FISH i diagnose av gallestreng

Behandlingen av gallestrenginger avhenger av deres korrekte preoperative evaluering, som fortsatt er utfordrende. Biliære strikturer har ulike etiologier (traumatisk, inflammatorisk, tumoral, iskemisk etc), som nødvendigvis er nødvendig for å være kjent for den korrekte terapeutiske tilnærmingen. Til tross for de nye mengder av nye diagnostiske muligheter, er det fortsatt et stort antall galdestenoser som er feildiagnostisert med en dyp negativ innvirkning på pasientenes utfall. Dilemmaet som eksisterer er hvordan man skal balansere risikoen for å gå glipp av sjansen for kurativ kirurgi for en eller annen malignitet og hindre noen pasienter fra unødvendig kirurgi for godartede årsaker og ikke kaste bort tid. Ulike konvensjonelle prøvetakingsmetoder (som Brush-cytology, pincettbiopsier under ERCP, endoskopisk guidet finnålsaspirasjon-EUS-FNA) har relativt lav sensitivitet. I slike tilfeller viser peroral kolangioskopi en diagnostisk nøyaktighet på 90 %. Denne metoden forblir ekspertavhengig, kostbar og kan føre til komplikasjoner av kolangitt i 3-5 % av tilfellene. Teknikker eller andre metoder som er mindre kompliserte og forbedrer den preoperative diagnosen av gallestrenginger er nødvendig. Fluorescerende in Situ Hybridization (FISH) ble vist å forbedre det diagnostiske utbyttet av rutinemessig cytologi.

Denne studien vil bevise gjennomførbarheten og den kliniske plassen til FISH i diagnostikk av gallestrenginger og evaluere effekten av FISH på behandling av pasienter med gallestrenginger.

FISH (Fluorecent In Situ Hybridization) er en molekylær cytogenetisk metode som muliggjør påvisning av fluorescensmerket DNA/RNA eller oligonukleotidprober hybridisert til metafase/interfase. Den bruker prober for å binde seg til spesifikke DNA/RNA-sekvenser. Dette muliggjør påvisning av aneuploidi for kromosom 3, 7, 17 og tap av 9p21 hos pasienter med mistenkt ondartede galleforsnævringer.

Ulike metoder ble brukt for å ta prøver fra stedet for stenosen. Børste-cytologi og endokanal tangbiopsi under ERCP og FNA (finnålsaspirasjon) under EUS (endosonografi). Disse prøvetakingsteknikkene har relativt lav spesifisitet og sensitivitet. Grunnen til at vi vil kombinere FISH med prøvetakingsmetodene for å maksimere sjansen vår til tidlig å bestemme etiologien til stenose og unngå å kaste bort tid og unødvendig kolangioskopi. I denne studien er positiviteten til FISH for kromosomer 3,7,17 ​​definert av tilstedeværelsen av polysomi av disse kromosomene og positiviteten til FISH for kromosomregionen definert av tilstedeværelsen av heterozygot delesjon eller homozygot delesjon for 9p21. Polysomi er definert av en økning på 2 eller flere kromosomer i 4 celler. For den kromosomale regionen må deeksjon eller tap av 9p21 observeres i 12 celler.

Metoder:

• Vevsprøver oppnådd via enten børstecytologi, tangbiopsi eller finnålsaspirasjon under ERCP eller endosonografi (EUS) ble undersøkt ved rutinemessige cytologi- eller histologimetoder (RC).
• I tillegg ble FISH ved bruk av fluorescerende-baserte polynukleotidprober rettet mot kromosomene 3, 7, 17 og locus 9p21 utført (ZytoVysion®).

Suksess (positivitet) er definert av tilstedeværelsen av polysomi for kromosomene 3, 7, 17 og/eller tilstedeværelsen av deeksjon eller tap av kromosomregionen 9p21 hos pasienter med mistenkt ondartede galleforsnævringer.

Gullstandard for endelig diagnose bør være histologien fra operasjonsreseksjon. Hos pasienter uten kirurgi vil en oppfølging på 12 måneder anses som tilstrekkelig for å utelukke eller bekrefte ondartet etiologi til striturene.