CircTeloDIAG: 神経膠腫腫瘍のリキッドバイオプシー (circTeloDIAG)

神経膠腫、不均一かつ進行性の腫瘍は、新しい治療法を待っています。

神経膠腫は最も頻度の高い原発性脳腫瘍であり、フランスでは年間 2,500 ～ 3,000 人の新規症例が発生しています。 これらは高齢者に関係しますが、子供や若者にも影響を与える可能性があります。 彼らの診断はしばしば複雑です（鑑別診断、微妙な分類）。 ただし、この診断は治療管理を決定するために不可欠です。 したがって、グレード I の神経膠腫（頻度は低い）は手術で治癒できるか、進行が遅いのに対し、グレード II から IV は予後が 10 ～ 15 歳と非常に高く、治療費（手術および放射線化学療法）の点でコストがかかります。グレード II の場合は 1 年、膠芽腫 (グレード IV) の場合はわずか 15 か月です。 新しい生物療法（抗VEGFなど）は予後を改善しておらず、現在まで利益を示した標的療法や免疫システムはありません。

それぞれのタイプの神経膠腫の変化に対する標的治療を提案し、それらの処方を可能にする治療試験を並行して開発することが、これまで以上に必要となっています。

神経膠腫の診断: バイオマーカーの重要性

神経膠腫の診断には、観察者間の矛盾が高率に見られました。 最近、分子基準により診断を精密化し、確実なものにすることが可能になりました1。 したがって、病院の日常業務では、イソクエン酸デヒドロゲナーゼの変異（IDH1および2）、1p19qの欠失、EGFR増幅、CDKN2Aの欠失、ヒストンH3.3およびH3.1の変異（G35R / V、K28M）、MGMTのメチル化なども同様に発生します。 2 つのテロメア マーカーとして、TERT プロモーターの変異 (TERTmt) と ATRX の欠失 (ATRX 欠失) が挙げられます (以下を参照)。 したがって、WHO1 (2016) の新しい「組織分子」分類とその次の更新では、さまざまなクラスの神経膠腫が定義されています。

• 希突起膠腫（OD）（IDHmt、1p19q喪失）（グレードII～III）
• IDHmt (A) 星状細胞腫 (IDHmt および ATRXperdu / TP53 陽性) (グレード II-III)
• IDHmt 膠芽腫 (GBM IDHmt) (IDHmt および ATRXperdu) (グレード IV)
• IDHwt (GBM) 膠芽腫 (IDHwt および TERTmt) (グレード IV)
• IDHwt 星状細胞腫 (A IDHwt) (IDHwt) (グレード II ～ III)
• 正中線変異ヒストン神経膠腫 (G35R / V、K28M)

ただし、この分類は腫瘍の実際の悪性度を完全には反映しておらず、予後予測が不十分です。 したがって、これらの初期カテゴリに対して定期的に調整が行われます。 これらの診断適応にもかかわらず、一部の腫瘍は免疫組織学的診断と分子診断の間に矛盾を示し、NEC (Not Elsewhere Classified) と注釈が付けられています。

リキッドバイオプシー: 神経膠腫の診断ツールとして期待される

リキッドバイオプシータイプのアプローチは臨床現場で急速に発展しています。これらにより、さまざまながんを日常的に監視したり、診断に参加したりすることがすでに可能になっています (例: 肺がんにおける EGFR 変異)。 神経膠腫の場合、その利点は明らかです。画像診断に加えて、または定位生検（死亡率 1%）の代替として、追跡調査の質を向上させ、初期診断を迅速化できる可能性があります。 特に、GBM患者の47％は、放射線療法後の進行を示唆するMRI画像検査を受けており、循環マーカーが検出されれば、進行（27％）と「偽進行」（20％）を区別することが可能となる。 神経膠腫をモニタリングする場合、循環マーカーの再出現により再発を対象化し、第 2 ラインの設定や臨床試験への参加をより迅速に行うことが可能になります。 最後に、初期診断の際、従来の診断回路では生検または手術後に必要だった 1 か月の遅れが、このタイプの検査のおかげで 1 週間に短縮できました。そうすれば、治療管理を加速できる可能性があります。

現時点では、神経膠腫に対するそのような検査はありません。 しかし、手術中に採取された脳脊髄液 (CSF) に対して行われた予備研究では、TERTmt9 の検出感度が約 100% であることが示されています。 しかし、経過観察のための LCS の除去は侵襲的な行為であり、採血によるアプローチを優先すべきです。

全エクソーム配列決定（非常に高価な技術）による、血漿中の循環 DNA (cfDNA) に関するこの種の最初の研究では、分析された cfDNA のほぼ 50% で遺伝子異常が検出されました。 しかし、TERTmt などの神経膠腫に特徴的な診断ホットスポットの検出は、cfDNA では不十分です (神経膠芽腫の検出率は 0 ～ 8%)。 他の研究では、エキソソーム様小胞によって運ばれる腫瘍 DNA の分析が検討されていますが、満足のいくものではありません。 最後に、別の方法は循環腫瘍細胞 (CTC) の精製に基づいています。 後者は神経膠腫のほぼ 77% で検出されています。最良の結果は、密度勾配と濾過を組み合わせた OncoQuick キットなどの密度勾配遠心分離技術を使用して得られます。 この技術を使用すると、さまざまなグレードの神経膠腫患者 31 人から、血液 7.5 ml あたり 1 ～ 10 個の CTC が検出されました。 このアプローチの利点は、腫瘍細胞のゲノム全体が保存されるため、TERTmt や IDH1 / 2mt などの特徴的な診断ホットスポットの同定が可能になることです。 これらの変異の検索は、ルーチンには不向きなハイスループット技術（例：全ゲノムシークエンシング）ではなく、すでに日常的に使用されている安価な技術（デジタル PCR ドロップレットなど）によって客観的に行うことができます。

したがって、神経膠腫の診断と追跡のためのリキッドバイオプシーには大きな期待が寄せられています。 CTC 濃縮による、神経膠腫における診断価値のあるホットスポット変化 (TERTmt や IDH1 / 2mt など) の標的を絞った研究アプローチは、有望な手段であると思われます。