RAPA-501-Allo Therapy of COVID-19-ARDS

Den första-i-människa fas 1-studiekomponenten kommer att utvärdera två dosnivåer av RAPA-501-ALLO från hyllceller hos patienter med COVID-19-relaterad ARDS, med viktiga slutpunkter för säkerhet, biologiska och potentiella sjukdomsmodifierande effekter. Den randomiserade, dubbelblinda, placebokontrollerade fas 2b-studiekomponenten kommer att utvärdera infusion av RAPA-501 ALLO från hyllceller eller en kontrollinfusion, med den primära endpointen som bedömer om RAPA-501-celler minskar 30-dagars mortalitet.

Covid-19-pandemin är en katastrof som utspelar sig med progressiv sjuklighet och dödlighet. Den 6 april 2021 har uppskattningsvis 132,1 miljoner människor insjuknat i viruset och 2 866 000 dödsfall har orsakats globalt. USA har de högsta totalerna med uppskattningsvis 30,8 miljoner diagnostiserade människor och 556 000 dödsfall. USA har de högsta totalerna med uppskattningsvis 22,4 miljoner diagnostiserade människor och 375 000 dödsfall. I steg 1 och 2 av COVID-19 är virusspridning inom patienten dominerande. Som sådan fokuserar terapeutiska interventioner på immunmolekyler (konvalescent serum, monoklonala antikroppar) och antivirala läkemedel (remdesivir). Däremot drivs den allvarligaste och dödligaste formen av covid-19, stadium 3, inte av virusförökning, utan av ett utomkontrollerat immunsvar (hyperinflammation) orsakat av ökningar av immunmolekyler som kallas cytokiner och kemokiner. Som sådan fokuserar terapeutiska interventioner för sjukdomsstadium 3 på antiinflammatoriska läkemedel såsom anticytokinterapi (anti-IL-6-läkemedel) eller kortikosteroidbehandling. Tyvärr tar sådana ingrepp inte upp den fullständiga patogenesen av steg 3 COVID-19, vilket inkluderar hyperinflammation på grund av "cytokinstorm" och "kemokinstorm", vävnadsskada, hyperkoagulation och multiorgansvikt (inklusive lunga, hjärta, njure och hjärna). Lungkomponenten av sjukdom i stadium 3 inkluderar akut andnödsyndrom (ARDS), som är en sista vanlig väg för patientdöd på grund av en myriad av tillstånd, inklusive lunginflammation, sepsis och trauma. Det finns ett stort behov av nya cellulära behandlingar som kan leverera både en bred baserad immunmoduleringseffekt och en vävnadsregenererande effekt, såsom RAPA-501-ALLO allogena hybrid TREG/Th2-celler.

Mekanismen för dödlig lunginflammation i experimentell murin coronavirusinfektion förmedlas av medfödd inflammasomaktivering, en resulterande robust infiltration av inflammatoriska monocyter och makrofager, och en efterföljande ökning av multipla pro-inflammatoriska cytokiner och kemokiner. Viktigt är att CD4+ och CD8+ adaptiva T-cellssvar på experimentell coronavirusinfektion kan vara antingen botande eller sjukdomsförökande. Viral-inducerad lunginflammation har också utvärderats i icke-mänskliga primatmodeller, som har bekräftat att dysreglerad immunaktivering under viral lunginflammation involverar obalans i T-cellssubset, en nedströms monocythärledd inflammatorisk kaskad och resulterande epitelcellskada. Hos människor korrelerar svårighetsgraden av virusinducerad nedre luftvägsinfektion med ökat antal effektorminne CD8+ T-celler i luftvägarna. Som nyligen granskats representerar infektion med mänskligt coronavirus en pågående kamp mellan virus och värd, där svarets natur dikterar att sjukdomen botas eller alternativt förvärrad lungsjukdom. Det finns bevis för att det adaptiva immunsystemet bidrar till lunginflammation under SARS-associerad Coronavirus (SARS-CoV) sjukdom: det vill säga bronkoalveolär vätska från sådana försökspersoner hade ökat antal T-celler och ökade Th1-associerade molekyler IL-12, IFN-gamma, och IP-10. Detta nedströms adaptiva T-cellsmedierade inflammatoriska svar drivs delvis av SARS-Co-V-proteinet viroporin 3a. Specifikt aktiverar viroporinmolekyler NLRP3-inflammasomen som länkar medfödda till adaptiva inflammatoriska svar. Dessutom uttrycker både SARS-CoV och SARS-CoV-2 en ORF3a-molekyl med öppen läsram, som också aktiverar NLRP3-inflammasomen.

Naturen av immunitet under upplösning av symptomatisk COVID-19-infektion har nyligen rapporterats, nämligen: uppkomst av antikroppsutsöndrande celler och CD4+ T-follikulära hjälparceller; ökning av perforin- och granzym-uttryckande CD8+ T-celler; och relativ brist på en ökning av pro-inflammatoriska cytokiner och kemokiner. I markant kontrast hade patienter med allvarlig COVID-19-sjukdom kraftigt ökade plasmanivåer av cytokiner (inklusive IL-2 och TNF-alfa) och kemokiner (inklusive IP-10 och MIP-1-alfa) (Huang et al., Lancet, 2020). Sammantaget indikerar dessa resultat att pro-inflammatoriska cytokin- och kemokinsvar som inträffar vid svår covid-19 är skadliga och att effektiva antiinflammatoriska metoder i slutändan kan visa sig vara terapeutiska. Men, som tidigare beskrivits, kännetecknas den mer avancerade steg 3 COVID-19 sjukdomen av en ARDS-komponent, och cytokinstorm, som sådan bör nya metoder för att behandla COVID-19 viral lunginflammation optimalt inkorporera både ett antiinflammatoriskt element och en vävnadsskydd/vävnadsreparationselement.

Steg 3 COVID-19 bär på en beräknad 30-dagarsdödlighet på över 50 % trots användning av intensivvårdsavdelning, mekanisk ventilation och stödbehandlingar för att hantera ARDS och multiorgansvikt. Snävt verkande riktade antiinflammatoriska tillvägagångssätt som anti-IL-6-terapi har inte varit särskilt effektiva i steg 3 COVID-19 och den breda antiinflammatoriska farmaceutiska metoden med kortikosteroidterapi har endast mildrat steg 3-sjukdomen i vissa studier. Cellterapi utvärderas också i steg 3 COVID-19, särskilt mesenkymala stromaceller (MSC) och nu, med det nuvarande RAPA-501-ALLO-protokollet, regulatoriska T (TREG)-celler. TREG-terapi har en verkningsmekanism som inkluderar en mångfacetterad antiinflammatorisk effekt, vilket sätter TREG-terapi i framkant av framtida botande behandling av ett brett spektrum av autoimmuna och neurodegenerativa sjukdomar, plus transplantationskomplikationer, såsom graft-versus-host sjukdom (GVHD) och transplantatavstötning. Dessutom kan TREG-terapi ge en vävnadsregenererande effekt, vilket placerar TREG-cellterapi i spetsen för nya regenerativa medicininsatser för att reparera en myriad av vävnadsbaserade sjukdomar, såsom sjukdomar i hud, muskler, lungor, lever, tarm, hjärta (hjärtinfarkt) och hjärna (stroke). RAPA-501-ALLO off-the-shelf cellterapi erbjuder denna potentiella dubbla hotverkningsmekanism som inkluderar både antiinflammatoriska och vävnadsreparationseffekter för effektiv behandling av COVID-19 och flera dödliga tillstånd.

RAPA-501-ALLO-celler genereras från friska frivilliga, kryokonserveras, bankas, och är sedan tillgängliga för off-the-shelf-terapi när som helst. Under tillverkningen "omprogrammeras" T-celler ex vivo med hjälp av en ny, patenterad 7-dagars tvåstegsprocess som involverar de-differentiering av T-celler och efterföljande omdifferentiering mot de två viktiga antiinflammatoriska programmen, TREG- och Th2-vägarna, på så sätt skapa en "hybrid" produkt. Hybridfenotypen hämmar inflammatoriska vägar som fungerar i COVID-19, inklusive modulering av flera cytokiner och kemokiner, som attraherar inflammatoriska celler in i vävnad för initiering av multiorganskada. Hybridfenotypen TREG och Th2 av RAPA-501-ALLO-celler korsreglerar Th1- och Th17-populationer som initierar hyperinflammation av COVID-19. RAPA-501-immunmodulering sker på ett T-cellsreceptoroberoende sätt, vilket möjliggör standardcellterapi. Slutligen, i experimentella modeller av viral lunginflammation och ARDS, medierar TREG-celler en skyddande effekt på lungalveolvävnaden. På grund av denna unika verkningsmekanism som involverar både antiinflammatoriska och vävnadsskyddande effekter, är den allogena RAPA-501 T-cellprodukten särskilt lämpad för utvärdering i samband med steg 3 COVID-19-relaterad ARDS.

I allmänhet drivs klassisk autoimmun sjukdom, neurodegenerativ sjukdom och virusinducerad inflammatorisk sjukdom av dominans av Th1/Th17-typsvar med en relativ otillräcklighet av de motreglerande immunsuppressiva Th2- och TREG-undergrupperna. TREG-celler, som delvis definieras av deras uttryck av FOXP3-transkriptionsfaktor, har studerats omfattande i experimentella modeller för deras förmåga att modulera autoimmun sjukdom, neurodegenerativ sjukdom och transplantationskomplikationer, inklusive graft-versus-host-sjukdom (GVHD) och graft avslag. Viktigt är att T-cellsproduktion av IL-2 eller exogen IL-2-administration driver lunginflammation under experimentell virusinfektion; Därför, med tanke på TREG-cellers kända roll som konsument av IL-2, finns det ett starkt mekanistiskt skäl för ett fördelaktigt bidrag från TREG-celler under virusdriven lunginflammation. Vidare, i en experimentell murina modeller av virusinducerad lunginflammation och lungskada, påskyndade interventioner som ökade TREG-cellantal och funktion reparationen av lungskada. Och Th2-celler, som delvis definieras av deras uttryck av GATA3-transkriptionsfaktor, beskrevs för trettio år sedan som en kraftfull motreglerande population för att förhindra övervägande av Th1-celler. Det är viktigt att notera att kliniska data indikerar att manövrar som ökar immunsuppressiva cellpopulationer, inklusive TREG-celler, kan minska allvarliga inflammatoriska sjukdomar som transplantat-mot-värd-sjukdom utan att försämra den antivirala immuniteten. Dessutom, i både experimentella modeller och kliniska studier, kan en lämplig nivå av TREG-celler resultera i en övergripande förbättring av lunginflammation under viral bronkiolit. Sammantaget indikerar dessa fynd att T-celler som uttrycker en kombinerad TREG/Th2-fenotyp förutsägbart skulle ge gynnsamma effekter i miljön av virusinducerad lunginflammation och skada associerad med svår steg 3 COVID-19-sjukdom.

Kliniska prövningar har utvärderat celler av både TREG och Th2-typ för olika tillstånd, framför allt transplantationskomplikationer. I allmänhet tros tymus-härledda naturliga (n)TREG-celler uttrycka en mer stabil fenotyp än post-tymus-inducerade (i)TREG-celler; i jämförelse kan iTREG-celler förmedla mer potent dämpning. Icke desto mindre är både nTREG- och iTREG-celler mottagliga för differentieringsplasticitet, vilket skapar oro för att en potentiellt terapeutisk TREG-population kan omvandlas till patogena Th1/Th17-fenotyper in vivo. Ex vivo expanderade (n)TREG-celler utvärderades i samband med allogen hematopoetisk celltransplantation (HCT) med användning av navelsträngsblodgivare; på senare tid har samma forskargrupp utvecklat ex vivo expanderad (i)TREG-cellterapi för att begränsa transplantationskomplikationer. Dessutom har ex vivo expanderade nTREG-celler utvärderats vid typ I diabetes mellitus; denna kliniska prövning fann att TREG-terapi var säker och åtminstone tillfälligt effektiv för att förbättra sjukdomskontroll. Vidare, i samband med amyotrofisk lateralskleros (ALS), som är en sjukdom som förökas av ett allvarligt Th1-drivet perifert och centralt inflammatoriskt svar, identifierade en klinisk prövning av adoptiv överföring av nTREG-celler att interventionen var säker och visade lovande i termer av ALS-sjukdomsförbättring. Slutligen, i en fas II-studie av rapamycinresistent Th2-cellterapi vid lågintensiv allogen HCT, var adoptiv Th2-cellöverföring säker och associerad med en förskjutning mot Th2-polarisering in vivo, bevarande av givarengraftment, stabilisering av blandad chimerism , en låg frekvens av GVHD och potenta antitumöreffekter hos patienter med refraktär hematologisk malignitet. Sammantaget indikerar dessa kliniska prövningsresultat att adoptiv överföring av TREG- och Th2-typpopulationer kan administreras säkert, även i den allogena HCT-miljön, och kan förmedla fördelaktig modulering av inflammatoriska tillstånd.

Ex vivo-tillverkning kan användas för att generera inducerade (i)TREG-celler från den posttymiska poolen av perifera T-celler. I det nuvarande protokollet kommer tillverkningsmetoden att fokusera på mTOR-hämning, vilket är en etablerad intervention som främjar induktionen av TREG-celler. I kombination med mTOR-hämning innehåller odlingssystemet som används cytokiner som främjar både en Th2- och en TREG-fenotyp, nämligen IL-4, TGF-beta och IL-2. Slutligen kommer protokollet att inkludera en TREG/Th2-cellprodukt som består av både CD4+ och CD8+ T-cellsundergrupper, eftersom dessa motreglerande T-cellsundergrupper uttrycker differentiella T-cellreceptorrepertoarer (TCR) och en mångfald effektormekanismer som potentiellt kan förbättra en antiinflammatorisk effekt. För RAPA-501-tillverkning samlas perifera mononukleära blodceller från en steady-state-aferes och utsätts för följande tvåstegsodlingsintervention: i steg 1 resulterar ett allvarligt svältsteg i T-cellsde-differentiering, vilket realiseras genom både selektiv mediaanvändning och tillägg av FDA-godkända farmaceutiska medel som kraftigt hämmar mTOR-signalering; och i steg 2 sker återdifferentiering av T-celler med användning av samstimuleringsmedel och polariserande cytokiner av Th2- och TREG-typ. Efter 6 dagar i odling, kryokonserveras den resulterande TREG/Th2-populationen i engångsalikvoter vid protokollstyrda terapeutiska doser. T-celler av typ II cytokinfenotyp kännetecknas delvis av deras uttryck av transkriptionsfaktorn GATA3 medan regulatoriska T-cellpopulationer identifieras delvis genom deras uttryck av FOXP3-transkriptionsfaktor. Vid odlingsinitiering uttrycker en mycket låg frekvens av T-celler antingen GATA3 eller FOXP3. Däremot uttrycker RAPA-501-cellprodukten tillverkad under TREG/Th2-odlingsförhållandena en hög frekvens av T-celler som antingen är enkelpositiva för GATA3, singelpositiva för FOXP3 eller dubbelpositiva för både GATA3 och FOXP3. Viktigt är att denna transkriptionsfaktorprofil uttrycks i både tillverkade CD4+ och CD8+ T-celler. Det är viktigt att notera att både CD4+ och CD8+ T-cellpopulationer med TREG-funktion har definierats, inklusive en CD8+ TREG-population som kraftigt undertrycker GVHD; det är potentiellt fördelaktigt att ha båda undergrupperna representerade i en terapeutisk produkt eftersom CD4+ och CD8+ TREG-celler använder differentiella effektormekanismer.

Regulatoriska T-cellspopulationer kan undertrycka patogena effektor-T-cellpopulationer genom flera definierade mekanismer, inklusive genom uttryck av CD39- och CD73-ektonukleotidasmolekyler, som verkar för att hydrolysera pro-inflammatorisk ATP mot det immunsuppressiva adenosinsubstratet. TREG-celler som uttrycker CD39 har faktiskt ökad suppressiv funktion och har associerats med upplösning av inflammatorisk tarmsjukdom. Vidare förmedlas undertryckande funktion hos mänskliga TREG-celler delvis av CD73. T-celler tillverkade i TREG/Th2-odlingsbetingelser har en ökning i uttryck av de TREG-associerade effektormolekylerna, CD39 och CD73. Förutom CD39/CD73-ektonukleotidaserna har TREG-cellfunktion också korrelerats med uttryck av CD103, vilket är ett integrin som dikterar epitelial lymfocytlokalisering. CD103- och IL-2-receptorsignalering samarbetar för att upprätthålla immuntolerans i tarmslemhinnan; dessutom är CD103-uttryckande TREG-celler kritiska för förbättring av experimentell kronisk GVHD. T-celler tillverkade i TREG/Th2-odlingsförhållanden har ökat uttryck av TREG-effektormolekylen CD103.

I experimentella modeller är effekten av adoptiv T-cellsterapi beroende av framgångsrik engraftment och in vivo T-cells uthållighet. Viktigt är att T-cellsdifferentieringstillståndet hjälper till att diktera in vivo persistens, med mindre differentierade celler som har ökad persistens. Murina rapamycin-resistenta T-celler, som uttryckte en T-centralminne (TCM) fenotyp, hade ökad in vivo-inplanteringspotential i förhållande till kontroll-T-celler. Dessutom hade humana rapamycin-resistenta T-celler också ökad intransplantation i en människa-in-murin modell av xenogen transplantat-mot-värd-sjukdom. T-celler med minskad differentiering i förhållande till T-effektorminnespopulationen (TEM) har ökat in vivo persistens och medierar ökade in vivo-effekter, inklusive TCM-undergruppen, den naiva T-cellsundergruppen och på senare tid T-stamcellsminnet (TSCM) delmängd. Detta förhållande mellan T-cellsdifferentieringsstatus och T-cellsfunktion in vivo är relevant för TREG-celler, eftersom: (1) TREG-celler av TCM-fenotyp var mer effektiva för att reducera experimentell GVHD i förhållande till TREG-celler av TEM-fenotyp; och (2) TREG-celler som uttryckte stamcellsmarkören CD150 var mycket effektiva för att förhindra avstötning av stamcellstransplantat. T-celler tillverkade i TREG/Th2-odlingsbetingelser anrikas för celler som har ett reducerat differentieringstillstånd som överensstämmer med en undergrupp av T-stamceller, inklusive uttryck av CD150-markören.

Det är också viktigt att bedöma cytokinutsöndringsprofilen för de tillverkade RAPA-501-cellerna. För det första är det avgörande att cellprodukten är kapabel till IL-4-utsöndring, som är drivcytokinet för efterföljande Th2-differentiering. För det andra är det önskvärt att en adoptivt överförd T-cellpopulation är kapabel att utsöndra IL-2, eftersom denna kapacitet indikerar en progenitorfunktion som tillåter T-celler att expandera lättare in vivo utan behov av exogent IL-2. Slutligen är det viktigt att RAPA-501-cellpopulationen har minskad utsöndring av cytokinerna av Th1- eller Th17-typ IFN-gamma, TNF-alfa, IL-17 och GM-CSF. Den tillverkade RAPA-501-cellprodukten utsöndrar IL-4 och IL-2 med minimal utsöndring av cytokiner av Th1- eller Th17-typ.

Regulatoriska T-celler kan också definieras delvis genom deras förmåga att undertrycka proliferationen eller funktionen hos effektor-T-celler. Viktigt är att tillverkade TREG/Th2-celler kraftigt undertrycker Th1/Tc1-cellsekretion av flera inflammatoriska cytokiner, inklusive IFN-gamma, GM-CSF och TNF-alfa. För att bedöma undertryckningsmekanismen utfördes experiment med användning av transwell-analysen, varvid effektor-T-celler och RAPA-501-celler separeras av ett filter som förhindrar cell-till-cell-kontakt men tillåter cellkommunikation med små lösliga mediatorer såsom cytokiner. RAPA-501-celler verkade på ett TCR-oberoende sätt för att undertrycka cytokinutsöndringskapaciteten hos effektor-T-celler. Eftersom ingen samstimulering tillhandahölls till transwell-kammaren som innehöll RAPA-501-celler, krävde inte RAPA-501-celler samstimulering för att modulera inflammatoriska cytokinnivåer, inklusive IL-2, IFN-gamma, GM-CSF och TNF-alfa . Följande cytokiner och kemokiner reducerades av RAPA-501-celler i denna transwell-analys, med relativt lika undertryckande medierad av CD4+ och CD8+ undergrupper av RAPA-501-celler: CCL1, CCL2, CCL7, CCL11, CCL13, CCL17, CCL20, CCL22, CCL , CXCL1, CXCL10, CXCL11, CXCL12, IL-6, IFN-gamma, GM-CSF och IL-10. TREG-cellers förmåga att konsumera IL-2 är ett vanligt beskrivet fenomen, även om tidigare studier identifierade kravet på cell-till-cell-kontakt för IL-2-konsumtion. Som sådan är RAPA-501-celler unikt kapabla att modulera nivån av flera inflammatoriska cytokiner på ett kontaktoberoende sätt. Dessa resultat tyder på att RAPA-501-celler representerar en lämplig kandidat för neutralisering av flera cytokiner och kemokiner associerade med olika sjukdomar, inklusive virusinducerad lunginflammation. I ljuset av denna förmåga hos RAPA-501-cellprodukten att undertrycka T-cellsmedierad inflammation på ett TCR-oberoende sätt, är RAPA-501-terapi mycket lämplig för allogena, färdiga behandlingstillämpningar.

Ytterligare experiment utfördes för att utvärdera om RAPA-501-cellprodukten också kan reglera humana CNS-mikrogliaceller, som är myeloidhärledda celler som är analoga med den perifera monocytpopulationen. För att utvärdera om RAPA-501-cellprodukten kan modulera pro-inflammatoriska mikrogliaceller på ett kontaktoberoende sätt, testades förmågan hos RAPA-501-celler att minska det inflammatoriska tillståndet hos mikrogliacellinjen HMC3 i en transwell-analys. RAPA-501-celler reducerade HMC3-cellsekretionen av de pro-inflammatoriska cytokinerna IL-6 och IFN-gamma och den pro-inflammatoriska kemokinen IP-10 vid det relativt låga förhållandet mellan RAPA-501-celler och mikrogliaceller på 1:40. Dessa resultat visar att RAPA-501-produkten är kapabel att hämma cytokin- och kemokinsekretion från myeloid-härledda populationer på ett kontakt- och TCR-oberoende sätt, och därigenom tillhandahålla en ytterligare motivering för allogen, off-the-shelf-användning av RAPA- 501 produkt.

RAPA-501-cellprodukt för stabilitet av T-cellsfenotyp utvärderades också. Det vill säga, det har fastställts att en begränsande faktor för TREG-cellterapi kan vara differentieringsplasticitet, till exempel, varvid TREG-celler kan påverkas av inflammatoriska cytokiner att förlora sina TREG-egenskaper och anta ett inflammatoriskt tillstånd av Th1-typ, vilket sedan kan främja sjukdomspatogenes. För att ta itu med denna möjlighet, RAPA-501-cellkapaciteten att modulera T-celldifferentierings-transkriptionsfaktorer efter ett förlängt odlingsintervall som involverade T-cellsamstimulering, frånvaron av mTOR-hämmare och närvaron av de polariserande inflammatoriska cytokinerna IFN-alfa och IL -6 studerades. Dessa experiment visade att RAPA-501-cellprodukten hade anmärkningsvärd differentieringsstabilitet (fortsatt uttryck av FOXP3 och GATA3 i CD4+ och CD8+ undergrupper; avsaknad av uppreglering av TBET).

Sammanfattningsvis uttrycker RAPA-501-celler en fenotyp som överensstämmer med en regulatorisk T-cellpopulation, inklusive: stabilt uttryck av TREG- och Th2-transkriptionsfaktorerna FOXP3 och GATA3; uttryck av de funktionella TREG-molekylerna CD39, CD73 och CD103; uttryck av ett reducerat tillstånd av T-cellsdifferentiering, inklusive uttryck av stamcellsmarkören CD150; utsöndring av ett Th2-mönster av cytokiner med minimal utsöndring av cytokiner av Th1/Th17-typ; funktionell undertryckande förmåga mot både effektor-Thl/Tcl-celler och pro-inflammatoriska myeloidceller, inklusive reducerade nivåer av multipla inflammatoriska cytokiner och kemokiner; och en förmåga att hämma inflammatoriska effektorer på ett kontakt- och TCR-oberoende sätt. Sammantaget förutspår dessa egenskaper hos RAPA-501-produkten att denna terapi representerar en ny och lovande kandidat för att behandla COVID-19-relaterad ARDS.

Detta är en första-i-mänsklig fas 1/fas 2b-studie som utvärderar allogen RAPA-501-cellterapi hos deltagare med COVID-19-relaterad ARDS. Två fas 1-kohorter kommer att utvärderas, nämligen en lågdoskohort 1 (40 x 10^6 celler/infusion) och en högdoskohort 2 (160 x 10^6 celler/infusion); denna fas 1-komponent kommer att använda dosbegränsande toxicitet (DLT) som primär endpoint. Förutsatt att säkerheten påvisas i fas 1-studiekomponenten kan varje RAPA-501-doskohort utvärderas i den randomiserade fas 2b-komponenten. I fas 2b-komponenten, för varje RAPA-501-dosnivå som bedöms vara säker, kommer patienter att randomiseras till att få RAPA-501-celler (n=19) eller placebo (n=19). Efter infusion av antingen RAPA-501-celler eller placebo kommer dessa randomiserade kohorter att fortsätta med standardbehandling (ej protokollstyrd). Det primära effektmåttet för fas 2b-studien är 30 dagars mortalitet, med det statistiska målet att minska dödligheten hos RAPA-501-mottagare i förhållande till den randomiserade placebokontrollkohorten.

Studiedeltagare måste vara inlagda patienter med covid-19-relaterad ARDS, specifikt: SARS-CoV-2-infektion, som fastställts med RT-PCR eller motsvarande test; lunginfiltrat vid radiologisk undersökning; och en diagnos av ARDS som kräver intensivt andningsstöd inklusive icke-invasiv ventilation såsom högflödes näskanyl eller mekanisk ventilation. Studien består av: (1) ett steg för studieregistrering (screening); och (2) efter att behörighet har bekräftats kommer infusion av RAPA-501-celler att utföras. På kohort 1 kommer infusion av RAPA-501-celler att ske i en dos av 40 x 10^6 celler/infusion; tre deltagare kommer att behandlas initialt, med en vecka som separerar deltagarna i denna fas 1-komponent för att utvärdera för DLT, som kommer att definieras som grad 3 eller högre toxicitet hänförlig till RAPA-501-celler inom 7 dagar efter infusion. När som helst Kohort 1-terapi bedöms vara säker (antingen 0/3 eller 1/6 med en DLT), kan Kohort 1 RAPA-501-terapi utvärderas i den randomiserade fas 2b-studiekomponenten för att ta itu med det primära studiemålet relaterat till till 30 dagars dödlighet. När som helst behandling med Cohort 1 anses vara säker kan behandling på Cohort 2 inledas, vilket kommer att utvärdera infusionen av RAPA-501-celler i en dos av 160 x 10^6 celler/infusion. På samma sätt som Cohort 1, om Cohort 2-terapi bedöms vara säker, kan Cohort 2 RAPA-501-terapi utvärderas i den randomiserade fas 2b-studiekomponenten för att ta itu med det primära studiemålet relaterat till 30-dagars mortalitet. Studien kommer att bestå av tre huvudsteg: (1) det ovan detaljerade 30-dagarsintervallet relaterat till de primära studiemålen; (2) ett förlängt, totalt 90-dagarsintervall för att fortsätta relativt intensiv klinisk övervakning av potentiella effekt- och säkerhetseffektpunkter; och (3) ett förlängt, totalt 6-månadersintervall för att ge långsiktig klinisk uppföljning och för att fortsätta att övervaka laboratorieparametrar relaterade till immun- och virala endpoints.