CirTeloDIAG: Flydende biopsi for gliomtumor (circTeloDIAG)

Gliomer, heterogene og aggressive tumorer afventer nye terapeutiske tilgange.

Gliomer er de hyppigste primære hjernetumorer, med 2.500 til 3.000 nye tilfælde om året i Frankrig. De vedrører ældre, men kan også ramme børn og unge voksne. Deres diagnose er ofte kompleks (differentialdiagnoser, delikat klassificering). Imidlertid er denne diagnose afgørende for at bestemme den terapeutiske behandling. Mens grad I gliomer (sjældne) således kan helbredes ved kirurgi eller har en langsom progression, har grad II til IV en omkostning i form af terapeutiske omkostninger (kirurgi og radiokemoterapi), i forbindelse med en prognose, der spænder fra tung 10-15 år for grad II til kun 15 måneder for glioblastom (grad IV). Nye bioterapier (såsom anti-VEGF) har ikke forbedret prognosen, og til dato er der ingen målrettede behandlinger eller immunsystemer, der har vist en fordel.

Det er mere end nogensinde nødvendigt at foreslå målrettede behandlinger mod ændringer af hver type gliom og sideløbende at udvikle de terapeutiske tests, der tillader ordination af dem.

DIAGNOSE AF GLIOMER: BIOMARKØRERS BETYDNING

Diagnosen af ​​gliomer var genstand for en høj grad af inter-observatør uoverensstemmelser. Molekylære kriterier har for nylig gjort det muligt at forfine og sikre diagnosen1. Således, i hospitalsrutine, mutationer i Isocitrate Dehydrogenaser (IDH1 og 2), 1p19q deletion, EGFR amplifikation, tab af CDKN2A, mutationer i histonerne H3.3 og H3.1 (G35R / V, K28M), methylering af MGMT, samt som to telomere markører: mutationer af TERT-promotoren (TERTmt) og deletionen af ​​ATRX (tabt ATRX) (se nedenfor). Således definerer den nye "histo-molekylære" klassificering af WHO1 (2016) og dens følgende opdateringer forskellige klasser af gliomer:

• Oligodendrogliomer (OD) (IDHmt, 1p19q tabt) (grad II-III)
• IDHmt (A) Astrocytomer (IDHmt og ATRXperdu / TP53 positive) (grad II-III)
• IDHmt Glioblastomer (GBM IDHmt) (IDHmt og ATRXperdu) (grad IV)
• IDHwt (GBM) Glioblastomer (IDHwt og TERTmt) (grad IV)
• IDHwt astrocytomer (A IDHwt) (IDHwt) (grad II-III)
• midtlinje muterede histongliomer (G35R / V, K28M)

Denne klassificering afspejler dog ikke fuldt ud tumorernes faktiske aggressivitet og har prognostiske insufficienser. Der foretages derfor løbende tilpasninger til disse indledende kategorier. På trods af disse diagnostiske tilpasninger viser nogle tumorer uoverensstemmelser mellem den immunhistologiske og molekylære diagnose, de er annoteret NEC (Not Elsewhere Classified).

VÆSKEBIOPSI: ET FORVENTET DIAGNOSEVÆRKTØJ TIL GLIOMER

Fremgangsmåder af typen flydende biopsi har hurtigt udviklet sig i klinikken; de gør det allerede muligt at overvåge og/eller deltage i diagnosticering af forskellige kræftformer på rutinebasis (f.eks.: EGFR-mutationer i lungecancer). I tilfælde af gliomer er deres fordele indlysende: Ud over billeddannelse eller som erstatning for stereotaksisk biopsi (1 % dødelighed) kan de forbedre kvaliteten af ​​opfølgningen og fremskynde den indledende diagnose. Især 47% af patienter med GBM har en MR-billeddannelse, der tyder på progression efter strålebehandling, påvisning af en cirkulerende markør ville gøre det muligt at skelne en progression (27%) fra en "pseudo-progression" (20%). Ved monitorering af gliomer ville genindtræden af ​​den cirkulerende markør gøre det muligt at objektivere tilbagefaldet og at oprette en anden linje eller inklusion i et klinisk forsøg hurtigere. Endelig, under den indledende diagnose, kunne forsinkelsen på en måned efter biopsi eller operation nødvendig for det konventionelle diagnostiske kredsløb reduceres til en uge takket være denne type test; terapeutisk behandling kunne derefter fremskyndes.

På nuværende tidspunkt er der ingen sådan test for gliomer. Foreløbige undersøgelser udført på cerebrospinalvæske (CSF) opsamlet under operation viser dog en følsomhed på omkring 100 % for påvisning af TERTmt9. Fjernelsen af ​​LCS til opfølgning er imidlertid en invasiv handling, som vi bør favorisere tilgange med blodprøvetagning.

De første undersøgelser af denne type på cirkulerende DNA (cfDNA) i plasma, via hel exome-sekventering (en meget dyr teknik) påviste genabnormiteter i næsten 50 % af de analyserede cfDNA'er. Påvisning af diagnostiske hotspots, der er karakteristiske for gliomer såsom TERTmt, er imidlertid utilstrækkelig på cfDNA (0-8 % påvisning for glioblastomer). Andre undersøgelser har set på analysen af ​​tumor-DNA båret af exosom-lignende vesikler, men har ikke været tilfredsstillende. Endelig er et alternativ baseret på oprensning af cirkulerende tumorceller (CTC). Sidstnævnte er blevet påvist i næsten 77 % af gliomerne; de bedste resultater er opnået ved brug af tæthedsgradientcentrifugeringsteknikker, såsom dem, der tilbydes af OncoQuick-sættene, der kombinerer en tæthedsgradient med filtrering. Ved hjælp af denne teknik blev der påvist fra 1 til 10 CTC pr. 7,5 ml blod hos 31 patienter med gliomer af forskellige kvaliteter. Fordelen ved denne tilgang er, at den bevarer hele genomet af tumorcellen og vil derfor tillade identifikation af karakteristiske diagnostiske hotspots såsom TERTmt og IDH1 / 2mt. Søgningen efter disse mutationer vil derefter kunne objektiveres ved hjælp af billige teknikker (såsom den digitale PCR-dråbe), der allerede er brugt rutinemæssigt og ikke ved high-throughput-teknikker (f.eks. helgenomsekventering), der er uegnede til rutine.

Der er derfor en reel forventning om flydende biopsier til diagnosticering og opfølgning af gliomer. Den målrettede forskningstilgang til hotspot-ændringer med diagnostisk værdi i gliom (såsom TERTmt og IDH1 / 2mt) via CTC-berigelse ser ud til at være en lovende vej.