CircTeloDIAG: жидкая биопсия опухоли глиомы (circTeloDIAG)

Глиомы, гетерогенные и агрессивные опухоли, ожидающие новых терапевтических подходов.

Глиомы являются наиболее частыми первичными опухолями головного мозга: во Франции регистрируют от 2500 до 3000 новых случаев в год. Они касаются пожилых людей, но также могут поражать детей и молодых людей. Их диагностика часто сложна (дифференциальные диагнозы, тонкая классификация). Тем не менее, этот диагноз имеет важное значение для определения терапевтического лечения. Таким образом, в то время как глиомы I степени (нечастые) излечимы хирургическим путем или имеют медленное прогрессирование, глиомы II–IV степени требуют затрат с точки зрения терапевтических затрат (хирургия и радиохимиотерапия) в связи с прогнозом в диапазоне от тяжелых 10–15 лет для степени II до всего 15 месяцев для глиобластомы (степень IV). Новые биотерапевтические препараты (такие как анти-VEGF) не улучшили прогноз, и на сегодняшний день нет таргетных методов лечения или иммунных систем, которые продемонстрировали бы положительный эффект.

Более чем когда-либо необходимо предлагать целенаправленные методы лечения изменений каждого типа глиомы и параллельно разрабатывать терапевтические тесты, позволяющие их назначение.

ДИАГНОСТИКА ГЛИОМ: ЗНАЧЕНИЕ БИОМАРКЕРОВ

Диагноз глиомы подвергался высокому уровню расхождений между наблюдателями. Молекулярные критерии недавно позволили уточнить и подтвердить диагноз1. Так, в больничной рутине мутации в изоцитратдегидрогеназах (IDH1 и 2), делеция 1p19q, амплификация EGFR, потеря CDKN2A, мутации в гистонах H3.3 и H3.1 (G35R/V, K28M), метилирование MGMT, а также в качестве двух теломерных маркеров: мутации промотора TERT (TERTmt) и делеция ATRX (потеря ATRX) (см. ниже). Так, новая «гисто-молекулярная» классификация ВОЗ1 (2016 г.) и ее последующие обновления определяют разные классы глиом:

• Олигодендроглиомы (OD) (IDHmt, 1p19q потерян) (степени II-III)
• IDHmt (A) Астроцитомы (IDHmt и ATRXperdu/TP53 положительные) (степени II-III)
• Глиобластомы IDHmt (GBM IDHmt) (IDHmt и ATRXperdu) (степень IV)
• IDHwt (GBM) Глиобластомы (IDHwt и TERTmt) (степень IV)
• IDHwt Астроцитомы (A IDHwt) (IDHwt) (степени II-III)
• срединные мутированные гистоновые глиомы (G35R/V, K28M)

Однако эта классификация не в полной мере отражает реальную агрессивность опухолей и имеет прогностическую недостаточность. Поэтому в эти исходные категории регулярно вносятся изменения. Несмотря на эти диагностические адаптации, некоторые опухоли демонстрируют расхождения между иммуногистологическим и молекулярным диагнозом, они обозначаются как NEC (не классифицированные в других местах).

ЖИДКОСТЬ БИОПСИЯ: ОЖИДАЕМЫЙ ИНСТРУМЕНТ ДИАГНОСТИКИ ГЛИОМ

Подходы типа жидкой биопсии быстро развиваются в клинике; они уже позволяют контролировать и/или участвовать в диагностике различных видов рака на регулярной основе (например, мутации EGFR при раке легких). В случае глиом их польза очевидна: в дополнение к визуализации или в качестве замены стереотаксической биопсии (1% летальности) они могут улучшить качество наблюдения и ускорить постановку первоначального диагноза. В частности, у 47% пациентов с ГБМ МРТ-изображение указывает на прогрессирование после лучевой терапии, обнаружение циркулирующего маркера позволило бы дифференцировать прогрессирование (27%) от «псевдопрогрессирования» (20%). При мониторинге глиом повторное появление циркулирующего маркера позволило бы объективизировать рецидив и быстрее установить вторую линию или включить в клиническое исследование. Наконец, во время первоначальной диагностики задержка в один месяц после биопсии или операции, необходимая для традиционной диагностической схемы, может быть сокращена до одной недели благодаря этому типу теста; терапевтическое лечение может быть ускорено.

В настоящее время такого теста на глиомы нет. Однако предварительные исследования, проведенные на спинномозговой жидкости (ЦСЖ), собранной во время операции, показывают чувствительность около 100% для обнаружения TERTmt9. Однако удаление LCS для последующего наблюдения является инвазивным действием, к которому мы должны отдавать предпочтение методам забора крови.

Первые такого рода исследования циркулирующей ДНК (вкДНК) в плазме с помощью полноэкзомного секвенирования (очень дорогая методика) выявили генные аномалии почти в 50% проанализированных вкДНК. Однако обнаружение диагностических горячих точек, характерных для глиом, таких как TERTmt, недостаточно на вкДНК (0-8% обнаружения для глиобластом). В других исследованиях рассматривался анализ опухолевой ДНК, переносимой экзосомоподобными везикулами, но они не были удовлетворительными. Наконец, альтернатива основана на очистке циркулирующих опухолевых клеток (ЦОК). Последние обнаружены почти в 77% глиом; наилучшие результаты были получены с использованием методов центрифугирования в градиенте плотности, таких как предложенные наборами OncoQuick, сочетающими градиент плотности с фильтрацией. С помощью этой методики у 31 пациента с глиомами различной степени злокачественности выявлено от 1 до 10 ЦОК на 7,5 мл крови. Преимущество этого подхода заключается в том, что он сохраняет весь геном опухолевой клетки и, следовательно, позволяет идентифицировать характерные диагностические точки, такие как TERTmt и IDH1/2mt. Тогда поиск этих мутаций станет объективным с помощью недорогих методов (таких как цифровая капля ПЦР), которые уже используются рутинно, а не с помощью высокопроизводительных методов (например, секвенирование всего генома), непригодных для рутинной работы.

Поэтому есть реальные ожидания в отношении жидкостной биопсии для диагностики и последующего наблюдения за глиомами. Целенаправленный подход к исследованию очаговых изменений с диагностической ценностью при глиоме (таких как TERTmt и IDH1/2mt) посредством обогащения ЦОК представляется многообещающим направлением.