FISH en el Diagnóstico de la Estenosis Biliar

El manejo de las estenosis biliares depende de su correcta evaluación preoperatoria, que sigue siendo un desafío. Las estenosis biliares tienen diversas etiologías (traumáticas, inflamatorias, tumorales, isquémicas, etc.), las cuales necesariamente es necesario conocer para el correcto abordaje terapéutico. A pesar de la multitud emergente de nuevas oportunidades de diagnóstico, todavía hay una gran cantidad de estenosis biliares mal diagnosticadas con un profundo impacto negativo en el resultado de los pacientes. El dilema que existe es cómo equilibrar el riesgo de perder la oportunidad de una cirugía curativa para alguna neoplasia maligna y evitar que algunos pacientes sean operados innecesariamente por etiologías benignas y no perder el tiempo. Los diferentes métodos de muestreo convencionales (como la citología con cepillo, las biopsias con fórceps durante la CPRE, la aspiración con aguja fina guiada por endoscopia-EUS-FNA) tienen una sensibilidad relativamente baja. En tales casos, la colangioscopia peroral demuestra una precisión diagnóstica del 90 %. Este método sigue dependiendo del experto, es costoso y puede provocar complicaciones de colangitis en el 3-5 % de los casos. Se necesitan técnicas u otros métodos menos complicados y que mejoren el diagnóstico preoperatorio de las estenosis biliares. Se demostró que la hibridación fluorescente in situ (FISH) mejora el rendimiento diagnóstico de la citología de rutina.

Este estudio demostrará la viabilidad y el lugar clínico de FISH en el diagnóstico de estenosis biliares y evaluará el impacto de FISH en el manejo de pacientes con estenosis biliares.

FISH (hibridación fluorescente in situ) es un método citogenético molecular que permite la detección de sondas de ADN/ARN marcadas con fluorescencia o de oligonucleótidos hibridadas con metafase/interfase. Utiliza sondas para unirse a secuencias específicas de ADN/ARN. Esto permite la detección de aneuploidía para los cromosomas 3, 7, 17 y pérdida del 9p21 en pacientes con sospecha de estenosis biliar maligna.

Se utilizaron diferentes métodos para tomar muestras del sitio de la estenosis. Citología con cepillo y biopsias con fórceps endocanal durante la CPRE y PAAF (aspiración con aguja fina) durante la USE (endosonografía). Estas técnicas de muestreo tienen una especificidad y una sensibilidad relativamente bajas. Razón por la cual combinaremos FISH con los métodos de muestreo para maximizar nuestra posibilidad de determinar tempranamente la etiología de la estenosis y evitar pérdidas de tiempo y colangioscopias innecesarias. En este estudio, la positividad de FISH para los cromosomas 3,7,17 ​​se define por la presencia de polisomía de estos cromosomas y la positividad de FISH para la región cromosómica definida por la presencia de delección heterocigota o deleción homocigota para 9p21. La polisomía se define por una ganancia de 2 o más cromosomas en 4 células. Para la región cromosómica, la deleción o pérdida de 9p21 debe observarse en 12 células.

Métodos:

• Las muestras de tejido obtenidas mediante citología con cepillo, biopsia con fórceps o aspiración con aguja fina durante la CPRE o la endosonografía (EUS) se examinaron mediante métodos de citología o histología (RC) de rutina.
• Además, se realizó FISH con sondas de polinucleótidos fluorescentes dirigidas a los cromosomas 3, 7, 17 y el locus 9p21 (ZytoVysion®).

El éxito (positividad) se define por la presencia de polisomía para los cromosomas 3, 7, 17 y/o la presencia de deleción o pérdida de la región cromosómica 9p21 en pacientes con sospecha de estenosis biliar maligna.

El estándar de oro para el diagnóstico final debe ser la histología de la resección quirúrgica. En pacientes sin cirugía, se considerará adecuado un seguimiento de 12 meses para excluir o confirmar la etiología maligna de las estenosis.