РАПА-501-Алло Терапия COVID-19-ОРДС

Первый компонент исследования фазы 1 на людях будет оценивать два уровня доз готовых клеток RAPA-501-ALLO у пациентов с ОРДС, связанным с COVID-19, с ключевыми конечными точками безопасности, биологическими и потенциальными модифицирующими заболевание эффектами. Компонент рандомизированного, двойного слепого, плацебо-контролируемого исследования фазы 2b будет оценивать инфузию готовых клеток RAPA-501 ALLO или контрольную инфузию, при этом основной конечной точкой будет оценка того, снижают ли клетки RAPA-501 30-дневную смертность.

Пандемия COVID-19 — это катастрофа, сопровождающаяся прогрессирующей заболеваемостью и смертностью. По состоянию на 6 апреля 2021 года около 132,1 миллиона человек заразились вирусом, и 2 866 000 человек умерли во всем мире. В Соединенных Штатах самые высокие показатели: примерно 30,8 миллиона человек диагностированы и 556 000 человек умерли. В Соединенных Штатах самые высокие показатели: примерно 22,4 миллиона человек диагностированы и 375 000 человек умерли. На 1 и 2 стадиях COVID-19 преобладает распространение вируса внутри пациента. Таким образом, терапевтические вмешательства сосредоточены на иммунных молекулах (выздоравливающая сыворотка, моноклональные антитела) и противовирусных препаратах (ремдесивир). Напротив, самая тяжелая и смертельная форма COVID-19, стадия 3, обусловлена ​​не размножением вируса, а неконтролируемым иммунным ответом (гипервоспалением), вызванным увеличением количества иммунных молекул, известных как цитокины и хемокины. Таким образом, терапевтические вмешательства на стадии 3 заболевания сосредоточены на противовоспалительных препаратах, таких как антицитокиновая терапия (препараты против ИЛ-6) или терапия кортикостероидами. К сожалению, такие вмешательства не учитывают полный патогенез 3 стадии COVID-19, который включает гипервоспаление из-за «цитокинового шторма» и «хемокинового шторма», повреждение тканей, гиперкоагуляцию и полиорганную недостаточность (включая легочную, сердечную, почечную и мозг). Легочный компонент заболевания на стадии 3 включает острый респираторный дистресс-синдром (ОРДС), который является окончательным общим путем смерти пациентов из-за множества состояний, включая пневмонию, сепсис и травму. Существует острая потребность в новых клеточных методах лечения, которые могут обеспечить как широкий эффект иммуномодуляции, так и регенеративный эффект тканей, таких как готовые аллогенные гибридные клетки TREG/Th2 RAPA-501-ALLO.

Механизм фатальной пневмонии при экспериментальной мышиной коронавирусной инфекции опосредуется врожденной активацией воспалительных заболеваний, результирующей мощной инфильтрацией воспалительных моноцитов и макрофагов и последующим увеличением количества провоспалительных цитокинов и хемокинов. Важно отметить, что адаптивный ответ CD4+ и CD8+ Т-клеток на экспериментальную коронавирусную инфекцию может быть либо лечебным, либо распространяющим заболевание. Вирусное воспаление легких также было оценено на моделях приматов, отличных от человека, которые подтвердили, что нарушение регуляции иммунной активации во время вирусной пневмонии включает дисбаланс субпопуляции Т-клеток, нижестоящий воспалительный каскад, происходящий из моноцитов, и, как следствие, повреждение эпителиальных клеток. У людей тяжесть вирусной инфекции нижних дыхательных путей коррелирует с увеличением количества эффекторных клеток памяти CD8+ Т-клеток в дыхательных путях. Как недавно было рассмотрено, коронавирусная инфекция человека представляет собой непрекращающуюся битву между вирусом и хозяином, при этом характер реакции диктует излечение болезни или, альтернативно, обострение болезни легких. Имеются доказательства того, что адаптивная иммунная система способствует воспалению легких во время SARS-ассоциированного коронавируса (SARS-CoV): то есть в бронхоальвеолярной жидкости таких субъектов было увеличено количество Т-клеток и увеличено количество Th1-ассоциированных молекул IL-12, IFN-gamma, и ИП-10. Этот нижестоящий адаптивный воспалительный ответ, опосредованный Т-клетками, частично управляется белком SARS-Co-V виропорином 3a. В частности, молекулы виропорина активируют инфламмасому NLRP3, которая связывает врожденные и адаптивные воспалительные реакции. Кроме того, как SARS-CoV, так и SARS-CoV-2 экспрессируют молекулу ORF3a с открытой рамкой считывания, которая также активирует инфламмасому NLRP3.

Недавно сообщалось о характере иммунитета при разрешении симптоматической инфекции COVID-19, а именно: появление антител-секретирующих клеток и CD4+ Т-фолликулярных хелперных клеток; увеличение перфорин- и гранзим-экспрессирующих CD8+ Т-клеток; и относительное отсутствие увеличения провоспалительных цитокинов и хемокинов. Напротив, у пациентов с тяжелым течением COVID-19 значительно повысились уровни в плазме цитокинов (включая IL-2 и TNF-альфа) и хемокинов (включая IP-10 и MIP-1-альфа) (Huang et al., Lancet, 2020). В совокупности эти результаты показывают, что провоспалительные реакции цитокинов и хемокинов, которые возникают при тяжелом течении COVID-19, вредны и что эффективные противовоспалительные подходы могут в конечном итоге оказаться терапевтическими. Однако, как было подробно описано ранее, более поздняя стадия 3 заболевания COVID-19 характеризуется компонентом ОРДС и цитокиновым штормом, поэтому новые подходы к лечению вирусной пневмонии COVID-19 должны оптимально включать как противовоспалительный элемент, так и элемент защиты/восстановления тканей.

По оценкам, на стадии 3 COVID-19 30-дневная смертность составляет более 50%, несмотря на использование отделений интенсивной терапии, искусственную вентиляцию легких и поддерживающую терапию для лечения ОРДС и полиорганной недостаточности. Узкодействующие таргетные противовоспалительные подходы, такие как терапевтические средства против ИЛ-6, не были особенно эффективны на стадии 3 COVID-19, а широкий противовоспалительный фармацевтический подход кортикостероидной терапии в некоторых исследованиях лишь умеренно сдерживал заболевание на стадии 3. Клеточная терапия также оценивается на стадии 3 COVID-19, в частности, мезенхимальные стромальные клетки (МСК), а теперь, с текущим протоколом RAPA-501-ALLO, регуляторные Т-клетки (TREG). TREG-терапия имеет механизм действия, который включает многогранный противовоспалительный эффект, что ставит TREG на передний план будущей лечебной терапии широкого спектра аутоиммунных и нейродегенеративных заболеваний, а также осложнений трансплантации, таких как реакция «трансплантат против хозяина». болезнь (РТПХ) и отторжение трансплантата. Кроме того, TREG-терапия может обеспечить регенеративный эффект тканей, что ставит TREG-клеточную терапию во главе новых усилий регенеративной медицины по лечению множества тканевых заболеваний, таких как заболевания кожи, мышц, легких, печени, кишечника, сердца (инфаркт миокарда) и головного мозга (инсульт). Стандартная клеточная терапия RAPA-501-ALLO предлагает этот потенциальный механизм действия с двойной угрозой, который включает как противовоспалительный эффект, так и эффект восстановления тканей для эффективного лечения COVID-19 и множественных летальных состояний.

Клетки RAPA-501-ALLO получают от здоровых добровольцев, криоконсервируют, хранят в банках, а затем в любое время они доступны для готовой терапии. Во время производства Т-клетки «перепрограммируются» ex vivo с использованием нового запатентованного 7-дневного двухэтапного процесса, который включает дедифференцировку Т-клеток и последующую редифференцировку в сторону двух ключевых противовоспалительных программ, путей TREG и Th2. таким образом создавая «гибридный» продукт. Гибридный фенотип ингибирует воспалительные пути, действующие при COVID-19, включая модуляцию множества цитокинов и хемокинов, которые привлекают воспалительные клетки в ткани для инициации полиорганного повреждения. Гибридный фенотип TREG и Th2 клеток RAPA-501-ALLO перекрестно регулирует популяции Th1 и Th17, которые инициируют гипервоспаление COVID-19. Иммуномодуляция RAPA-501 происходит независимым от Т-клеточных рецепторов образом, что позволяет проводить готовую клеточную терапию. Наконец, в экспериментальных моделях вирусной пневмонии и ОРДС клетки TREG опосредуют защитное действие на альвеолярную ткань легких. Из-за этого уникального механизма действия, который включает как противовоспалительное, так и тканезащитное действие, аллогенный продукт Т-клеток RAPA-501 особенно подходит для оценки в условиях 3-й стадии ОРДС, связанного с COVID-19.

В целом, классическое аутоиммунное заболевание, нейродегенеративное заболевание и вызванное вирусом воспалительное заболевание обусловлено преобладанием ответов типа Th1/Th17 с относительной недостаточностью контррегуляторных иммуносупрессивных субпопуляций Th2 и TREG. Клетки TREG, которые частично определяются их экспрессией транскрипционного фактора FOXP3, были тщательно изучены в экспериментальных моделях на предмет их способности модулировать аутоиммунные заболевания, нейродегенеративные заболевания и осложнения трансплантации, включая реакцию «трансплантат против хозяина» (РТПХ) и трансплантат. отказ. Важно отметить, что продукция Т-клетками ИЛ-2 или введение экзогенного ИЛ-2 вызывает воспаление легких во время экспериментальной вирусной инфекции; поэтому, учитывая известную роль клеток TREG как потребителей IL-2, существует сильное механистическое обоснование полезного вклада клеток TREG во время вирусного воспаления легких. Кроме того, в экспериментальных мышиных моделях вызванного вирусом воспаления легких и повреждения легких вмешательства, которые увеличивали количество и функцию клеток TREG, ускоряли восстановление повреждения легких. И клетки Th2, которые частично определяются их экспрессией фактора транскрипции GATA3, были описаны тридцать лет назад как мощная контррегуляторная популяция для предотвращения преобладания клеток Th1. Важно отметить, что клинические данные указывают на то, что маневры, которые увеличивают популяции иммуносупрессивных клеток, включая клетки TREG, могут уменьшить тяжелое воспалительное заболевание, такое как реакция «трансплантат против хозяина», без нарушения противовирусного иммунитета. Кроме того, как в экспериментальных моделях, так и в клинических исследованиях соответствующий уровень клеток TREG может привести к общему уменьшению воспаления легких при вирусном бронхиолите. В совокупности эти результаты указывают на то, что Т-клетки, экспрессирующие комбинированный фенотип TREG/Th2, предсказуемо будут оказывать благотворное воздействие в условиях вызванного вирусом воспаления легких и повреждения, связанного с тяжелой 3-й стадией заболевания COVID-19.

В клинических испытаниях оценивали клетки как TREG, так и Th2-типа при различных состояниях, в первую очередь при осложнениях трансплантации. В целом считается, что естественные (n)TREG-клетки, полученные из тимуса, экспрессируют более стабильный фенотип, чем посттимус-индуцированные (i)TREG-клетки; для сравнения, клетки iTREG могут опосредовать более сильное подавление. Тем не менее клетки как nTREG, так и iTREG восприимчивы к пластичности дифференцировки, что вызывает опасения, что потенциально терапевтическая популяция TREG может преобразоваться в патогенные фенотипы Th1/Th17 in vivo. Размноженные ex vivo (n)TREG-клетки оценивали в условиях аллогенной трансплантации гемопоэтических клеток (HCT) с использованием доноров пуповинной крови; совсем недавно та же исследовательская группа разработала клеточную терапию (i)TREG, расширенную ex vivo, для ограничения осложнений трансплантации. Кроме того, клетки nTREG, размноженные ex vivo, были оценены в условиях сахарного диабета I типа; это клиническое испытание показало, что терапия TREG безопасна и, по крайней мере, кратковременно эффективна в улучшении контроля над заболеванием. Кроме того, в условиях бокового амиотрофического склероза (БАС), который представляет собой заболевание, размножающееся в результате тяжелой Th1-зависимой периферической и центральной воспалительной реакции, клиническое испытание адоптивного переноса клеток nTREG показало, что вмешательство было безопасным и многообещающим с точки зрения эффективности. Улучшение состояния при БАС. Наконец, в исследовании фазы II терапии устойчивых к рапамицину клеток Th2 в условиях низкоинтенсивной аллогенной HCT адоптивный перенос клеток Th2 был безопасным и был связан со сдвигом в сторону поляризации Th2 in vivo, сохранением донорского приживления, стабилизацией смешанного химеризма. , низкий уровень РТПХ и мощные противоопухолевые эффекты у пациентов с рефрактерными гематологическими злокачественными новообразованиями. В совокупности эти результаты клинических испытаний показывают, что адоптивный перенос популяций TREG и Th2-типа можно безопасно вводить даже в условиях аллогенной HCT и может способствовать благотворной модуляции воспалительных состояний.

Производство ex vivo можно использовать для получения индуцированных (i)TREG-клеток из посттимусного пула периферических Т-клеток. В текущем протоколе производственный метод будет сосредоточен на ингибировании mTOR, что является установленным вмешательством, которое способствует индукции клеток TREG. В сочетании с ингибированием mTOR используемая система культивирования включает цитокины, которые способствуют фенотипу как Th2, так и TREG, а именно IL-4, TGF-бета и IL-2. Наконец, протокол будет включать клеточный продукт TREG/Th2, состоящий из субпопуляций CD4+ и CD8+ Т-клеток, поскольку эти контррегуляторные субпопуляции Т-клеток экспрессируют репертуары дифференциальных Т-клеточных рецепторов (TCR) и разнообразные эффекторные механизмы, которые потенциально могут усиливать противовоспалительный эффект. Для производства RAPA-501 мононуклеарные клетки периферической крови собирают из стационарного афереза ​​и подвергают следующему двухэтапному культуральному вмешательству: на этапе 1 этап сильного голодания приводит к дедифференцировке Т-клеток, которая реализуется как селективное использование сред и добавление одобренных FDA фармацевтических агентов, которые сильно ингибируют передачу сигналов mTOR; и на этапе 2 происходит повторная дифференцировка Т-клеток с использованием костимулирующих агентов и поляризующих цитокинов Th2- и TREG-типа. После 6-дневного культивирования полученную популяцию TREG/Th2 криоконсервируют в одноразовых аликвотах в терапевтических дозах, определяемых протоколом. Т-клетки цитокинового фенотипа типа II частично характеризуются экспрессией фактора транскрипции GATA3, тогда как популяции регуляторных Т-клеток частично идентифицируются по экспрессии фактора транскрипции FOXP3. В начале культивирования очень низкая частота экспрессии Т-клеток либо GATA3, либо FOXP3. Напротив, клеточный продукт RAPA-501, полученный в условиях культивирования TREG/Th2, экспрессирует высокую частоту Т-клеток, которые являются либо однократно положительными по GATA3, либо однократно положительными по FOXP3, либо дважды положительными как по GATA3, так и по FOXP3. Важно отметить, что этот профиль фактора транскрипции экспрессируется как в произведенных CD4+, так и в CD8+ Т-клетках. Важно отметить, что были определены популяции как CD4+, так и CD8+ Т-клеток с функцией TREG, включая популяцию CD8+ TREG, которая сильно подавляет РТПХ; потенциально выгодно иметь обе подгруппы, представленные в терапевтическом продукте, потому что клетки CD4+ и CD8+ TREG используют различные эффекторные механизмы.

Популяции регуляторных Т-клеток могут подавлять популяции патогенных эффекторных Т-клеток несколькими определенными механизмами, в том числе посредством экспрессии молекул эктонуклеотидазы CD39 и CD73, которые гидролизуют провоспалительный АТФ в сторону иммуносупрессивного аденозинового субстрата. Действительно, клетки TREG, которые экспрессируют CD39, обладают повышенной супрессорной функцией и связаны с разрешением воспалительного заболевания кишечника. Кроме того, супрессивная функция клеток TREG человека частично опосредуется CD73. Т-клетки, полученные в условиях культуры TREG/Th2, имеют повышенную экспрессию связанных с TREG эффекторных молекул, CD39 и CD73. Помимо эктонуклеотидаз CD39/CD73, функция клеток TREG также коррелирует с экспрессией CD103, который представляет собой интегрин, определяющий локализацию эпителиальных лимфоцитов. Действительно, передача сигналов CD103 и рецептора IL-2 взаимодействует для поддержания иммунной толерантности в слизистой оболочке кишечника; кроме того, клетки TREG, экспрессирующие CD103, имеют решающее значение для облегчения экспериментальной хронической РТПХ. Т-клетки, полученные в условиях культуры TREG/Th2, имеют повышенную экспрессию эффекторной молекулы TREG CD103.

В экспериментальных моделях эффективность адоптивной Т-клеточной терапии зависит от успешного приживления и персистенции Т-клеток in vivo. Важно отметить, что состояние дифференцировки Т-клеток помогает определять персистенцию in vivo, при этом менее дифференцированные клетки имеют повышенную персистенцию. Мышиные устойчивые к рапамицину Т-клетки, которые экспрессировали фенотип Т-центральной памяти (TCM), имели повышенный потенциал приживления трансплантата in vivo по сравнению с контрольными Т-клетками. Кроме того, устойчивые к рапамицину Т-клетки человека также имели повышенное приживление в модели ксеногенной реакции «трансплантат против хозяина» «человек-мышь». Т-клетки со сниженной дифференцировкой по сравнению с популяцией Т-эффекторной памяти (TEM) имеют повышенную персистенцию in vivo и опосредуют усиление эффектов in vivo, включая подмножество TCM, подмножество наивных Т-клеток и, совсем недавно, память Т-стволовых клеток (TSCM) подмножество. Эта взаимосвязь между статусом дифференцировки Т-клеток и функцией Т-клеток in vivo имеет отношение к клеткам TREG, поскольку: (1) клетки TREG фенотипа TCM были более эффективны в снижении экспериментальной РТПХ по сравнению с клетками TREG фенотипа TEM; и (2) клетки TREG, которые экспрессировали маркер стволовых клеток CD150, были высокоэффективны для предотвращения отторжения трансплантата стволовых клеток. Т-клетки, полученные в условиях культуры TREG/Th2, обогащены клетками, имеющими состояние пониженной дифференцировки, соответствующее субпопуляции Т-стволовых клеток, включая экспрессию маркера CD150.

Также важно оценить профиль секреции цитокинов изготовленных клеток RAPA-501. Во-первых, очень важно, чтобы клеточный продукт был способен к секреции IL-4, который является драйвером цитокина для последующей дифференцировки Th2. Во-вторых, желательно, чтобы популяция адоптивно перенесенных Т-клеток была способна секретировать IL-2, поскольку эта способность указывает на функцию предшественников, которая позволяет Т-клеткам легче размножаться in vivo без необходимости экзогенного IL-2. Наконец, важно, что клеточная популяция RAPA-501 имеет пониженную секрецию цитокинов Th1- или Th17-типа IFN-гамма, TNF-альфа, IL-17 и GM-CSF. Изготовленный клеточный продукт RAPA-501 секретирует IL-4 и IL-2 с минимальной секрецией цитокинов Th1- или Th17-типа.

Регуляторные Т-клетки также можно частично определить по их способности подавлять пролиферацию или функцию эффекторных Т-клеток. Важно отметить, что произведенные клетки TREG/Th2 сильно подавляют секрецию клетками Th1/Tc1 множества воспалительных цитокинов, включая IFN-гамма, GM-CSF и TNF-альфа. Чтобы оценить механизм супрессии, были проведены эксперименты с использованием трансвелл-анализа, при котором эффекторные Т-клетки и клетки RAPA-501 разделяются фильтром, который предотвращает межклеточный контакт, но позволяет клеткам общаться с помощью небольших растворимых медиаторов, таких как цитокины. Клетки RAPA-501 действовали независимым от TCR образом, подавляя способность эффекторных Т-клеток к секреции цитокинов. Поскольку костимуляция камеры Transwell, содержащей клетки RAPA-501, не проводилась, клетки RAPA-501 не нуждались в костимуляции для модуляции уровней воспалительных цитокинов, включая IL-2, IFN-гамма, GM-CSF и TNF-альфа. . Следующие цитокины и хемокины были снижены клетками RAPA-501 в этом трансвелл-анализе с относительно равным подавлением, опосредованным субпопуляциями CD4+ и CD8+ клеток RAPA-501: CCL1, CCL2, CCL7, CCL11, CCL13, CCL17, CCL20, CCL22, CCL26. , CXCL1, CXCL10, CXCL11, CXCL12, IL-6, IFN-gamma, GM-CSF и IL-10. Способность клеток TREG потреблять IL-2 является обычно описываемым явлением, хотя предыдущие исследования выявили необходимость межклеточного контакта для потребления IL-2. Таким образом, клетки RAPA-501 обладают уникальной способностью модулировать уровень множества воспалительных цитокинов контактно-независимым образом. Эти результаты свидетельствуют о том, что клетки RAPA-501 представляют собой подходящего кандидата для нейтрализации множества цитокинов и хемокинов, связанных с различными заболеваниями, включая вызванное вирусом воспаление легких. В свете этой способности клеточного продукта RAPA-501 подавлять воспаление, опосредованное Т-клетками, независимым от TCR образом, терапия RAPA-501 очень подходит для аллогенных готовых лечебных применений.

Дальнейшие эксперименты были проведены для оценки того, может ли клеточный продукт RAPA-501 также регулировать клетки микроглии ЦНС человека, которые представляют собой клетки миелоидного происхождения, аналогичные популяции периферических моноцитов. Чтобы оценить, может ли клеточный продукт RAPA-501 модулировать провоспалительные клетки микроглии контактно-независимым образом, способность клеток RAPA-501 снижать воспалительное состояние линии клеток микроглии HMC3 тестировали в анализе трансвелл. Клетки RAPA-501 снижали секрецию клетками HMC3 провоспалительных цитокинов IL-6 и IFN-gamma и провоспалительного хемокина IP-10 при относительно низком соотношении клеток RAPA-501 и клеток микроглии 1:40. Эти результаты демонстрируют, что продукт RAPA-501 способен ингибировать секрецию цитокинов и хемокинов из миелоидных популяций контактно- и TCR-независимым образом, тем самым обеспечивая дополнительное обоснование аллогенного, готового использования RAPA- 501 товар.

Также оценивали клеточный продукт RAPA-501 на стабильность фенотипа Т-клеток. То есть было определено, что ограничивающим фактором клеточной терапии TREG может быть пластичность дифференцировки, например, посредством чего воспалительные цитокины могут влиять на клетки TREG, чтобы они потеряли свои характеристики TREG и приняли воспалительное состояние Th1-типа, которое затем может способствовать патогенез заболевания. Чтобы учесть эту возможность, способность клеток RAPA-501 модулировать факторы транскрипции дифференцировки Т-клеток после длительного периода культивирования, включающего костимуляцию Т-клеток, отсутствие ингибиторов mTOR и присутствие поляризующих воспалительных цитокинов IFN-альфа и IL -6 изучалось. Эти эксперименты продемонстрировали, что клеточный продукт RAPA-501 обладал замечательной стабильностью дифференцировки (продолжающаяся экспрессия FOXP3 и GATA3 в субпопуляциях CD4+ и CD8+; отсутствие повышающей регуляции TBET).

Таким образом, клетки RAPA-501 экспрессируют фенотип, соответствующий популяции регуляторных Т-клеток, включая: стабильную экспрессию транскрипционных факторов TREG и Th2 FOXP3 и GATA3; экспрессия функциональных молекул TREG CD39, CD73 и CD103; экспрессия сниженного состояния дифференцировки Т-клеток, включая экспрессию маркера стволовых клеток CD150; секреция цитокинов типа Th2 с минимальной секрецией цитокинов типа Th1/Th17; функциональная супрессивная способность как против эффекторных клеток Th1/Tc1, так и против провоспалительных миелоидных клеток, включая снижение уровней множественных воспалительных цитокинов и хемокинов; и способность ингибировать воспалительные эффекторы контактно- и TCR-независимым образом. В совокупности эти характеристики продукта RAPA-501 предсказывают, что эта терапия представляет собой новый и многообещающий кандидат для лечения ОРДС, связанного с COVID-19.

Это первое исследование фазы 1/фазы 2b на людях, в котором оценивается терапия аллогенными клетками RAPA-501 у участников с ОРДС, связанным с COVID-19. Будут оцениваться две когорты фазы 1, а именно, когорта 1 с низкой дозой (40 x 10 ^ 6 клеток / инфузия) и когорта 2 с высокой дозой (160 x 10 ^ 6 клеток / инфузия); этот компонент фазы 1 будет использовать дозолимитирующую токсичность (DLT) в качестве основной конечной точки. При условии, что безопасность продемонстрирована в рамках фазы 1 исследования, каждая когорта доз RAPA-501 может быть оценена в рандомизированной фазе 2b. В компоненте фазы 2b для каждого уровня дозы RAPA-501, признанного безопасным, пациенты будут рандомизированы для получения клеток RAPA-501 (n=19) или плацебо (n=19). После инфузии либо клеток RAPA-501, либо плацебо эти рандомизированные когорты будут продолжать стандартную терапию (не на основе протокола). Первичной конечной точкой исследования фазы 2b является 30-дневная смертность со статистической целью снижения смертности у реципиентов RAPA-501 по сравнению с рандомизированной плацебо-контрольной когортой.

Участники исследования должны быть госпитализированы с ОРДС, связанным с COVID-19, в частности: инфекция SARS-CoV-2, определенная с помощью ОТ-ПЦР или эквивалентного теста; легочный инфильтрат при рентгенологическом исследовании; и диагноз ОРДС, требующий интенсивной респираторной поддержки, включая неинвазивную вентиляцию, такую ​​как высокопоточная назальная канюля или механическая вентиляция. Исследование состоит из: (1) этапа включения в исследование (скрининг); и (2) после подтверждения соответствия будет проведена инфузия клеток RAPA-501. В когорте 1 инфузия клеток RAPA-501 будет проводиться в дозе 40 x 10^6 клеток/инфузию; трое участников будут первоначально получать лечение, при этом участники этого компонента фазы 1 будут разделены на одну неделю для оценки DLT, который будет определяться как токсичность 3 степени или выше, относящаяся к клеткам RAPA-501 в течение 7 дней после инфузии. В любой момент, когда терапия когорты 1 считается безопасной (либо 0/3, либо 1/6 пациентов с DLT), терапия RAPA-501 когорты 1 может быть оценена в компоненте рандомизированного исследования фазы 2b для решения основной задачи исследования, касающейся до 30-дневной летальности. В любой момент, когда терапия когорты 1 считается безопасной, можно начать лечение когорты 2, которое будет оценивать инфузию клеток RAPA-501 в дозе 160 x 10^6 клеток/инфузию. Так же, как и в когорте 1, если терапия в когорте 2 считается безопасной, терапия RAPA-501 в когорте 2 может быть оценена в компоненте рандомизированного исследования фазы 2b для достижения основной цели исследования, связанной с 30-дневной смертностью. Исследование будет состоять из трех основных этапов: (1) описанный выше 30-дневный интервал, относящийся к основным целям исследования; (2) расширенный общий 90-дневный интервал для продолжения относительно интенсивного клинического мониторинга потенциальных конечных точек эффективности и безопасности; и (3) расширенный общий 6-месячный интервал для обеспечения долгосрочного клинического наблюдения и продолжения мониторинга лабораторных параметров, связанных с иммунными и вирусными конечными точками.