RAPA-501-Aloterapia de COVID-19-SDRA

El primer componente del estudio de Fase 1 en humanos evaluará dos niveles de dosis de células RAPA-501-ALLO listas para usar en pacientes con SDRA relacionado con COVID-19, con criterios de valoración clave de seguridad, efectos biológicos y potenciales modificadores de la enfermedad. El componente del estudio de fase 2b, aleatorizado, doble ciego y controlado con placebo evaluará la infusión de células RAPA-501 ALLO listas para usar o una infusión de control, con el criterio principal de valoración si las células RAPA-501 reducen la mortalidad a los 30 días.

La pandemia de COVID-19 es un desastre que se desarrolla con morbilidad y mortalidad progresivas. A partir del 6 de abril de 2021, se estima que 132,1 millones de personas han contraído el virus y se han producido 2 866 000 muertes en todo el mundo. Estados Unidos tiene los totales más altos con un estimado de 30,8 millones de personas diagnosticadas y 556.000 muertes. Estados Unidos tiene los totales más altos con un estimado de 22,4 millones de personas diagnosticadas y 375.000 muertes. En las etapas 1 y 2 de COVID-19, predomina la propagación viral dentro del paciente. Como tal, las intervenciones terapéuticas se centran en moléculas inmunitarias (suero convaleciente, anticuerpos monoclonales) y medicamentos antivirales (remdesivir). En marcado contraste, la forma más grave y mortal de COVID-19, la etapa 3, no es impulsada por la propagación viral, sino por una respuesta inmunitaria fuera de control (hiperinflamación) causada por aumentos en las moléculas inmunitarias conocidas como citocinas y quimiocinas. Como tal, las intervenciones terapéuticas para la enfermedad en estadio 3 se centran en medicamentos antiinflamatorios, como la terapia con anticitoquinas (medicamentos anti-IL-6) o la terapia con corticosteroides. Lamentablemente, tales intervenciones no abordan la patogenia completa de la etapa 3 de la COVID-19, que incluye la hiperinflamación debida a la "tormenta de citocinas" y la "tormenta de quimiocinas", el daño tisular, la hipercoagulación y la falla multiorgánica (incluidos los pulmones, el corazón, los riñones y los riñones). cerebro). El componente pulmonar de la enfermedad en etapa 3 incluye el síndrome de dificultad respiratoria aguda (SDRA), que es una vía común final de muerte del paciente debido a una gran variedad de afecciones, que incluyen neumonía, sepsis y traumatismo. Existe una gran necesidad de nuevos tratamientos celulares que puedan proporcionar tanto un efecto de modulación inmunitaria de base amplia como un efecto de regeneración tisular, como las células TREG/Th2 híbridas alogénicas listas para usar RAPA-501-ALLO.

El mecanismo de la neumonía fatal en la infección experimental por coronavirus murino está mediado por la activación innata del inflamasoma, una infiltración robusta resultante de monocitos y macrófagos inflamatorios y un aumento posterior de múltiples citocinas y quimiocinas proinflamatorias. Es importante destacar que la respuesta de las células T adaptativas CD4+ y CD8+ a la infección experimental por coronavirus puede ser curativa o propagadora de la enfermedad. La inflamación pulmonar inducida por virus también se ha evaluado en modelos de primates no humanos, que han confirmado que la activación inmunitaria desregulada durante la neumonía viral implica un desequilibrio del subconjunto de células T, una cascada inflamatoria derivada de monocitos aguas abajo y la lesión de células epiteliales resultante. En humanos, la gravedad de la infección del tracto respiratorio inferior inducida por virus se correlaciona con un mayor número de células T CD8+ de memoria efectoras en las vías respiratorias. Como se revisó recientemente, la infección por coronavirus humano representa una batalla continua entre el virus y el huésped, y la naturaleza de la respuesta dicta la cura de la enfermedad o, alternativamente, la enfermedad pulmonar agravada. Existe evidencia de que el sistema inmunitario adaptativo contribuye a la inflamación pulmonar durante la enfermedad por coronavirus asociada al SARS (SARS-CoV): es decir, el líquido broncoalveolar de dichos sujetos tenía un mayor número de células T y un aumento de las moléculas asociadas a Th1 IL-12, IFN-gamma, y IP-10. Esta respuesta inflamatoria mediada por células T adaptativas aguas abajo es impulsada en parte por la proteína viroporina 3a del SARS-Co-V. Específicamente, las moléculas de viroporina activan el inflamasoma NLRP3 que vincula las respuestas inflamatorias innatas con las adaptativas. Además, tanto el SARS-CoV como el SARS-CoV-2 expresan una molécula ORF3a de marco de lectura abierto, que también activa el inflamasoma NLRP3.

Recientemente se informó la naturaleza de la inmunidad durante la resolución de la infección sintomática por COVID-19, a saber: aparición de células secretoras de anticuerpos y células auxiliares foliculares T CD4+; aumento de células T CD8+ que expresan perforina y granzima; y falta relativa de un aumento de citocinas y quimiocinas proinflamatorias. En marcado contraste, los pacientes con enfermedad grave por COVID-19 tenían niveles plasmáticos muy elevados de citocinas (incluidas IL-2 y TNF-alfa) y quimiocinas (incluidas IP-10 y MIP-1-alfa) (Huang et al., Lancet, 2020). En conjunto, estos resultados indican que las respuestas de citoquinas y quimioquinas proinflamatorias que ocurren en casos graves de COVID-19 son perjudiciales y que los enfoques antiinflamatorios efectivos en última instancia pueden resultar terapéuticos. Sin embargo, como se detalló anteriormente, la enfermedad de COVID-19 en etapa 3 más avanzada se caracteriza por un componente de ARDS y una tormenta de citocinas, por lo que los enfoques novedosos para tratar la neumonía viral de COVID-19 deberían incorporar de manera óptima tanto un elemento antiinflamatorio como un elemento de protección/reparación de tejidos.

La etapa 3 de COVID-19 conlleva una mortalidad estimada a los 30 días de más del 50 %, a pesar de la utilización de la UCI, la ventilación mecánica y las terapias de atención de apoyo para controlar el SDRA y la falla multiorgánica. Los enfoques antiinflamatorios dirigidos de acción limitada, como las terapias anti-IL-6, no han sido particularmente efectivos en el estadio 3 de COVID-19 y el amplio enfoque farmacéutico antiinflamatorio de la terapia con corticosteroides solo ha atenuado modestamente la enfermedad en estadio 3 en algunos estudios. También se está evaluando la terapia celular en el estadio 3 de la COVID-19, en concreto, las células estromales mesenquimales (MSC) y ahora, con el actual protocolo RAPA-501-ALLO, las células T reguladoras (TREG). La terapia TREG tiene un mecanismo de acción que incluye un efecto antiinflamatorio multifacético, lo que coloca a la terapia TREG a la vanguardia de la futura terapia curativa de una amplia gama de enfermedades autoinmunes y neurodegenerativas, además de complicaciones de trasplante, como injerto contra huésped. (EICH) y rechazo del injerto. Además, la terapia TREG puede proporcionar un efecto regenerador de tejidos, lo que coloca a la terapia celular TREG a la cabeza de los nuevos esfuerzos de medicina regenerativa para reparar una miríada de enfermedades basadas en tejidos, como enfermedades de la piel, músculos, pulmones, hígado, intestino, corazón (infarto de miocardio) y cerebro (accidente cerebrovascular). La terapia celular comercial RAPA-501-ALLO ofrece este posible mecanismo de acción de doble amenaza que incorpora efectos antiinflamatorios y de reparación de tejidos para el tratamiento eficaz de COVID-19 y múltiples afecciones letales.

Las células RAPA-501-ALLO se generan a partir de voluntarios sanos, se crioconservan, se almacenan y luego están disponibles para terapia comercial en cualquier momento. Durante la fabricación, las células T se "reprograman" ex vivo utilizando un proceso novedoso y patentado de dos pasos de 7 días que implica la desdiferenciación de las células T y la posterior rediferenciación hacia los dos programas antiinflamatorios clave, las vías TREG y Th2. creando así un producto "híbrido". El fenotipo híbrido inhibe las vías inflamatorias operativas en COVID-19, incluida la modulación de múltiples citocinas y quimiocinas, que atraen células inflamatorias al tejido para iniciar el daño multiorgánico. El fenotipo híbrido TREG y Th2 de las células RAPA-501-ALLO regula de forma cruzada las poblaciones Th1 y Th17 que inician la hiperinflamación de COVID-19. La inmunomodulación de RAPA-501 ocurre de manera independiente del receptor de células T, lo que permite una terapia celular estándar. Finalmente, en modelos experimentales de neumonía viral y ARDS, las células TREG median un efecto protector sobre el tejido alveolar pulmonar. Debido a este mecanismo de acción único que implica efectos antiinflamatorios y protectores de tejidos, el producto de células T alogénicas RAPA-501 es especialmente adecuado para la evaluación en el contexto del SDRA relacionado con la etapa 3 de la COVID-19.

En general, la enfermedad autoinmune clásica, la enfermedad neurodegenerativa y la enfermedad inflamatoria inducida por virus son impulsadas por el predominio de respuestas de tipo Th1/Th17 con una insuficiencia relativa de los subgrupos Th2 y TREG inmunosupresores contrarreguladores. Las células TREG, que se definen en parte por su expresión del factor de transcripción FOXP3, se han estudiado ampliamente en modelos experimentales por su capacidad para modular enfermedades autoinmunes, enfermedades neurodegenerativas y complicaciones de trasplantes, incluida la enfermedad de injerto contra huésped (GVHD, por sus siglas en inglés) y el injerto. rechazo. Es importante destacar que la producción de células T de IL-2 o la administración de IL-2 exógena provoca inflamación pulmonar durante la infección viral experimental; por lo tanto, dada la función conocida de las células TREG como consumidoras de IL-2, existe una sólida justificación mecánica para una contribución beneficiosa de las células TREG durante la inflamación pulmonar provocada por virus. Además, en modelos murinos experimentales de inflamación pulmonar y lesión pulmonar inducidas por virus, las intervenciones que aumentaron el número y la función de las células TREG aceleraron la reparación de la lesión pulmonar. Y las células Th2, que se definen en parte por su expresión del factor de transcripción GATA3, se describieron hace treinta años como una poderosa población contrarreguladora para evitar el predominio de células Th1. Es importante tener en cuenta que los datos clínicos indican que las maniobras que aumentan las poblaciones de células inmunosupresoras, incluidas las células TREG, pueden reducir la enfermedad inflamatoria grave, como la enfermedad de injerto contra huésped, sin afectar la inmunidad antiviral. Además, tanto en modelos experimentales como en estudios clínicos, un nivel apropiado de células TREG puede resultar en una mejora general de la inflamación pulmonar durante la bronquiolitis viral. En conjunto, estos hallazgos indican que las células T que expresan un fenotipo TREG/Th2 combinado producirían efectos beneficiosos predecibles en el contexto de la inflamación pulmonar inducida por virus y la lesión asociada con la enfermedad COVID-19 en etapa 3 grave.

Los ensayos clínicos han evaluado las células de tipo TREG y Th2 para diversas afecciones, principalmente las complicaciones del trasplante. En general, se cree que las células (n)TREG naturales derivadas del timo expresan un fenotipo más estable que las células (i)TREG inducidas post-tímicas; en comparación, las células iTREG pueden mediar una supresión más potente. No obstante, tanto las células nTREG como las iTREG son susceptibles a la plasticidad de la diferenciación, lo que crea la preocupación de que una población de TREG potencialmente terapéutica pueda convertirse en fenotipos patógenos Th1/Th17 in vivo. Las células (n)TREG expandidas ex vivo se evaluaron en el marco de un trasplante alogénico de células hematopoyéticas (HCT) utilizando donantes de sangre de cordón umbilical; más recientemente, el mismo grupo de investigación ha desarrollado una terapia celular (i)TREG expandida ex vivo para limitar las complicaciones del trasplante. Además, las células nTREG expandidas ex vivo se han evaluado en el contexto de la diabetes mellitus tipo I; este ensayo clínico encontró que la terapia con TREG era segura y al menos transitoriamente efectiva para mejorar el control de la enfermedad. Además, en el contexto de la esclerosis lateral amiotrófica (ELA), que es una enfermedad propagada por una respuesta inflamatoria central y periférica grave impulsada por Th1, un ensayo clínico de transferencia adoptiva de células nTREG identificó que la intervención era segura y se mostró prometedora en términos de Mejora de la enfermedad de ELA. Finalmente, en un estudio de fase II de la terapia con células Th2 resistentes a la rapamicina en el contexto de un TCH alogénico de baja intensidad, la transferencia adoptiva de células Th2 fue segura y se asoció con un cambio hacia la polarización Th2 in vivo, la preservación del injerto del donante, la estabilización del quimerismo mixto , una baja tasa de EICH y potentes efectos antitumorales en pacientes con neoplasias malignas hematológicas refractarias. En conjunto, los resultados de estos ensayos clínicos indican que la transferencia adoptiva de TREG y poblaciones de tipo Th2 se puede administrar de manera segura, incluso en el entorno de HCT alogénico, y puede mediar en la modulación beneficiosa de las afecciones inflamatorias.

La fabricación ex vivo se puede utilizar para generar células TREG (i) inducidas a partir del grupo post-tímico de células T periféricas. En el protocolo actual, el método de fabricación se centrará en la inhibición de mTOR, que es una intervención establecida que promueve la inducción de células TREG. En combinación con la inhibición de mTOR, el sistema de cultivo que se utiliza incorpora citocinas que promueven tanto un fenotipo Th2 como TREG, a saber, IL-4, TGF-beta e IL-2. Finalmente, el protocolo incluirá un producto de células TREG/Th2 compuesto por subconjuntos de células T CD4+ y CD8+, ya que estos subconjuntos de células T contrarreguladoras expresan repertorios de receptores diferenciales de células T (TCR) y una diversidad de mecanismos efectores que pueden mejorar potencialmente un efecto antiinflamatorio. Para la fabricación de RAPA-501, las células mononucleares de sangre periférica se recolectan de una aféresis en estado estacionario y se someten a la siguiente intervención de cultivo de dos pasos: en el paso 1, un paso de inanición severa da como resultado la desdiferenciación de las células T, que se realiza a través de ambos utilización de medios selectivos y la adición de agentes farmacéuticos aprobados por la FDA que inhiben potentemente la señalización de mTOR; y en el paso 2, se produce la rediferenciación de las células T utilizando agentes de coestimulación y citocinas polarizadoras de tipo Th2 y TREG. Después de 6 días en cultivo, la población de TREG/Th2 resultante se crioconserva en alícuotas de un solo uso en dosis terapéuticas determinadas por el protocolo. Las células T de fenotipo de citocina tipo II se caracterizan en parte por su expresión del factor de transcripción GATA3, mientras que las poblaciones de células T reguladoras se identifican en parte por su expresión del factor de transcripción FOXP3. Al inicio del cultivo, una frecuencia muy baja de células T expresa GATA3 o FOXP3. Por el contrario, el producto de células RAPA-501 fabricado en condiciones de cultivo TREG/Th2 expresa una alta frecuencia de células T que son positivas para GATA3, FOXP3 o FOXP3 positivas para GATA3 y FOXP3. Es importante destacar que este perfil de factor de transcripción se expresa en las células T CD4+ y CD8+ fabricadas. Es importante señalar que se han definido poblaciones de células T CD4+ y CD8+ con función TREG, incluida una población de TREG CD8+ que suprime de forma potente la GVHD; es potencialmente ventajoso tener ambos subconjuntos representados en un producto terapéutico porque las células TREG CD4+ y CD8+ utilizan mecanismos efectores diferenciales.

Las poblaciones de células T reguladoras pueden suprimir las poblaciones de células T efectoras patogénicas mediante varios mecanismos definidos, incluida la expresión de moléculas de ectonucleotidasa CD39 y CD73, que actúan para hidrolizar el ATP proinflamatorio hacia el sustrato de adenosina inmunosupresor. De hecho, las células TREG que expresan CD39 poseen una mayor función supresora y se han asociado con la resolución de la enfermedad inflamatoria intestinal. Además, la función supresora de las células TREG humanas está mediada en parte por CD73. Las células T fabricadas en condiciones de cultivo TREG/Th2 tienen un aumento en la expresión de las moléculas efectoras asociadas a TREG, CD39 y CD73. Además de las ectonucleotidasas CD39/CD73, la función de las células TREG también se ha correlacionado con la expresión de CD103, que es una integrina que dicta la localización de los linfocitos epiteliales. De hecho, la señalización del receptor CD103 e IL-2 coopera para mantener la tolerancia inmunitaria en la mucosa intestinal; además, las células TREG que expresan CD103 son fundamentales para mejorar la EICH crónica experimental. Las células T fabricadas en condiciones de cultivo TREG/Th2 tienen una mayor expresión de la molécula efectora TREG CD103.

En modelos experimentales, la eficacia de la terapia de células T adoptivas depende del injerto exitoso y la persistencia de células T in vivo. Es importante destacar que el estado de diferenciación de las células T ayuda a dictar la persistencia in vivo, y las células menos diferenciadas tienen una mayor persistencia. Las células T murinas resistentes a la rapamicina, que expresaban un fenotipo de memoria central T (TCM), habían aumentado el potencial de injerto in vivo en relación con las células T de control. Además, las células T resistentes a la rapamicina humana también aumentaron el injerto en un modelo humano-murino de enfermedad xenogénica de injerto contra huésped. Las células T con diferenciación reducida en relación con la población de memoria efectora T (TEM) han aumentado la persistencia in vivo y median efectos in vivo aumentados, incluido el subconjunto TCM, el subconjunto de células T ingenuas y, más recientemente, la memoria de células madre T (TSCM) subconjunto. Esta relación entre el estado de diferenciación de las células T y la función de las células T in vivo es relevante para las células TREG, ya que: (1) las células TREG de fenotipo TCM fueron más eficaces para reducir la EICH experimental en relación con las células TREG de fenotipo TEM; y (2) las células TREG que expresaban el marcador de células madre CD150 fueron muy eficaces para la prevención del rechazo de injertos de células madre. Las células T fabricadas en condiciones de cultivo TREG/Th2 se enriquecen con células que tienen un estado de diferenciación reducido compatible con un subconjunto de células madre T, incluida la expresión del marcador CD150.

También es importante evaluar el perfil de secreción de citocinas de las células RAPA-501 fabricadas. En primer lugar, es fundamental que el producto celular sea capaz de secretar IL-4, que es la citoquina conductora de la posterior diferenciación de Th2. En segundo lugar, es deseable que una población de células T transferidas adoptivamente sea capaz de secretar IL-2, ya que esta capacidad indica una función progenitora que permite que las células T se expandan más fácilmente in vivo sin necesidad de IL-2 exógena. Finalmente, es importante que la población de células RAPA-501 tenga una secreción reducida de las citocinas de tipo Th1 o Th17 IFN-gamma, TNF-alfa, IL-17 y GM-CSF. El producto celular RAPA-501 fabricado secreta IL-4 e IL-2 con una secreción mínima de citocinas de tipo Th1 o Th17.

Las células T reguladoras también se pueden definir en parte por su capacidad para suprimir la proliferación o función de las células T efectoras. Es importante destacar que las células TREG/Th2 fabricadas suprimen potentemente la secreción de células Th1/Tc1 de múltiples citocinas inflamatorias, incluidas IFN-gamma, GM-CSF y TNF-alfa. Para evaluar el mecanismo de supresión, se realizaron experimentos con el ensayo Transwell, en el que las células T efectoras y las células RAPA-501 se separan mediante un filtro que evita el contacto entre células pero permite la comunicación entre células mediante pequeños mediadores solubles, como las citoquinas. Las células RAPA-501 actuaron de manera independiente a TCR para suprimir la capacidad de secreción de citoquinas de las células T efectoras. Debido a que no se proporcionó coestimulación a la cámara transwell que contenía células RAPA-501, las células RAPA-501 no requirieron coestimulación para modular los niveles de citocinas inflamatorias, incluidas IL-2, IFN-gamma, GM-CSF y TNF-alfa. . Las siguientes citoquinas y quimioquinas fueron reducidas por las células RAPA-501 en este ensayo transwell, con una supresión relativamente igual mediada por subconjuntos CD4+ y CD8+ de células RAPA-501: CCL1, CCL2, CCL7, CCL11, CCL13, CCL17, CCL20, CCL22, CCL26 , CXCL1, CXCL10, CXCL11, CXCL12, IL-6, IFN-gamma, GM-CSF e IL-10. La capacidad de las células TREG para consumir IL-2 es un fenómeno comúnmente descrito, aunque estudios previos identificaron el requisito de contacto de célula a célula para el consumo de IL-2. Como tales, las células RAPA-501 son las únicas capaces de modular el nivel de múltiples citocinas inflamatorias de manera independiente del contacto. Estos resultados sugieren que las células RAPA-501 representan un candidato adecuado para la neutralización de múltiples citocinas y quimiocinas asociadas con diversas enfermedades, incluida la inflamación pulmonar inducida por virus. A la luz de esta capacidad del producto de células RAPA-501 para suprimir la inflamación mediada por células T de una manera independiente de TCR, la terapia RAPA-501 es muy adecuada para aplicaciones de tratamiento alogénicas listas para usar.

Se realizaron más experimentos para evaluar si el producto celular RAPA-501 también podría regular las células microgliales del SNC humano, que son células derivadas de mieloides que son análogas a la población de monocitos periféricos. Para evaluar si el producto celular RAPA-501 podría modular las células microgliales proinflamatorias de manera independiente del contacto, se probó la capacidad de las células RAPA-501 para reducir el estado inflamatorio de la línea celular microglial HMC3 en un ensayo Transwell. Las células RAPA-501 redujeron la secreción de células HMC3 de las citocinas proinflamatorias IL-6 e IFN-gamma y la quimiocina proinflamatoria IP-10 en una proporción relativamente baja de células RAPA-501 a células microgliales de 1:40. Estos resultados demuestran que el producto RAPA-501 es capaz de inhibir la secreción de citocinas y quimiocinas de poblaciones derivadas de mieloides de manera independiente del contacto y del TCR, lo que proporciona una justificación adicional para la utilización alogénica y lista para usar de RAPA- 501 producto.

También se evaluó el producto de células RAPA-501 para la estabilidad del fenotipo de células T. Es decir, se ha determinado que un factor limitante de la terapia con células TREG puede ser la plasticidad de diferenciación, por ejemplo, por lo que las células TREG pueden verse influenciadas por citocinas inflamatorias para perder sus características TREG y adoptar un estado inflamatorio de tipo Th1, que luego puede promover patogénesis de la enfermedad. Para abordar esta posibilidad, la capacidad de las células RAPA-501 para modular los factores de transcripción de la diferenciación de las células T después de un intervalo de cultivo prolongado que involucró la coestimulación de las células T, la ausencia de inhibidores de mTOR y la presencia de las citocinas inflamatorias polarizantes IFN-alfa e IL -6 fue estudiado. Estos experimentos demostraron que el producto celular RAPA-501 tenía una notable estabilidad de diferenciación (expresión continua de FOXP3 y GATA3 en los subconjuntos CD4+ y CD8+; falta de regulación positiva de TBET).

En resumen, las células RAPA-501 expresan un fenotipo consistente con una población de células T reguladoras, que incluye: expresión estable de los factores de transcripción TREG y Th2 FOXP3 y GATA3; expresión de las moléculas funcionales de TREG CD39, CD73 y CD103; expresión de un estado reducido de diferenciación de células T, incluida la expresión del marcador de células madre CD150; secreción de un patrón Th2 de citoquinas con secreción mínima de citoquinas de tipo Th1/Th17; capacidad supresora funcional contra las células efectoras Th1/Tc1 y las células mieloides proinflamatorias, incluidos niveles reducidos de múltiples citocinas y quimiocinas inflamatorias; y una capacidad para inhibir los efectores inflamatorios de una manera independiente del contacto y del TCR. En conjunto, estas características del producto RAPA-501 predicen que esta terapia representa un candidato novedoso y prometedor para tratar el SDRA relacionado con la COVID-19.

Este es el primer estudio de fase 1/fase 2b en humanos que evalúa la terapia celular alogénica RAPA-501 en participantes con SDRA relacionado con COVID-19. Se evaluarán dos cohortes de fase 1, a saber, una cohorte 1 de dosis baja (40 x 10^6 células/infusión) y una cohorte 2 de dosis alta (160 x 10^6 células/infusión); este componente de la fase 1 utilizará la toxicidad limitante de la dosis (DLT) como criterio principal de valoración. Siempre que se demuestre la seguridad en el componente del estudio de fase 1, cada cohorte de dosis de RAPA-501 puede evaluarse en el componente de fase 2b aleatorizado. En el componente de la fase 2b, por cada nivel de dosis de RAPA-501 que se determine que es seguro, los pacientes serán aleatorizados para recibir células RAPA-501 (n=19) o placebo (n=19). Después de la infusión de células RAPA-501 o placebo, estas cohortes aleatorias continuarán con la terapia de atención estándar (no guiada por protocolo). El criterio principal de valoración del estudio de fase 2b es la mortalidad a los 30 días, con el objetivo estadístico de reducir la mortalidad en los receptores de RAPA-501 en relación con la cohorte aleatoria de control con placebo.

Los participantes del estudio deben ser pacientes hospitalizados con SDRA relacionado con COVID-19, específicamente: infección por SARS-CoV-2, según lo determinado por RT-PCR o prueba equivalente; infiltrado pulmonar en el examen radiológico; y un diagnóstico de SDRA que requiere asistencia respiratoria intensiva, incluida ventilación no invasiva, como cánula nasal de alto flujo o ventilación mecánica. El estudio consta de: (1) un paso de inscripción en el estudio (detección); y (2) después de confirmar la elegibilidad, se realizará la infusión de células RAPA-501. En la Cohorte 1, la infusión de células RAPA-501 será a una dosis de 40 x 10^6 células/infusión; tres participantes serán tratados inicialmente, con una semana de separación entre los participantes en este componente de fase 1 para evaluar DLT, que se definirá como toxicidad de grado 3 o mayor atribuible a las células RAPA-501 dentro de los 7 días de la infusión. En cualquier momento en que la terapia de la Cohorte 1 se considere segura (ya sea 0/3 o 1/6 con DLT), entonces la terapia RAPA-501 de la Cohorte 1 puede evaluarse en el componente de estudio aleatorizado de fase 2b para abordar el objetivo principal del estudio relacionado a 30 días de mortalidad. En cualquier momento en que la terapia de la Cohorte 1 se considere segura, se puede iniciar el tratamiento de la Cohorte 2, que evaluará la infusión de células RAPA-501 a una dosis de 160 x 10^6 células/infusión. De la misma manera que la Cohorte 1, si la terapia de la Cohorte 2 se considera segura, la terapia RAPA-501 de la Cohorte 2 puede evaluarse en el componente de estudio aleatorizado de fase 2b para abordar el objetivo principal del estudio relacionado con la mortalidad a los 30 días. El estudio constará de tres etapas principales: (1) el intervalo de 30 días detallado anteriormente en relación con los objetivos principales del estudio; (2) un intervalo extendido total de 90 días para continuar el monitoreo clínico relativamente intensivo de los criterios de valoración potenciales de eficacia y seguridad; y (3) un intervalo extendido total de 6 meses para proporcionar un seguimiento clínico a largo plazo y continuar monitoreando los parámetros de laboratorio relacionados con los puntos finales inmunes y virales.