RAPA-501-Allo Terapi af COVID-19-ARDS

Den første-i-menneskelige fase 1-studiekomponent vil evaluere to dosisniveauer af RAPA-501-ALLO fra hyldeceller hos patienter med COVID-19-relateret ARDS, med nøgleendepunkter for sikkerhed, biologiske og potentielle sygdomsmodificerende effekter. Den randomiserede, dobbeltblindede, placebokontrollerede fase 2b-studiekomponent vil evaluere infusion af RAPA-501 ALLO fra hyldeceller eller en kontrolinfusion, hvor det primære endepunkt vurderer, om RAPA-501-celler reducerer 30-dages dødelighed.

COVID-19-pandemien er en katastrofe, der udspiller sig med progressiv sygelighed og dødelighed. Fra den 6. april 2021 anslås 132,1 millioner mennesker at have fået virussen, og 2.866.000 dødsfald har resulteret globalt. USA har de højeste totaler med anslået 30,8 millioner diagnosticerede mennesker og 556.000 dødsfald. USA har de højeste totaler med anslået 22,4 millioner mennesker diagnosticeret og 375.000 dødsfald. I trin 1 og 2 af COVID-19 er virusudbredelse i patienten fremherskende. Som sådan fokuserer terapeutiske indgreb på immunmolekyler (rekonvalescent serum, monoklonale antistoffer) og antivirale lægemidler (remdesivir). I markant kontrast er den mest alvorlige og dødelige form for COVID-19, trin 3, ikke drevet af viral spredning, men af ​​en ude af kontrol immunrespons (hyperinflammation) forårsaget af stigninger i immunmolekyler kendt som cytokiner og kemokiner. Som sådan fokuserer terapeutiske interventioner for sygdomsstadie 3 på antiinflammatoriske lægemidler såsom anti-cytokinterapi (anti-IL-6-lægemidler) eller kortikosteroidbehandling. Desværre adresserer sådanne indgreb ikke den fulde patogenese af fase 3 COVID-19, som inkluderer hyperinflammation på grund af "cytokinstorm" og "kemokinstorm", vævsskade, hyperkoagulation og multiorgansvigt (inklusive lunge, hjerte, nyre og hjerne). Lungekomponenten af ​​sygdomsstadie 3 omfatter akut respiratorisk distress syndrom (ARDS), som er en sidste fælles vej for patientdød på grund af et utal af tilstande, herunder lungebetændelse, sepsis og traumer. Der er et dybt behov for nye cellulære behandlinger, der kan levere både en bredbaseret immunmodulationseffekt og en vævsregenererende effekt, såsom RAPA-501-ALLO off-the-shelf allogene hybrid TREG/Th2-celler.

Mekanismen for fatal lungebetændelse i eksperimentel murin coronavirusinfektion medieres af medfødt inflammasomaktivering, en resulterende robust infiltration af inflammatoriske monocytter og makrofager og en efterfølgende stigning i multiple pro-inflammatoriske cytokiner og kemokiner. Vigtigt er det, at CD4+ og CD8+ adaptive T-cellerespons på eksperimentel coronavirusinfektion kan være enten helbredende eller sygdomsforplantende. Viral-induceret lungebetændelse er også blevet evalueret i ikke-menneskelige primatmodeller, som har bekræftet, at dysreguleret immunaktivering under viral lungebetændelse involverer ubalance i T-celler undergruppe, en nedstrøms monocyt-afledt inflammatorisk kaskade og resulterende epitelcelleskade. Hos mennesker korrelerer sværhedsgraden af ​​virus-induceret nedre luftvejsinfektion med øget antal CD8+ T-celler i effektorhukommelsen i luftvejene. Som for nyligt gennemgået repræsenterer human coronavirus-infektion en igangværende kamp mellem virus og vært, hvor arten af ​​responsen dikterer helbredelse af sygdomme eller alternativt forværret lungesygdom. Der findes beviser for, at det adaptive immunsystem bidrager til lungebetændelse under SARS-associeret Coronavirus (SARS-CoV) sygdom: det vil sige, bronkoalveolær væske fra sådanne forsøgspersoner havde øget T-celleantal og øget Th1-associerede molekyler IL-12, IFN-gamma, og IP-10. Denne nedstrøms adaptive T-celle-medierede inflammatoriske respons drives delvist af SARS-Co-V-proteinet viroporin 3a. Specifikt aktiverer viroporinmolekyler NLRP3-inflammasomet, der forbinder medfødte til adaptive inflammatoriske reaktioner. Desuden udtrykker både SARS-CoV og SARS-CoV-2 et åbent læseramme ORF3a-molekyle, som også aktiverer NLRP3-inflammasomet.

Naturen af ​​immunitet under opløsning af symptomatisk COVID-19-infektion er for nylig blevet rapporteret, nemlig: fremkomst af antistof-udskillende celler og CD4+ T-follikulære hjælpeceller; stigning i perforin- og granzym-udtrykkende CD8+ T-celler; og relativ mangel på en stigning i pro-inflammatoriske cytokiner og kemokiner. I markant kontrast havde patienter med svær COVID-19-sygdom stærkt forhøjede plasmaniveauer af cytokiner (inklusive IL-2 og TNF-alfa) og kemokiner (inklusive IP-10 og MIP-1-alpha) (Huang et al., Lancet, 2020). Samlet indikerer disse resultater, at pro-inflammatoriske cytokin- og kemokin-reaktioner, der forekommer i alvorlig COVID-19, er skadelige, og at effektive anti-inflammatoriske tilgange i sidste ende kan vise sig at være terapeutiske. Men som tidligere beskrevet er den mere fremskredne trin 3 COVID-19 sygdom karakteriseret ved en ARDS-komponent, og cytokinstorm, som sådan bør nye metoder til behandling af COVID-19 viral lungebetændelse optimalt inkorporere både et antiinflammatorisk element og en vævsbeskyttelse/vævsreparationselement.

Trin 3 COVID-19 har en estimeret 30-dages dødelighed på over 50 % på trods af ICU-udnyttelse, mekanisk ventilation og støttende behandlingsterapier til håndtering af ARDS og multiorgansvigt. Snævert virkende målrettede antiinflammatoriske tilgange såsom anti-IL-6-terapi har ikke været særlig effektive i fase 3 COVID-19, og den brede anti-inflammatoriske farmaceutiske tilgang til kortikosteroidbehandling har kun beskedent tempereret fase 3 sygdom i nogle undersøgelser. Celleterapi bliver også evalueret i fase 3 COVID-19, især mesenkymale stromale celler (MSC) og nu, med den nuværende RAPA-501-ALLO-protokol, regulatoriske T (TREG) celler. TREG-terapi har en virkningsmekanisme, der omfatter en mangefacetteret antiinflammatorisk effekt, som sætter TREG-terapi i spidsen for fremtidig helbredende behandling af en lang række autoimmune og neurodegenerative sygdomme, plus transplantationskomplikationer, såsom graft-versus-host sygdom (GVHD) og graftafstødning. Derudover kan TREG-terapi give en vævsregenererende effekt, som placerer TREG-celleterapi i spidsen for ny regenerativ medicin indsats for at reparere et utal af vævsbaserede sygdomme, såsom sygdomme i hud, muskler, lunger, lever, tarm, hjerte (myokardieinfarkt) og hjerne (apopleksi). RAPA-501-ALLO off-the-shelf celleterapi tilbyder denne potentielle dobbelte trusselvirkningsmekanisme, der inkorporerer både antiinflammatoriske og vævsreparationseffekter til effektiv behandling af COVID-19 og flere dødelige tilstande.

RAPA-501-ALLO-celler genereres fra raske frivillige, kryokonserveres, bankes og er derefter tilgængelige for hyldebehandling når som helst. Under fremstillingen "omprogrammeres" T-celler ex vivo ved hjælp af en ny, patenteret 7-dages to-trins proces, der involverer T-celle de-differentiering og efterfølgende re-differentiering mod de to centrale anti-inflammatoriske programmer, TREG og Th2 pathways, dermed skabe et "hybrid" produkt. Hybridfænotypen hæmmer inflammatoriske veje, der er operationelle i COVID-19, herunder modulering af multiple cytokiner og kemokiner, som tiltrækker inflammatoriske celler ind i væv til initiering af multi-organskader. Den hybride TREG- og Th2-fænotype af RAPA-501-ALLO-celler krydsregulerer Th1- og Th17-populationer, der initierer hyperinflammation af COVID-19. RAPA-501-immunmodulering sker på en T-cellereceptoruafhængig måde, hvilket muliggør hylde-celleterapi. Endelig, i eksperimentelle modeller af viral lungebetændelse og ARDS, medierer TREG-celler en beskyttende effekt på det lungealveolære væv. På grund af denne unikke virkningsmekanisme, der involverer både antiinflammatoriske og vævsbeskyttende effekter, er det allogene RAPA-501 T-celleprodukt særligt velegnet til evaluering i forbindelse med fase 3 COVID-19-relateret ARDS.

Generelt er klassisk autoimmun sygdom, neurodegenerativ sygdom og viral-induceret inflammatorisk sygdom drevet af overvægt af Th1/Th17-type responser med en relativ insufficiens af de kontraregulerende immunundertrykkende Th2 og TREG undergrupper. TREG-celler, som til dels er defineret ved deres ekspression af FOXP3-transkriptionsfaktor, er blevet grundigt undersøgt i eksperimentelle modeller for deres evne til at modulere autoimmun sygdom, neurodegenerativ sygdom og transplantationskomplikationer, herunder graft-versus-host disease (GVHD) og graft afvisning. Det er vigtigt, at T-celleproduktion af IL-2 eller eksogen IL-2-administration driver lungebetændelse under eksperimentel virusinfektion; derfor, givet TREG-cellernes kendte rolle som forbruger af IL-2, er der et stærkt mekanistisk rationale for et gavnligt bidrag fra TREG-celler under virusdrevet lungebetændelse. Ydermere, i en eksperimentel murine modeller af virus-induceret lungebetændelse og lungeskade, accelererede indgreb, der øgede TREG-celleantal og funktion, reparationen af ​​lungeskade. Og Th2-celler, som til dels er defineret ved deres ekspression af GATA3-transkriptionsfaktor, blev beskrevet for tredive år siden som en kraftig modregulerende population for at forhindre Th1-celleovervægt. Det er vigtigt at bemærke, at kliniske data indikerer, at manøvrer, der øger immunsuppressive cellepopulationer, inklusive TREG-celler, kan reducere alvorlig inflammatorisk sygdom såsom graft-versus-host-sygdom uden at forringe anti-viral immunitet. Derudover kan et passende niveau af TREG-celler i både eksperimentelle modeller og kliniske undersøgelser resultere i en generel forbedring af lungebetændelse under viral bronchiolitis. Samlet indikerer disse fund, at T-celler, der udtrykker en kombineret TREG/Th2-fænotype, forudsigeligt ville give gavnlige virkninger i omgivelserne af viral-induceret lungebetændelse og skade forbundet med alvorlig fase 3 COVID-19 sygdom.

Kliniske forsøg har evalueret både TREG- og Th2-type celler for forskellige tilstande, mest fremtrædende transplantationskomplikationer. Generelt menes thymus-afledte naturlige (n)TREG-celler at udtrykke en mere stabil fænotype end post-thymus-inducerede (i)TREG-celler; til sammenligning kan iTREG-celler mediere mere potent undertrykkelse. Ikke desto mindre er både nTREG- og iTREG-celler modtagelige for differentieringsplasticitet, hvilket skaber bekymring for, at en potentielt terapeutisk TREG-population kan konvertere til patogene Th1/Th17-fænotyper in vivo. Ex vivo udvidede (n)TREG-celler blev evalueret i forbindelse med allogen hæmatopoietisk celletransplantation (HCT) under anvendelse af navlestrengsbloddonorer; for nylig har den samme forskningsgruppe udviklet ex vivo udvidet (i)TREG celleterapi for at begrænse transplantationskomplikationer. Derudover er ex vivo udvidede nTREG-celler blevet evalueret i forbindelse med type I diabetes mellitus; dette kliniske forsøg viste, at TREG-behandling var sikker og i det mindste forbigående effektiv til at forbedre sygdomskontrol. Ydermere, i forbindelse med amyotrofisk lateral sklerose (ALS), som er en sygdom forplantet af en alvorlig Th1-drevet perifer og central inflammatorisk respons, identificerede et klinisk forsøg med nTREG-celleadoptiv overførsel, at interventionen var sikker og viste lovende mht. ALS sygdomsforbedring. Endelig, i et fase II-studie af rapamycin-resistent Th2-celleterapi i forbindelse med lav-intensitets allogen HCT, var adoptiv Th2-celleoverførsel sikker og forbundet med et skift mod Th2-polarisering in vivo, bevarelse af donorengraftment, stabilisering af blandet kimærisme , en lav rate af GVHD og potente antitumoreffekter hos patienter med refraktær hæmatologisk malignitet. Samlet indikerer disse kliniske forsøgsresultater, at adoptiv overførsel af TREG- og Th2-type populationer kan administreres sikkert, selv i den allogene HCT-indstilling, og kan mediere fordelagtig modulering af inflammatoriske tilstande.

Ex vivo-fremstilling kan anvendes til at generere inducerede (i)TREG-celler fra den post-tymiske pool af perifere T-celler. I den nuværende protokol vil fremstillingsmetoden fokusere på mTOR-hæmning, som er en etableret intervention, der fremmer induktionen af ​​TREG-celler. I kombination med mTOR-hæmning inkorporerer det anvendte kultursystem cytokiner, der fremmer både en Th2- og en TREG-fænotype, nemlig IL-4, TGF-beta og IL-2. Endelig vil protokollen omfatte et TREG/Th2-celleprodukt bestående af både CD4+ og CD8+ T-celleundersæt, da disse modregulerende T-celleundersæt udtrykker differentielle T-cellereceptor (TCR) repertoirer og en mangfoldighed af effektormekanismer, der potentielt kan forbedre en anti-inflammatorisk virkning. Til fremstilling af RAPA-501 opsamles mononukleære celler fra perifert blod fra en steady-state aferese og udsættes for følgende to-trins dyrkningsintervention: i trin 1 resulterer et alvorligt sulttrin i T-celle-de-differentiering, som realiseres gennem både selektiv medieudnyttelse og tilføjelse af FDA-godkendte farmaceutiske midler, der potent hæmmer mTOR-signalering; og i trin 2 sker re-differentiering af T-celler under anvendelse af co-stimuleringsmidler og Th2- og TREG-type polariserende cytokiner. Efter 6 dage i kultur kryokonserveres den resulterende TREG/Th2-population i engangsprøver ved protokol-drevne terapeutiske doser. T-celler af type II cytokin-fænotype er til dels karakteriseret ved deres ekspression af transkriptionsfaktoren GATA3, hvorimod regulatoriske T-cellepopulationer identificeres delvist ved deres ekspression af FOXP3-transkriptionsfaktor. Ved dyrkningsinitiering udtrykker en meget lav frekvens af T-celler enten GATA3 eller FOXP3. I modsætning hertil udtrykker RAPA-501-celleproduktet fremstillet under TREG/Th2-kulturbetingelserne en høj frekvens af T-celler, der enten er enkelt-positive for GATA3, enkelt-positive for FOXP3 eller dobbelt-positive for både GATA3 og FOXP3. Det er vigtigt, at denne transkriptionsfaktorprofil udtrykkes i både fremstillede CD4+ og CD8+ T-celler. Det er vigtigt at bemærke, at både CD4+ og CD8+ T-cellepopulationer med TREG-funktion er blevet defineret, herunder en CD8+ TREG-population, der kraftigt undertrykker GVHD; det er potentielt fordelagtigt at have begge undergrupper repræsenteret i et terapeutisk produkt, fordi CD4+ og CD8+ TREG-celler anvender differentielle effektormekanismer.

Regulatoriske T-cellepopulationer kan undertrykke patogene effektor-T-cellepopulationer ved adskillige definerede mekanismer, herunder gennem ekspression af CD39- og CD73-ektonukleotidasemolekyler, som virker til at hydrolysere pro-inflammatorisk ATP mod det immunsuppressive adenosinsubstrat. TREG-celler, der udtrykker CD39, har faktisk øget undertrykkende funktion og er blevet forbundet med opløsning af inflammatorisk tarmsygdom. Ydermere medieres undertrykkende funktion af humane TREG-celler delvist af CD73. T-celler fremstillet i TREG/Th2-kulturbetingelsen har en stigning i ekspression af de TREG-associerede effektormolekyler, CD39 og CD73. Ud over CD39/CD73-ektonukleotidaserne er TREG-cellefunktion også blevet korreleret med ekspression af CD103, som er et integrin, der dikterer epitellymfocytlokalisering. Faktisk samarbejder CD103- og IL-2-receptorsignalering for at opretholde immuntolerance i tarmslimhinden; desuden er CD103-udtrykkende TREG-celler afgørende for forbedring af eksperimentel kronisk GVHD. T-celler fremstillet i TREG/Th2-kulturtilstanden har øget ekspression af TREG-effektormolekylet CD103.

I eksperimentelle modeller er effektiviteten af ​​adoptiv T-celleterapi afhængig af vellykket engraftment og in vivo T-cellepersistens. Det er vigtigt, at T-celledifferentieringstilstanden hjælper med at diktere in vivo persistens, hvor mindre differentierede celler har øget persistens. Murine rapamycin-resistente T-celler, som udtrykte en T-central hukommelse (TCM)-fænotype, havde øget in vivo-engraftment-potentiale i forhold til kontrol-T-celler. Derudover havde humane rapamycin-resistente T-celler også øget engraftment i en human-i-murin model af xenogen graft-versus-host-sygdom. T-celler med reduceret differentiering i forhold til T-effektorhukommelsen (TEM)-populationen har øget in vivo persistens og medierer øgede in vivo-effekter, herunder TCM-undergruppen, den naive T-celle-undergruppe og for nylig T-stamcellehukommelsen (TSCM) delmængde. Dette forhold mellem T-celledifferentieringsstatus og in vivo T-cellefunktion er relevant for TREG-celler, da: (1) TREG-celler af TCM-fænotype var mere effektive til at reducere eksperimentel GVHD i forhold til TREG-celler af TEM-fænotype; og (2) TREG-celler, der udtrykte stamcellemarkøren CD150, var yderst effektive til forebyggelse af stamcelletransplantatafstødning. T-celler fremstillet i TREG/Th2-kulturbetingelsen beriges til celler med en reduceret differentieringstilstand i overensstemmelse med en T-stamcelleundergruppe, herunder ekspression af CD150-markøren.

Det er også vigtigt at vurdere cytokinsekretionsprofilen for de fremstillede RAPA-501-celler. For det første er det afgørende, at celleproduktet er i stand til IL-4-sekretion, som er drivcytokinet til efterfølgende Th2-differentiering. For det andet er det ønskeligt, at en adoptivt overført T-cellepopulation er i stand til at udskille IL-2, da denne kapacitet indikerer en progenitorfunktion, der tillader T-celler at udvide sig lettere in vivo uden behov for eksogent IL-2. Endelig er det vigtigt, at RAPA-501-cellepopulationen har reduceret sekretion af Th1- eller Th17-type cytokinerne IFN-gamma, TNF-alpha, IL-17 og GM-CSF. Det fremstillede RAPA-501-celleprodukt udskiller IL-4 og IL-2 med minimal sekretion af Th1- eller Th17-type cytokiner.

Regulatoriske T-celler kan også defineres delvist ved deres evne til at undertrykke proliferationen eller funktionen af ​​effektor-T-celler. Det er vigtigt, at fremstillede TREG/Th2-celler kraftigt undertrykker Th1/Tc1-cellesekretion af flere inflammatoriske cytokiner, herunder IFN-gamma, GM-CSF og TNF-alfa. For at vurdere undertrykkelsesmekanismen blev der udført eksperimenter ved hjælp af transwell-assayet, hvorved effektor-T-celler og RAPA-501-celler adskilles af et filter, der forhindrer celle-til-celle-kontakt, men tillader cellekommunikation med små opløselige mediatorer såsom cytokiner. RAPA-501-celler virkede på en TCR-uafhængig måde for at undertrykke cytokinsekretionskapaciteten af ​​effektor-T-celler. Fordi der ikke blev leveret nogen co-stimulering til transwell-kammeret indeholdende RAPA-501-celler, krævede RAPA-501-celler ikke co-stimulering for at modulere inflammatoriske cytokinniveauer, herunder IL-2, IFN-gamma, GM-CSF og TNF-alfa . Følgende cytokiner og kemokiner blev reduceret af RAPA-501-celler i dette transwell-assay med relativt lige stor undertrykkelse medieret af CD4+ og CD8+ undergrupper af RAPA-501-celler: CCL1, CCL2, CCL7, CCL11, CCL13, CCL17, CCL20, CCL22, CCL , CXCL1, CXCL10, CXCL11, CXCL12, IL-6, IFN-gamma, GM-CSF og IL-10. TREG-cellers evne til at forbruge IL-2 er et almindeligt beskrevet fænomen, selvom tidligere undersøgelser identificerede behovet for celle-til-celle-kontakt for IL-2-forbrug. Som sådan er RAPA-501-celler unikt i stand til at modulere niveauet af flere inflammatoriske cytokiner på en kontaktuafhængig måde. Disse resultater tyder på, at RAPA-501-celler repræsenterer en egnet kandidat til neutralisering af multiple cytokiner og kemokiner forbundet med forskellige sygdomme, herunder viral-induceret lungebetændelse. I lyset af RAPA-501-celleproduktets evne til at undertrykke T-celle-medieret inflammation på en TCR-uafhængig måde, er RAPA-501-terapi yderst velegnet til allogene, off-the-shelf behandlingsapplikationer.

Yderligere eksperimenter blev udført for at evaluere, om RAPA-501-celleproduktet også kunne regulere humane CNS-mikrogliaceller, som er myeloid-afledte celler, der er analoge med den perifere monocytpopulation. For at evaluere om RAPA-501-celleproduktet kan modulere pro-inflammatoriske mikrogliaceller på en kontaktuafhængig måde, blev RAPA-501-cellernes evne til at reducere den inflammatoriske tilstand af mikroglialcellelinjen HMC3 testet i et transwell-assay. RAPA-501-celler reducerede HMC3-celleudskillelsen af ​​de pro-inflammatoriske cytokiner IL-6 og IFN-gamma og det pro-inflammatoriske kemokin IP-10 ved det relativt lave forhold mellem RAPA-501-celler og mikrogliaceller på 1:40. Disse resultater viser, at RAPA-501-produktet er i stand til at hæmme cytokin- og kemokinsekretion fra myeloid-afledte populationer på en kontakt- og TCR-uafhængig måde, og derved tilvejebringe et yderligere rationale for allogen, off-the-shelf-udnyttelse af RAPA- 501 produkt.

RAPA-501-celleprodukt for stabilitet af T-cellefænotype blev også evalueret. Det vil sige, at det er blevet fastslået, at en begrænsende faktor for TREG-celleterapi kan være differentieringsplasticitet, for eksempel, hvorved TREG-celler kan påvirkes af inflammatoriske cytokiner til at miste deres TREG-egenskaber og antage en Th1-type inflammatorisk tilstand, som derefter kan fremme sygdomspatogenese. For at imødegå denne mulighed, RAPA-501-cellekapaciteten til at modulere T-celledifferentierings-transkriptionsfaktorer efter et forlænget dyrkningsinterval, der involverede T-celle-co-stimulering, fraværet af mTOR-hæmmere og tilstedeværelsen af ​​de polariserende inflammatoriske cytokiner IFN-alfa og IL -6 blev undersøgt. Disse eksperimenter viste, at RAPA-501-celleproduktet havde bemærkelsesværdig differentieringsstabilitet (fortsat ekspression af FOXP3 og GATA3 i CD4+ og CD8+ undergrupper; mangel på opregulering af TBET).

Sammenfattende udtrykker RAPA-501-celler en fænotype, der stemmer overens med en regulatorisk T-cellepopulation, herunder: stabil ekspression af TREG- og Th2-transkriptionsfaktorerne FOXP3 og GATA3; ekspression af TREG funktionelle molekyler CD39, CD73 og CD103; ekspression af en reduceret tilstand af T-celledifferentiering, herunder ekspression af stamcellemarkøren CD150; sekretion af et Th2-mønster af cytokiner med minimal sekretion af Th1/Th17-type cytokiner; funktionel undertrykkende kapacitet mod både effektor-Th1/Tc1-celler og pro-inflammatoriske myeloidceller, herunder reducerede niveauer af multiple inflammatoriske cytokiner og kemokiner; og en evne til at inhibere inflammatoriske effektorer på en kontakt- og TCR-uafhængig måde. Samlet forudsiger disse egenskaber ved RAPA-501-produktet, at denne terapi repræsenterer en ny og lovende kandidat til at behandle COVID-19-relateret ARDS.

Dette er et første-i-menneskeligt fase 1/fase 2b-studie, der evaluerer allogen RAPA-501-celleterapi hos deltagere med COVID-19-relateret ARDS. To fase 1 kohorter vil blive evalueret, nemlig en lavdosis kohorte 1 (40 x 10^6 celler/infusion) og en højdosis kohorte 2 (160 x 10^6 celler/infusion); denne fase 1-komponent vil anvende dosisbegrænsende toksicitet (DLT) som et primært endepunkt. Forudsat at sikkerheden er demonstreret i fase 1-undersøgelseskomponenten, kan hver RAPA-501-dosiskohorte evalueres i den randomiserede fase 2b-komponent. I fase 2b-komponenten vil patienter for hvert RAPA-501-dosisniveau, der er bestemt til at være sikkert, blive randomiseret til at modtage RAPA-501-celler (n=19) eller placebo (n=19). Efter infusion af enten RAPA-501-celler eller placebo, vil disse randomiserede kohorter fortsætte med standardbehandling (ikke protokol-drevet). Det primære endepunkt for fase 2b-studiet er 30-dages mortalitet med det statistiske mål at reducere dødeligheden hos RAPA-501-recipienter i forhold til den randomiserede placebo-kontrolkohorte.

Studiedeltagere skal være indlagte patienter med COVID-19-relateret ARDS, specifikt: SARS-CoV-2-infektion, som bestemt ved RT-PCR eller tilsvarende test; lungeinfiltrat ved radiologisk undersøgelse; og en diagnose af ARDS, der kræver intensiv respiratorisk støtte, herunder ikke-invasiv ventilation, såsom high-flow næsekanyle eller mekanisk ventilation. Undersøgelsen består af: (1) et studietilmeldingstrin (screening); og (2) efter at egnetheden er bekræftet, vil infusion af RAPA-501-celler blive udført. På kohorte 1 vil infusion af RAPA-501-celler være i en dosis på 40 x 10^6 celler/infusion; tre deltagere vil initialt blive behandlet, med en uges adskillelse af deltagere i denne fase 1-komponent for at evaluere for DLT, som vil blive defineret som grad 3 eller højere toksicitet, der kan tilskrives RAPA-501-celler inden for 7 dage efter infusion. På ethvert tidspunkt, hvor kohorte 1-terapi anses for at være sikker (enten 0/3 eller 1/6 med en DLT), så kan kohorte 1 RAPA-501-terapi evalueres i den randomiserede fase 2b-undersøgelseskomponent for at imødekomme det primære studiemål vedrørende til 30 dages dødelighed. På ethvert tidspunkt, hvor Cohort 1-terapi anses for at være sikker, kan behandling på Cohort 2 påbegyndes, som vil evaluere infusionen af ​​RAPA-501-celler i en dosis på 160 x 10^6 celler/infusion. På samme måde som kohorte 1, hvis kohorte 2-terapi anses for at være sikker, kan kohorte 2 RAPA-501-terapi evalueres i den randomiserede fase 2b-undersøgelseskomponent for at adressere det primære studiemål vedrørende 30-dages dødelighed. Undersøgelsen vil bestå af tre hovedfaser: (1) det ovenfor detaljerede 30-dages interval relateret til de primære undersøgelsesmål; (2) et udvidet, samlet 90-dages interval til fortsat relativt intensiv klinisk monitorering af potentielle effekt- og sikkerhedsendepunkter; og (3) et udvidet, samlet 6-måneders interval for at give langsigtet klinisk opfølgning og for at fortsætte med at overvåge for laboratorieparametre relateret til immune og virale endepunkter.