CircTeloDIAG: nestemäinen biopsia glioomakasvaimelle (circTeloDIAG)

Glioomat, heterogeeniset ja aggressiiviset kasvaimet odottavat uusia terapeuttisia lähestymistapoja.

Glioomat ovat yleisimmät primaariset aivokasvaimet, ja Ranskassa ilmaantuu 2 500–3 000 uutta tapausta vuodessa. Ne koskevat vanhuksia, mutta voivat koskea myös lapsia ja nuoria aikuisia. Heidän diagnoosinsa on usein monimutkainen (erotusdiagnoosit, herkkä luokittelu). Tämä diagnoosi on kuitenkin välttämätön terapeuttisen hoidon määrittämiseksi. Siten, vaikka asteen I glioomat (harvinaiset) ovat parannettavissa leikkauksella tai niiden eteneminen on hidasta, asteikolla II–IV on kustannuksia hoitokustannuksina (leikkaus ja sädekemoterapia), kun ennuste vaihtelee raskaasta 10-15. vuosia asteen II osalta vain 15 kuukauteen glioblastooman (aste IV) osalta. Uudet bioterapiat (kuten anti-VEGF) eivät ole parantaneet ennustetta, eikä tähän mennessä ole olemassa kohdennettuja hoitoja tai immuunijärjestelmiä, jotka olisivat osoittaneet hyötyä.

On enemmän kuin koskaan tarpeellista ehdottaa kohdennettuja hoitoja kunkin glioomatyypin muutoksia vastaan ​​ja kehittää rinnakkain terapeuttisia testejä, jotka mahdollistavat niiden määräämisen.

GLIOOMIEN DIAGNOOSI: BIOMAMERKKIJEN MERKITYS

Glioomadiagnoosissa esiintyi suuri määrä tarkkailijoiden välisiä eroja. Molekyylikriteerit ovat viime aikoina mahdollistaneet diagnoosin tarkentamisen ja varmistamisen1. Siten sairaalarutiinissa myös isositraattidehydrogenaasien (IDH1 ja 2) mutaatiot, 1p19q-deleetio, EGFR:n monistuminen, CDKN2A:n häviäminen, mutaatiot histoneissa H3.3 ja H3.1 (G35R / V, K28M), MGMT:n metylaatio sekä kahtena telomeerimarkkerina: TERT-promoottorin mutaatiot (TERTmt) ja ATRX:n deleetio (kadonnut ATRX) (katso alla). Siten WHO1:n (2016) uusi "histo-molekyyli" luokittelu ja sen seuraavat päivitykset määrittelevät eri glioomiluokat:

• Oligodendroglioomat (OD) (IDHmt, 1p19q kadonnut) (asteet II-III)
• IDHmt (A) Astrosytoomat (IDHmt ja ATRXperdu / TP53 positiiviset) (asteet II-III)
• IDHmt Glioblastoomat (GBM IDHmt) (IDHmt ja ATRXperdu) (luokka IV)
• IDHwt (GBM) Glioblastoomat (IDHwt ja TERTmt) (aste IV)
• IDHwt Astrosytoomas (A IDHwt) (IDHwt) (asteet II-III)
• keskiviivan mutatoidut histoniglioomat (G35R / V, K28M)

Tämä luokittelu ei kuitenkaan täysin heijasta kasvainten todellista aggressiivisuutta ja sillä on ennustepuutteita. Siksi näihin alkuperäisiin luokkiin tehdään säännöllisesti mukautuksia. Näistä diagnostisista mukautuksista huolimatta joissakin kasvaimissa on eroja immunohistologisen ja molekyylidiagnoosin välillä, ja niihin on merkitty NEC (ei muualle luokiteltu).

NESTEINEN BIOPSIA: ODOTETTU DIAGNOOSIAALA GLIOMASILLE

Nestemäiset biopsiatyyppiset lähestymistavat ovat kehittyneet nopeasti klinikalla; ne mahdollistavat jo erilaisten syöpien rutiininomaisen seurannan ja/tai osallistumisen diagnoosiin (esim. EGFR-mutaatiot keuhkosyövissä). Gliooman tapauksessa niiden hyöty on ilmeinen: kuvantamisen lisäksi tai stereotaksisen biopsian korvikkeena (1 % kuolleisuus) ne voivat parantaa seurannan laatua ja nopeuttaa alkudiagnoosia. Erityisesti 47 prosentilla GBM-potilaista on MRI-kuvaus, joka viittaa etenemiseen sädehoidon jälkeen. Verenkierron merkkiaineen havaitseminen mahdollistaisi etenemisen (27 %) erottamisen "pseudoetenemisestä" (20 %). Gliooman seurannassa kiertävän markkerin uudelleen ilmaantuminen mahdollistaisi uusiutumisen objektivisoinnin ja toisen linjan tai kliiniseen tutkimukseen sisällyttämisen nopeamman. Lopuksi alkudiagnoosin aikana yhden kuukauden viive biopsian tai leikkauksen jälkeen, joka tarvitaan tavanomaiseen diagnostiikkapiiriin, voidaan lyhentää yhteen viikkoon tämän tyyppisen testin ansiosta; terapeuttista hallintaa voitaisiin sitten nopeuttaa.

Tällä hetkellä tällaista testiä glioomille ei ole. Leikkauksen aikana kerätyllä aivo-selkäydinnesteellä (CSF) tehdyt alustavat tutkimukset osoittavat kuitenkin noin 100 %:n herkkyyden TERTmt9:n havaitsemiseksi. LCS:n poistaminen seurantaa varten on kuitenkin invasiivinen teko, johon meidän tulisi suosia verinäytteenottoa.

Ensimmäiset tämän tyyppiset tutkimukset plasmassa kiertävästä DNA:sta (cfDNA) koko eksomin sekvensoinnilla (erittäin kallis tekniikka) havaitsivat geenipoikkeavuuksia lähes 50 %:ssa analysoiduista cfDNA:ista. Kuitenkin glioomille ominaisten diagnostisten hotspottien, kuten TERTmt, havaitseminen ei ole riittävä cfDNA:ssa (glioblastoomien havaitseminen 0-8 %). Muissa tutkimuksissa on tarkasteltu kasvain-DNA:n analyysiä, jota eksosomin kaltaiset vesikkelit kuljettavat, mutta ne eivät ole olleet tyydyttäviä. Lopuksi vaihtoehto perustuu verenkierrossa olevien kasvainsolujen (CTC) puhdistamiseen. Viimeksi mainitut on havaittu lähes 77 %:ssa glioomista; parhaat tulokset on saatu käyttämällä tiheysgradienttisentrifugointitekniikoita, kuten OncoQuick-sarjojen tarjoamia tekniikoita, joissa tiheysgradientti yhdistetään suodatukseen. Tätä tekniikkaa käyttämällä havaittiin 1 - 10 CTC:tä 7,5 ml:ssa verta 31 potilaalla, joilla oli eriasteisia glioomia. Tämän lähestymistavan etuna on, että se säilyttää kasvainsolun koko genomin ja mahdollistaa siten tunnusomaisten diagnostisten hotspottien, kuten TERTmt ja IDH1 / 2mt, tunnistamisen. Näiden mutaatioiden etsiminen on tällöin objektiivista halvoilla tekniikoilla (kuten digitaalisella PCR-pisaralla), joita käytetään jo rutiininomaisesti, eikä korkean suorituskyvyn tekniikoilla (esim. koko genomin sekvensointi), jotka eivät sovellu rutiiniin.

Siksi on olemassa todellisia odotuksia nestemäisten biopsioiden suhteen glioomien diagnosointiin ja seurantaan. Kohdennettu tutkimusmenetelmä gliooman diagnostista arvoa omaaviin hotspot-muutoksiin (kuten TERTmt ja IDH1 / 2mt) CTC-rikastuksen kautta näyttää lupaavalta.