RAPA-501-Allo thérapie du COVID-19-SDRA

Le premier volet de l'étude de phase 1 chez l'homme évaluera deux niveaux de dose de cellules prêtes à l'emploi de RAPA-501-ALLO chez des patients atteints de SDRA lié au COVID-19, avec des critères d'évaluation clés de sécurité, d'effets biologiques et potentiels de modification de la maladie. La composante de l'étude de phase 2b randomisée, en double aveugle et contrôlée par placebo évaluera la perfusion de cellules RAPA-501 ALLO prêtes à l'emploi ou une perfusion de contrôle, le critère d'évaluation principal évaluant si les cellules RAPA-501 réduisent la mortalité à 30 jours.

La pandémie de COVID-19 est une catastrophe qui se joue avec une morbidité et une mortalité progressives. Au 6 avril 2021, on estime que 132,1 millions de personnes ont contracté le virus et 2 866 000 décès en ont résulté dans le monde. Les États-Unis ont les totaux les plus élevés avec environ 30,8 millions de personnes diagnostiquées et 556 000 décès. Les États-Unis ont les totaux les plus élevés avec environ 22,4 millions de personnes diagnostiquées et 375 000 décès. Aux stades 1 et 2 de la COVID-19, la propagation virale au sein du patient est prédominante. Ainsi, les interventions thérapeutiques portent sur les molécules immunitaires (sérum de convalescence, anticorps monoclonaux) et les médicaments antiviraux (remdesivir). À l'opposé, la forme la plus grave et la plus mortelle de COVID-19, le stade 3, n'est pas due à la propagation virale, mais à une réponse immunitaire incontrôlable (hyperinflammation) causée par une augmentation des molécules immunitaires appelées cytokines et chimiokines. Ainsi, les interventions thérapeutiques pour la maladie de stade 3 se concentrent sur les médicaments anti-inflammatoires tels que la thérapie anti-cytokine (médicaments anti-IL-6) ou la corticothérapie. Malheureusement, de telles interventions ne traitent pas la pathogenèse complète du stade 3 du COVID-19, qui comprend l'hyperinflammation due à la «tempête de cytokines» et à la «tempête de chimiokines», les lésions tissulaires, l'hypercoagulation et la défaillance multiviscérale (y compris les poumons, le cœur, les reins et cerveau). La composante pulmonaire de la maladie de stade 3 comprend le syndrome de détresse respiratoire aiguë (SDRA), qui est une voie finale commune de décès du patient en raison d'une myriade d'affections, notamment la pneumonie, la septicémie et les traumatismes. Il existe un besoin urgent de nouveaux traitements cellulaires capables de fournir à la fois un effet de modulation immunitaire à large échelle et un effet de régénération tissulaire, tels que les cellules TREG/Th2 hybrides allogéniques prêtes à l'emploi RAPA-501-ALLO.

Le mécanisme de la pneumonie mortelle dans l'infection expérimentale à coronavirus murin est médié par l'activation innée de l'inflammasome, une infiltration robuste résultante de monocytes et de macrophages inflammatoires, et une augmentation ultérieure de plusieurs cytokines et chimiokines pro-inflammatoires. Il est important de noter que la réponse adaptative des lymphocytes T CD4 + et CD8 + à une infection expérimentale par un coronavirus peut être soit curative, soit propager la maladie. L'inflammation pulmonaire induite par le virus a également été évaluée dans des modèles de primates non humains, qui ont confirmé que l'activation immunitaire dérégulée pendant la pneumonie virale implique un déséquilibre du sous-ensemble de cellules T, une cascade inflammatoire dérivée des monocytes en aval et une lésion des cellules épithéliales qui en résulte. Chez l'homme, la gravité de l'infection virale des voies respiratoires inférieures est corrélée à l'augmentation du nombre de lymphocytes T CD8+ à mémoire effectrice dans les voies respiratoires. Comme récemment examiné, l'infection à coronavirus humain représente une bataille continue entre le virus et l'hôte, la nature de la réponse dictant la guérison de la maladie ou, alternativement, l'aggravation de la maladie pulmonaire. Il existe des preuves que le système immunitaire adaptatif contribue à l'inflammation pulmonaire pendant la maladie à coronavirus associé au SRAS (SRAS-CoV) : c'est-à-dire que le liquide bronchoalvéolaire de ces sujets avait un nombre accru de lymphocytes T et une augmentation des molécules associées à Th1 IL-12, IFN-gamma, et IP-10. Cette réponse inflammatoire à médiation par les lymphocytes T adaptative en aval est entraînée en partie par la viroporine 3a de la protéine SARS-Co-V. Plus précisément, les molécules de viroporine activent l'inflammasome NLRP3 qui relie les réponses inflammatoires innées à adaptatives. De plus, le SARS-CoV et le SARS-CoV-2 expriment une molécule ORF3a à cadre de lecture ouvert, qui active également l'inflammasome NLRP3.

La nature de l'immunité lors de la résolution de l'infection symptomatique au COVID-19 a récemment été rapportée, à savoir : l'émergence de cellules sécrétant des anticorps et de cellules auxiliaires folliculaires T CD4+ ; augmentation des lymphocytes T CD8+ exprimant la perforine et le granzyme ; et l'absence relative d'augmentation des cytokines et des chimiokines pro-inflammatoires. À l'opposé, les patients atteints de COVID-19 sévère présentaient des taux plasmatiques de cytokines (y compris IL-2 et TNF-alpha) et de chimiokines (y compris IP-10 et MIP-1-alpha) considérablement augmentés (Huang et al., Lancet, 2020). Collectivement, ces résultats indiquent que les réponses pro-inflammatoires des cytokines et des chimiokines qui se produisent dans les cas graves de COVID-19 sont préjudiciables et que des approches anti-inflammatoires efficaces peuvent finalement s'avérer thérapeutiques. Cependant, comme détaillé précédemment, la maladie COVID-19 de stade 3 plus avancée est caractérisée par une composante SDRA et une tempête de cytokines, en tant que telle, de nouvelles approches pour traiter la pneumonie virale COVID-19 devraient incorporer de manière optimale à la fois un élément anti-inflammatoire et un élément de protection tissulaire/réparation tissulaire.

Le COVID-19 de stade 3 entraîne une mortalité estimée à 30 jours supérieure à 50 % malgré l'utilisation des soins intensifs, la ventilation mécanique et les thérapies de soins de soutien pour gérer le SDRA et la défaillance multiviscérale. Les approches anti-inflammatoires ciblées à action étroite telles que les thérapeutiques anti-IL-6 n'ont pas été particulièrement efficaces dans le COVID-19 de stade 3 et la large approche pharmaceutique anti-inflammatoire de la corticothérapie n'a que modérément tempéré la maladie de stade 3 dans certaines études. La thérapie cellulaire est également évaluée au stade 3 du COVID-19, en particulier les cellules stromales mésenchymateuses (MSC) et maintenant, avec le protocole actuel RAPA-501-ALLO, les cellules T régulatrices (TREG). La thérapie TREG a un mécanisme d'action qui comprend un effet anti-inflammatoire à multiples facettes, ce qui place la thérapie TREG à l'avant-garde de la future thérapie curative d'un large éventail de maladies auto-immunes et neurodégénératives, ainsi que des complications de greffe, telles que le greffon contre l'hôte (GVHD) et le rejet de greffe. De plus, la thérapie TREG peut fournir un effet régénérateur tissulaire, ce qui place la thérapie cellulaire TREG à la tête des nouveaux efforts de médecine régénérative pour réparer une myriade de maladies tissulaires, telles que les maladies de la peau, des muscles, des poumons, du foie, de l'intestin, cardiaque (infarctus du myocarde) et cérébral (accident vasculaire cérébral). La thérapie cellulaire prête à l'emploi RAPA-501-ALLO offre ce mécanisme d'action potentiel à double menace qui intègre à la fois des effets anti-inflammatoires et de réparation tissulaire pour un traitement efficace du COVID-19 et de plusieurs conditions létales.

Les cellules RAPA-501-ALLO sont générées à partir de volontaires sains, cryoconservées, mises en banque et sont ensuite disponibles pour une thérapie prête à l'emploi à tout moment. Au cours de la fabrication, les cellules T sont "reprogrammées" ex vivo à l'aide d'un nouveau processus breveté en deux étapes de 7 jours qui implique la dédifférenciation des cellules T et la re-différenciation ultérieure vers les deux programmes anti-inflammatoires clés, les voies TREG et Th2, créant ainsi un produit « hybride ». Le phénotype hybride inhibe les voies inflammatoires opérationnelles dans le COVID-19, y compris la modulation de plusieurs cytokines et chimiokines, qui attirent les cellules inflammatoires dans les tissus pour déclencher des lésions multi-organes. Le phénotype hybride TREG et Th2 des cellules RAPA-501-ALLO régule de manière croisée les populations Th1 et Th17 qui initient l'hyperinflammation du COVID-19. La modulation immunitaire de RAPA-501 se produit d'une manière indépendante du récepteur des lymphocytes T, permettant ainsi une thérapie cellulaire prête à l'emploi. Enfin, dans des modèles expérimentaux de pneumonie virale et de SDRA, les cellules TREG ont un effet protecteur sur le tissu alvéolaire pulmonaire. En raison de ce mécanisme d'action unique qui implique à la fois des effets anti-inflammatoires et protecteurs des tissus, le produit de lymphocytes T allogéniques RAPA-501 est particulièrement adapté à l'évaluation dans le cadre du SDRA de stade 3 lié au COVID-19.

En général, les maladies auto-immunes classiques, les maladies neurodégénératives et les maladies inflammatoires d'origine virale sont motivées par la prédominance des réponses de type Th1/Th17 avec une insuffisance relative des sous-ensembles Th2 et TREG immunosuppresseurs contre-régulateurs. Les cellules TREG, qui sont définies en partie par leur expression du facteur de transcription FOXP3, ont été largement étudiées dans des modèles expérimentaux pour leur capacité à moduler les maladies auto-immunes, les maladies neurodégénératives et les complications de la transplantation, y compris la maladie du greffon contre l'hôte (GVHD) et la greffe. rejet. Il est important de noter que la production d'IL-2 ou d'IL-2 exogène par les lymphocytes T entraîne une inflammation pulmonaire lors d'une infection virale expérimentale ; par conséquent, étant donné le rôle connu des cellules TREG en tant que consommateurs d'IL-2, il existe une forte justification mécaniste pour une contribution bénéfique des cellules TREG lors de l'inflammation pulmonaire d'origine virale. En outre, dans des modèles murins expérimentaux d'inflammation pulmonaire et de lésion pulmonaire induites par le virus, des interventions qui ont augmenté le nombre et la fonction des cellules TREG ont accéléré la réparation des lésions pulmonaires. Et, les cellules Th2, qui sont définies en partie par leur expression du facteur de transcription GATA3, ont été décrites il y a trente ans comme une population contre-régulatrice puissante pour empêcher la prédominance des cellules Th1. Il est important de noter que les données cliniques indiquent que les manœuvres qui augmentent les populations de cellules immunosuppressives, y compris les cellules TREG, peuvent réduire les maladies inflammatoires graves telles que la maladie du greffon contre l'hôte sans altérer l'immunité antivirale. De plus, tant dans les modèles expérimentaux que dans les études cliniques, un niveau approprié de cellules TREG peut entraîner une amélioration globale de l'inflammation pulmonaire au cours de la bronchiolite virale. Collectivement, ces résultats indiquent que les lymphocytes T exprimant un phénotype combiné TREG/Th2 produiraient de manière prévisible des effets bénéfiques dans le cadre d'une inflammation pulmonaire induite par le virus et de lésions associées à une maladie COVID-19 sévère de stade 3.

Les essais cliniques ont évalué à la fois les cellules de type TREG et Th2 pour diverses conditions, principalement les complications de la transplantation. En général, on pense que les cellules (n)TREG naturelles dérivées du thymus expriment un phénotype plus stable que les cellules (i)TREG induites post-thymiques; en comparaison, les cellules iTREG peuvent induire une suppression plus puissante. Néanmoins, les cellules nTREG et iTREG sont sensibles à la plasticité de la différenciation, ce qui fait craindre qu'une population TREG potentiellement thérapeutique ne se convertisse en phénotypes pathogènes Th1/Th17 in vivo. Les cellules (n)TREG expansées ex vivo ont été évaluées dans le cadre d'une greffe allogénique de cellules hématopoïétiques (HCT) à l'aide de donneurs de sang de cordon ; plus récemment, le même groupe de recherche a développé une thérapie cellulaire (i)TREG étendue ex vivo pour limiter les complications de la greffe. De plus, des cellules nTREG expansées ex vivo ont été évaluées dans le cadre du diabète sucré de type I ; cet essai clinique a révélé que la thérapie TREG était sûre et au moins temporairement efficace pour améliorer le contrôle de la maladie. De plus, dans le cadre de la sclérose latérale amyotrophique (SLA), qui est une maladie propagée par une réponse inflammatoire périphérique et centrale sévère induite par Th1, un essai clinique de transfert adoptif de cellules nTREG a identifié que l'intervention était sûre et prometteuse en termes de Amélioration de la maladie SLA. Enfin, dans une étude de phase II sur la thérapie cellulaire Th2 résistante à la rapamycine dans le cadre d'un HCT allogénique de faible intensité, le transfert adoptif de cellules Th2 était sûr et associé à un changement vers la polarisation Th2 in vivo, la préservation de la greffe du donneur, la stabilisation du chimérisme mixte , un faible taux de GVHD et de puissants effets antitumoraux chez les patients atteints d'une hémopathie maligne réfractaire. Collectivement, ces résultats d'essais cliniques indiquent que le transfert adoptif des populations de type TREG et Th2 peut être administré en toute sécurité, même dans le cadre du HCT allogénique, et peut induire une modulation bénéfique des conditions inflammatoires.

La fabrication ex vivo peut être utilisée pour générer des cellules (i) TREG induites à partir du pool post-thymique de cellules T périphériques. Dans le protocole actuel, la méthode de fabrication se concentrera sur l'inhibition de mTOR, qui est une intervention établie qui favorise l'induction de cellules TREG. En combinaison avec l'inhibition de mTOR, le système de culture utilisé incorpore des cytokines qui favorisent à la fois un phénotype Th2 et un TREG, à savoir IL-4, TGF-bêta et IL-2. Enfin, le protocole comprendra un produit de cellules TREG/Th2 composé à la fois de sous-ensembles de cellules T CD4+ et CD8+, car ces sous-ensembles de cellules T contre-régulatrices expriment des répertoires différentiels de récepteurs de cellules T (TCR) et une diversité de mécanismes effecteurs qui peuvent potentiellement améliorer un effet anti-inflammatoire. Pour la fabrication de RAPA-501, les cellules mononucléaires du sang périphérique sont collectées à partir d'une aphérèse à l'état d'équilibre et soumises à l'intervention de culture en deux étapes suivante : à l'étape 1, une étape de famine sévère entraîne une dédifférenciation des cellules T, qui est réalisée à la fois par l'utilisation sélective des médias et l'ajout d'agents pharmaceutiques approuvés par la FDA qui inhibent puissamment la signalisation mTOR ; et à l'étape 2, la redifférenciation des lymphocytes T se produit à l'aide d'agents de co-stimulation et de cytokines polarisantes de type Th2 et TREG. Après 6 jours de culture, la population TREG/Th2 résultante est cryoconservée dans des aliquotes à usage unique à des doses thérapeutiques basées sur le protocole. Les cellules T de phénotype cytokine de type II sont caractérisées en partie par leur expression du facteur de transcription GATA3 tandis que les populations de cellules T régulatrices sont identifiées en partie par leur expression du facteur de transcription FOXP3. Au début de la culture, une très faible fréquence de lymphocytes T exprime GATA3 ou FOXP3. En revanche, le produit cellulaire RAPA-501 fabriqué dans les conditions de culture TREG/Th2 exprime une fréquence élevée de lymphocytes T qui sont soit positifs simples pour GATA3, soit positifs simples pour FOXP3, soit doublement positifs pour GATA3 et FOXP3. Il est important de noter que ce profil de facteur de transcription est exprimé à la fois dans les lymphocytes T CD4+ et CD8+ fabriqués. Il est important de noter que les populations de lymphocytes T CD4+ et CD8+ avec fonction TREG ont été définies, y compris une population TREG CD8+ qui supprime puissamment la GVHD ; il est potentiellement avantageux d'avoir les deux sous-ensembles représentés dans un produit thérapeutique parce que les cellules TREG CD4+ et CD8+ utilisent des mécanismes effecteurs différentiels.

Les populations de cellules T régulatrices peuvent supprimer les populations de cellules T effectrices pathogènes par plusieurs mécanismes définis, notamment par l'expression de molécules d'ectonucléotidase CD39 et CD73, qui agissent pour hydrolyser l'ATP pro-inflammatoire vers le substrat d'adénosine immunosuppresseur . En effet, les cellules TREG qui expriment CD39 possèdent une fonction suppressive accrue et ont été associées à la résolution des maladies inflammatoires de l'intestin. De plus, la fonction suppressive des cellules TREG humaines est médiée en partie par CD73. Les lymphocytes T fabriqués dans la condition de culture TREG/Th2 ont une augmentation de l'expression des molécules effectrices associées au TREG, CD39 et CD73. En plus des ectonucléotidases CD39/CD73, la fonction des cellules TREG a également été corrélée à l'expression de CD103, qui est une intégrine qui dicte la localisation des lymphocytes épithéliaux. En effet, la signalisation des récepteurs CD103 et IL-2 coopère pour maintenir la tolérance immunitaire dans la muqueuse intestinale ; en outre, les cellules TREG exprimant CD103 sont essentielles pour l'amélioration de la GVHD chronique expérimentale. Les lymphocytes T fabriqués dans les conditions de culture TREG/Th2 ont une expression accrue de la molécule effectrice TREG CD103.

Dans les modèles expérimentaux, l'efficacité de la thérapie cellulaire adoptive dépend de la réussite de la greffe et de la persistance des cellules T in vivo. Il est important de noter que l'état de différenciation des lymphocytes T aide à dicter la persistance in vivo, les cellules moins différenciées ayant une persistance accrue. Les lymphocytes T murins résistants à la rapamycine, qui exprimaient un phénotype de mémoire centrale T (TCM), avaient un potentiel de prise de greffe in vivo accru par rapport aux lymphocytes T témoins. En outre, les lymphocytes T humains résistants à la rapamycine présentaient également une prise de greffe accrue dans un modèle humain-murin de la maladie xénogénique du greffon contre l'hôte. Les cellules T avec une différenciation réduite par rapport à la population de mémoire effectrice T (TEM) ont une persistance in vivo accrue et induisent des effets in vivo accrus, y compris le sous-ensemble TCM, le sous-ensemble de cellules T naïves et, plus récemment, la mémoire des cellules souches T (TSCM) sous-ensemble. Cette relation entre l'état de différenciation des lymphocytes T et la fonction des lymphocytes T in vivo est pertinente pour les cellules TREG, car : (1) les cellules TREG de phénotype TCM étaient plus efficaces pour réduire la GVHD expérimentale par rapport aux cellules TREG de phénotype TEM ; et (2) les cellules TREG qui exprimaient le marqueur de cellules souches CD150 étaient très efficaces pour la prévention du rejet de greffe de cellules souches. Les lymphocytes T fabriqués dans la condition de culture TREG/Th2 sont enrichis en cellules ayant un état de différenciation réduit compatible avec un sous-ensemble de cellules souches T, y compris l'expression du marqueur CD150.

Il est également important d'évaluer le profil de sécrétion de cytokines des cellules RAPA-501 fabriquées. Tout d'abord, il est essentiel que le produit cellulaire soit capable de sécréter de l'IL-4, qui est la cytokine pilote de la différenciation Th2 ultérieure. Deuxièmement, il est souhaitable qu'une population de lymphocytes T transférée de manière adoptive soit capable de sécréter de l'IL-2, car cette capacité indique une fonction progénitrice qui permet aux lymphocytes T de se développer plus facilement in vivo sans avoir besoin d'IL-2 exogène. Enfin, il est important que la population de cellules RAPA-501 ait réduit la sécrétion des cytokines de type Th1 ou Th17 IFN-gamma, TNF-alpha, IL-17 et GM-CSF. Le produit cellulaire RAPA-501 fabriqué sécrète IL-4 et IL-2 avec une sécrétion minimale de cytokines de type Th1 ou Th17.

Les cellules T régulatrices peuvent également être définies en partie par leur capacité à supprimer la prolifération ou la fonction des cellules T effectrices. Il est important de noter que les cellules TREG/Th2 fabriquées suppriment puissamment la sécrétion des cellules Th1/Tc1 de plusieurs cytokines inflammatoires, notamment l'IFN-gamma, le GM-CSF et le TNF-alpha. Pour évaluer le mécanisme de suppression, des expériences ont été réalisées à l'aide du test transwell, dans lequel les lymphocytes T effecteurs et les cellules RAPA-501 sont séparés par un filtre qui empêche le contact cellule à cellule mais permet la communication cellulaire par de petits médiateurs solubles tels que les cytokines. Les cellules RAPA-501 ont agi de manière indépendante du TCR pour supprimer la capacité de sécrétion de cytokines des lymphocytes T effecteurs. Étant donné qu'aucune co-stimulation n'a été fournie à la chambre transwell contenant des cellules RAPA-501, les cellules RAPA-501 n'ont pas nécessité de co-stimulation pour moduler les niveaux de cytokines inflammatoires, y compris IL-2, IFN-gamma, GM-CSF et TNF-alpha . Les cytokines et chimiokines suivantes ont été réduites par les cellules RAPA-501 dans ce test transwell, avec une suppression relativement égale médiée par les sous-ensembles CD4+ et CD8+ des cellules RAPA-501 : CCL1, CCL2, CCL7, CCL11, CCL13, CCL17, CCL20, CCL22, CCL26 , CXCL1, CXCL10, CXCL11, CXCL12, IL-6, IFN-gamma, GM-CSF et IL-10. La capacité des cellules TREG à consommer de l'IL-2 est un phénomène couramment décrit, bien que des études antérieures aient identifié la nécessité d'un contact de cellule à cellule pour la consommation d'IL-2. En tant que telles, les cellules RAPA-501 sont uniquement capables de moduler le niveau de plusieurs cytokines inflammatoires d'une manière indépendante du contact. Ces résultats suggèrent que les cellules RAPA-501 représentent un candidat approprié pour la neutralisation de plusieurs cytokines et chimiokines associées à diverses maladies, y compris l'inflammation pulmonaire d'origine virale. À la lumière de cette capacité du produit cellulaire RAPA-501 à supprimer l'inflammation médiée par les lymphocytes T de manière indépendante du TCR, la thérapie RAPA-501 convient parfaitement aux applications de traitement allogéniques prêtes à l'emploi.

D'autres expériences ont été réalisées pour évaluer si le produit cellulaire RAPA-501 pourrait également réguler les cellules microgliales du SNC humain, qui sont des cellules dérivées de myéloïdes analogues à la population de monocytes périphériques. Pour évaluer si le produit cellulaire RAPA-501 pourrait moduler les cellules microgliales pro-inflammatoires d'une manière indépendante du contact, la capacité des cellules RAPA-501 à réduire l'état inflammatoire de la lignée cellulaire microgliale HMC3 a été testée dans un test transwell. Les cellules RAPA-501 ont réduit la sécrétion des cellules HMC3 des cytokines pro-inflammatoires IL-6 et IFN-gamma et de la chimiokine pro-inflammatoire IP-10 au rapport relativement faible des cellules RAPA-501 aux cellules microgliales de 1:40. Ces résultats démontrent que le produit RAPA-501 est capable d'inhiber la sécrétion de cytokines et de chimiokines à partir de populations dérivées de myéloïdes d'une manière indépendante du contact et du TCR, fournissant ainsi une justification supplémentaire pour l'utilisation allogénique et prête à l'emploi du RAPA- 501 produit.

Le produit cellulaire RAPA-501 pour la stabilité du phénotype des lymphocytes T a également été évalué. Autrement dit, il a été déterminé qu'un facteur limitant de la thérapie cellulaire TREG peut être la plasticité de la différenciation, par exemple, les cellules TREG pouvant être influencées par des cytokines inflammatoires pour perdre leurs caractéristiques TREG et adopter un état inflammatoire de type Th1, qui peut alors favoriser pathogenèse de la maladie. Pour répondre à cette possibilité, la capacité des cellules RAPA-501 à moduler les facteurs de transcription de différenciation des lymphocytes T après un intervalle de culture prolongé impliquant la co-stimulation des lymphocytes T, l'absence d'inhibiteurs de mTOR et la présence des cytokines inflammatoires polarisantes IFN-alpha et IL -6 a été étudié. Ces expériences ont démontré que le produit cellulaire RAPA-501 avait une stabilité de différenciation remarquable (expression continue de FOXP3 et GATA3 dans les sous-ensembles CD4+ et CD8+ ; absence de régulation à la hausse de TBET).

En résumé, les cellules RAPA-501 expriment un phénotype compatible avec une population de lymphocytes T régulateurs, comprenant : une expression stable des facteurs de transcription TREG et Th2 FOXP3 et GATA3 ; expression des molécules fonctionnelles TREG CD39, CD73 et CD103 ; l'expression d'un état réduit de différenciation des lymphocytes T, y compris l'expression du marqueur de cellules souches CD150 ; sécrétion d'un motif Th2 de cytokines avec sécrétion minimale de cytokines de type Th1/Th17 ; capacité de suppression fonctionnelle contre les cellules effectrices Th1/Tc1 et les cellules myéloïdes pro-inflammatoires, y compris des niveaux réduits de multiples cytokines et chimiokines inflammatoires ; et une capacité à inhiber les effecteurs inflammatoires de manière indépendante du contact et du TCR. Collectivement, ces caractéristiques du produit RAPA-501 prédisent que cette thérapie représente un candidat nouveau et prometteur pour traiter le SDRA lié au COVID-19.

Il s'agit d'une première étude humaine de phase 1/phase 2b évaluant la thérapie cellulaire allogénique RAPA-501 chez des participants atteints de SDRA lié au COVID-19. Deux cohortes de phase 1 seront évaluées, à savoir une cohorte 1 à faible dose (40 x 10^6 cellules/perfusion) et une cohorte 2 à forte dose (160 x 10^6 cellules/perfusion) ; ce composant de phase 1 utilisera la toxicité limitant la dose (DLT) comme critère d'évaluation principal. À condition que l'innocuité soit démontrée dans le volet de l'étude de phase 1, chaque cohorte de doses de RAPA-501 peut être évaluée dans le volet de phase 2b randomisé. Dans le volet de phase 2b, pour chaque niveau de dose de RAPA-501 déterminé comme sûr, les patients seront randomisés pour recevoir des cellules RAPA-501 (n = 19) ou un placebo (n = 19). Après la perfusion de cellules RAPA-501 ou d'un placebo, ces cohortes randomisées poursuivront le traitement standard (non basé sur le protocole). Le critère d'évaluation principal de l'étude de phase 2b est la mortalité à 30 jours, avec l'objectif statistique de réduire la mortalité chez les receveurs de RAPA-501 par rapport à la cohorte randomisée et contrôlée par placebo.

Les participants à l'étude doivent être des patients hospitalisés atteints de SDRA lié au COVID-19, en particulier : une infection par le SRAS-CoV-2, telle que déterminée par RT-PCR ou un test équivalent ; infiltrat pulmonaire à l'examen radiologique ; et un diagnostic de SDRA nécessitant une assistance respiratoire intensive, y compris une ventilation non invasive telle qu'une canule nasale à haut débit ou une ventilation mécanique. L'étude consiste en : (1) une étape d'inscription à l'étude (dépistage) ; et (2) après confirmation de l'éligibilité, une perfusion de cellules RAPA-501 sera effectuée. Sur la cohorte 1, l'infusion de cellules RAPA-501 se fera à une dose de 40 x 10 ^ 6 cellules/infusion ; trois participants seront initialement traités, avec une semaine séparant les participants de cette composante de phase 1 pour évaluer la DLT, qui sera définie comme une toxicité de grade 3 ou supérieure attribuable aux cellules RAPA-501 dans les 7 jours suivant la perfusion. À tout moment où la thérapie de la cohorte 1 est jugée sûre (soit 0/3 ou 1/6 ayant un DLT), la thérapie RAPA-501 de la cohorte 1 peut être évaluée dans le composant de l'étude de phase 2b randomisée pour répondre à l'objectif principal de l'étude concernant à la mortalité à 30 jours. À tout moment où la thérapie de la cohorte 1 est jugée sûre, le traitement de la cohorte 2 peut être initié, ce qui évaluera la perfusion de cellules RAPA-501 à une dose de 160 x 10^6 cellules/perfusion. De la même manière que pour la cohorte 1, si la thérapie de la cohorte 2 est jugée sûre, la thérapie RAPA-501 de la cohorte 2 peut être évaluée dans la composante d'étude de phase 2b randomisée pour répondre à l'objectif principal de l'étude concernant la mortalité à 30 jours. L'étude comprendra trois étapes principales : (1) l'intervalle de 30 jours détaillé ci-dessus concernant les principaux objectifs de l'étude ; (2) un intervalle prolongé de 90 jours au total pour continuer la surveillance clinique relativement intensive des paramètres potentiels d'efficacité et d'innocuité ; et (3) un intervalle prolongé de 6 mois au total pour fournir un suivi clinique à long terme et continuer à surveiller les paramètres de laboratoire liés aux paramètres immunitaires et viraux.