Neuropeptidekspression under ovariecyklus og hos patienter med PCOS (PCO-NP)

Dette projekt har til formål at undersøge de neurosensoriske mekanismer, der ligger til grund for en af ​​de mest almindelige lidelser relateret til follikulogenese, såsom PCOS. Undersøgelsen har til formål at karakterisere PCOS med hensyn til neuropeptidekspression og at foretage sammenligningen mellem kvinder med og uden PCOS, ved at gå til analyse af venøse blodprøver taget under de tre faser af ovariecyklus og follikelvæske, taget under ægløsningsfasen som en del af oocytopsamlingen. Specifikt vil ekspressionen af ​​neuropeptider såsom CGRP, SP, VIP og enkephaliner i de tre faser af ovariecyklussen (follikulær fase, ovulatorisk fase og luteal fase) i de tre overvejede grupper af kvinder blive evalueret.

Studere design:

Undersøgelsen vil inkludere 45 patienter i alt, henvist til PMA-centret, opdelt i 3 grupper på hver 15 patienter: Gruppe 1 (kontrol) kvinder med regelmæssig ovariecyklus; Gruppe 2 - ikke-PCOS-kvinder, der gennemgår ovariestimulering og ICSI-behandling; Gruppe 3- kvinder med PCOS, der gennemgår ovariestimulation og ICSI-behandling.

Studiet vil have en samlet varighed på 24 måneder fordelt på følgende:

• Præ-fase overvågning og tilmelding af forsøgspersoner (20 måneder).

  • Gruppe 1 vil følge ovarieovervågningsprotokollen, hvor der tages blodprøver på de tre stadier af ovariecyklussen.
  • Gruppe 2 og 3 vil gennemgå ovariestimulering og ICSI-behandling, taget med blod- og follikelvæskeprøver i de specificerede cyklusfaser.
• Udførelse af kemisk/biokemisk analyse udført på det elektrofysiologiske laboratorium ved University of Perugia (2 måneder).
• Udførelse af statistiske test og behandling af de opnåede data (2 måneder)

Forsøgspersonerne vil få en 4 mL venøst ​​blodprøve i henhold til almindelig klinisk praksis for at udføre hormondosering under ovariecyklusmonitorering.

Der er ikke planlagt diagnostiske tests uden for rutinemæssig klinisk praksis, og patienter vil ikke være forpligtet til at rejse til PMA-centret for yderligere besøg ud over dem, der kræves af almindelig klinisk praksis.

Emner og rekrutteringssted: 45 patienter vil blive rekrutteret: 15 kvinder med diagnosen PCOS og 30 ikke-PCOS kvinder på det medicinsk assisterede reproduktionscenter på Perugia Hospital (leder: Prof. S. Gerli).

MATERIALER OG METODER:

GRUPPE 1: Patienter vil i henhold til normal klinisk praksis gennemgå tre blodprøver i follikulær, ægløsning og luteal fase.

GRUPPE 2 og 3: Patienterne vil gennemgå ovariestimuleringsbehandling med gonadotropiner og ægudtagning. Som en del af denne proces vil der i henhold til klinisk praksis blive udført blod- og follikelvæskeprøver.

Metoder Biologisk materialeindsamling: Under ovariecyklusmonitorering udføres en venøs blodprøve om morgenen efter mindst 10 timers faste hos patienter i faserne beskrevet i tabel 1. Der vil også blive taget en follikulær væskeprøve under oocytopsamling (gruppe 2 og 3). Specifikt en aliquot af blodprøve, hvilken follikulær væske vil blive evalueret for at analysere niveauet af neuropeptider (CGRP, SP, VIP og enkephaliner). Niveauet af CGRP vil blive målt ved hjælp af et ekstraktionsfrit enzymimmunoassay-kit (Peninsula laboratories LLC, CA, USA) efter producentens protokol. Til den kvantitative måling af humant stof P vil Human Substance P Enzyme ELISA Assay Kit (ELK1453-96T - Twin Elix srl) blive brugt. Til VIP vil ELISA-kittet til human VIP (ELK1453-96T - Twin Elix srl) blive brugt, og til enkephalinanalysen vil ELISA-kittet for humane enkephaliner (ELK5246-96T - Twin Elix srl) blive brugt. Neuropeptidassays vil blive udført på Fysiologisk Laboratorium ved Institut for Kemi, Biologi og Bioteknologi, University of Perugia, i samarbejde med Prof. Fioretti.

Sera vil også blive analyseret for fastende glukose, triglycerider (TG), total kolesterol (TC), high-density lipoprotein kolesterol (HDL), insulin, dehydroepiandrosteron sulfat (DHEAS), kønshormonbindende globulin (SHBG), progesteron, østradiol, follikelstimulerende hormon (FSH), LH og total testosteron. Serumkoncentrationer af glucose (hexokinase), total kolesterol (CHOD-PAP) og triglycerider (GPO-PAP) vil også blive målt ved hjælp af standard enzymatiske metoder (Roche Diagnostics, IN, USA) med en fuldautomatisk analysator (Roche Modular PE, Roche Diagnostics , IN, USA).