeltävää diagnoosia. Fluoresoivan in situ -hybridisaation (FISH) osoitettiin parantavan rutiininomaisen sytologian diagnostista saantoa.

Tämä tutkimus osoittaa FISH:n toteutettavuuden ja kliinisen paikan sapen ahtaumadiagnostiikassa ja arvioi FISH:n vaikutusta sapen ahtaumapotilaiden hoitoon.

FISH (Fluorecent In Situ Hybridization) on molekyylisytogeneettinen menetelmä, jonka avulla voidaan havaita fluoresoivasti leimattuja DNA/RNA- tai metafaasiin/interfaasiin hybridisoituneita oligonukleotidikoettimia. Se käyttää koettimia sitoutuakseen tiettyihin DNA/RNA-sekvensseihin. Tämä mahdollistaa kromosomien 3, 7, 17 aneuploidian ja 9p21:n katoamisen havaitsemisen potilailla, joilla epäillään pahanlaatuisia sappirakkeumaa.

Näytteitä otettiin ahtaumapaikalta eri menetelmillä. Harja-sytologia ja endokanaalipihdit biopsiat ERCP:n aikana ja FNA (hieno neulaaspiraatio) EUS:n (endosonografian) aikana. Näillä näytteenottotekniikoilla on suhteellisen alhainen spesifisyys ja herkkyys. Syy siihen, miksi yhdistämme FISHin näytteenottomenetelmiin maksimoidaksemme mahdollisuutemme määrittää ahtauman etiologia varhaisessa vaiheessa ja välttääksemme ajanhukkaa ja tarpeetonta kolangioskooppia. Tässä tutkimuksessa FISH:n positiivisuus kromosomeille 3, 7, 17 määritellään näiden kromosomien polysomian esiintymisenä ja FISH:n positiivisuus kromosomaaliselle alueelle, joka määritellään heterotsygoottisen tai homotsygoottisen deleetion läsnäololla 9p21:lle. Polysomia määritellään kahden tai useamman kromosomin lisääntymisenä 4 solussa. Kromosomialueen osalta 9p21:n poistuminen tai häviäminen on havaittava 12 solussa.

Menetelmät:

• Kudosnäytteet, jotka oli saatu joko harjasytologialla, pihdibiopsialla tai hienon neulan aspiraatiolla ERCP:n tai endosonografian (EUS) aikana, tutkittiin rutiininomaisin sytologian tai histologian (RC) menetelmin.
• Lisäksi suoritettiin FISH käyttämällä fluoresoivia polynukleotidikoettimia, jotka kohdistuivat kromosomeihin 3, 7, 17 ja lokukseen 9p21 (ZytoVysion®).

Menestys (positiivisuus) määritellään kromosomien 3, 7, 17 polysomian esiintymisenä ja/tai kromosomaalisen alueen 9p21 deleetiolla tai katoamisella potilailla, joilla epäillään pahanlaatuisia sapen ahtaumaa.

Kultastandardin lopullisen diagnoosin tulisi olla leikkauksen resektiosta saatu histologia. Potilailla, joilla ei ole leikkausta, 12 kuukauden seuranta katsotaan riittäväksi sulkemaan pois tai vahvistamaan stritureiden pahanlaatuinen etiologia.