Blood Biomarker Discovery ved Raman Spectroscopy in Acute Aorta Dissektion (BBDRSAAD)

Prøvetagning: Blod (serum og plasma) udtagning fra alle de udvalgte forsøgspersoner ved indlæggelsen vil blive udført i overensstemmelse med prøvetagningsglasproducentens instruktioner. Derefter vil de indsamlede prøver blive opbevaret ved -80°C.

Dataindsamling: Til Raman-analysen vil 5 μL af hver prøve blive støbt på en aluminiumsfolie for at opnå Surface Enhanced Raman Scattering (SERS). Raman og SERS spektre vil blive erhvervet ved hjælp af et WITec Alpha500 konfokalt mikro-Raman spektroskopisystem (WITEc, Tyskland) med en 532 nm He-Ne laser (Research Electro-Optics, Inc., USA) som excitationskilde, som tilbød en opløsning på cirka 3 cm-1. Instrumentet vil blive kalibreret før hver analyse ved hjælp af referencebåndet for silicium ved 520,7 cm-1. Et 20× mikroskopobjektiv (NA = 1,25, Zeiss, Tyskland) blev brugt til spektral excitation og målinger. Al spektral information blev optaget af et bagbelyst dyb-depletion charge-koblet enhedskamera (ardorTechnology, UK), der arbejdede ved -60°C med en 1,5 s optagelsestid for et enkelt spektrum med et spektralområde på 300-4000 cm-1. Softwarepakken WITec Project spektralanalyse (WITec GmbH, Tyskland) vil blive brugt til kortdesign og erhvervelse af spektre.

Databehandling: Alle de erhvervede spektre vil blive tilpasset med en ni-ordens polynomiel basislinje og normaliseret af enhedsvektor ved hjælp af den dedikerede WITec Project spektralanalysesoftware. Den statistiske analyse for at validere metoden vil blive udført ved hjælp af en multivariat analysetilgang. Principal Component Analysis (PCA) vil blive udført for at reducere datadimensioner og bevise store tendenser. Mann-Whitney vil blive udført på pcs score for at verificere forskellene statistisk relevante mellem de analyserede grupper. Korrelations- og partiel korrelationsanalyse vil blive udført ved hjælp af Spearman's test, idet det antages som gyldig korrelation kun koefficienter med en p-værdi lavere end 0,05. Efterfølgende blev principalkomponentanalyse (PCA) kombineret med lineær diskriminantanalyse (LDA), PCA kombineret med støttevektormaskine (SVM), partiel mindste kvadraters diskriminantanalyse (PLS-DA) og etc. testet til evaluering af diagnostisk effekt. Den statistiske analyse vil blive udført ved hjælp af Origin2018 (OriginLab, USA) og MATLAB R2018b software (Mathworks. Inc., Natica, MA, USA).