Découverte de biomarqueurs sanguins par spectroscopie Raman dans la dissection aortique aiguë (BBDRSAAD)

Prélèvement d'échantillons : Le prélèvement de sang (sérum et plasma) de tous les sujets sélectionnés à l'admission sera effectué conformément aux instructions du fabricant du tube de prélèvement. Ensuite, les échantillons collectés seront stockés à -80°C.

Collecte de données : Pour l'analyse Raman, 5 μL de chaque échantillon seront coulés sur une feuille d'aluminium afin d'obtenir la diffusion Raman améliorée en surface (SERS). Les spectres Raman et SERS seront acquis à l'aide d'un système de spectroscopie confocale micro-Raman WITec Alpha500 (WITec, Allemagne) avec un laser He-Ne 532 nm (Research Electro-Optics, Inc., USA) comme source d'excitation, qui offrait une résolution d'environ 3 cm-1. L'instrument sera calibré avant chaque analyse en utilisant la bande de référence du silicium à 520,7 cm-1. Un objectif de microscope 20 × (NA = 1,25, Zeiss, Allemagne) a été utilisé pour l'excitation spectrale et les mesures. Toutes les informations spectrales ont été enregistrées par une caméra rétro-éclairée à couplage de charge à appauvrissement profond (ardorTechnology, Royaume-Uni) fonctionnant à -60 ° C avec un temps d'acquisition de 1,5 s pour un seul spectre avec une plage spectrale de 300 à 4000 cm-1. Le progiciel d'analyse spectrale WITec Project (WITec GmbH, Allemagne) sera utilisé pour la conception de cartes et l'acquisition de spectres.

Traitement des données : Tous les spectres acquis seront ajustés avec une ligne de base polynomiale d'ordre neuf et normalisés par vecteur unitaire à l'aide du logiciel d'analyse spectrale dédié au projet WITec. L'analyse statistique pour valider la méthode sera effectuée en utilisant une approche d'analyse multivariée. Une analyse en composantes principales (ACP) sera effectuée afin de réduire les dimensions des données et de mettre en évidence les principales tendances. Mann-Whitney sera effectué sur les scores PC pour vérifier les différences statistiquement pertinentes entre les groupes analysés. L'analyse de corrélation et de corrélation partielle sera effectuée à l'aide du test de Spearman, en supposant comme corrélation valide uniquement les coefficients avec une valeur p inférieure à 0,05. Par la suite, l'analyse en composantes principales (ACP) combinée à l'analyse discriminante linéaire (LDA), l'ACP combinée à la machine à vecteurs de support (SVM), l'analyse discriminante des moindres carrés partiels (PLS-DA) et etc. ont été testées pour l'évaluation de la puissance de diagnostic. L'analyse statistique sera effectuée à l'aide des logiciels Origin2018 (OriginLab, USA) et MATLAB R2018b (Mathworks. Inc., Natica, MA, États-Unis).