Nevropeptiduttrykk under ovariesyklusen og hos pasienter med PCOS (PCO-NP)

Dette prosjektet har som mål å undersøke de nevrosensoriske mekanismene som ligger til grunn for en av de vanligste lidelsene relatert til follikulogenese, som PCOS. Studien tar sikte på å karakterisere PCOS når det gjelder nevropeptiduttrykk og å gjøre sammenligningen mellom kvinner med og uten PCOS, ved å analysere venøse blodprøver tatt under de tre fasene av eggstokksyklusen og follikkelvæske, tatt i eggløsningsfasen som en del av oocyttoppsamlingen. Spesifikt vil uttrykket av nevropeptider som CGRP, SP, VIP og enkefaliner i de tre fasene av eggstokksyklusen (follikulær fase, ovulatorisk fase og luteal fase) i de tre gruppene kvinner som vurderes bli evaluert.

Studere design:

Studien vil inkludere totalt 45 pasienter, henvist til PMA-senteret, delt inn i 3 grupper med 15 pasienter hver: Gruppe 1 (kontroll) kvinner med regelmessig ovariesyklus; Gruppe 2- ikke-PCOS kvinner som gjennomgår eggstokkstimulering og ICSI-behandling; Gruppe 3- kvinner med PCOS som gjennomgår eggstokkstimulering og ICSI-behandling.

Studiet vil ha en total varighet på 24 måneder fordelt som følger:

• Pre-fase overvåking og påmelding av fag (20 måneder).

  • Gruppe 1 vil følge protokollen for overvåking av eggstokkene, hvor det vil bli tatt blodprøver i de tre stadiene av eggstokksyklusen.
  • Gruppe 2 og 3 vil gjennomgå eggstokkstimulering og ICSI-behandling, tatt med blod- og follikkelvæskeprøver i de spesifiserte syklusfasene.
• Utførelse av kjemisk/biokjemisk analyse utført ved det elektrofysiologiske laboratoriet ved University of Perugia (2 måneder).
• Utførelse av statistiske tester og behandling av innhentede data (2 måneder)

Forsøkspersonene vil få en 4 ml venøst ​​blodprøve i henhold til vanlig klinisk praksis for å utføre hormondosering under overvåking av eggstokksyklusen.

Ingen diagnostiske tester utenfor rutinemessig klinisk praksis er planlagt, og pasienter vil ikke være pålagt å reise til PMA-senteret for ytterligere besøk utover det som kreves av vanlig klinisk praksis.

Emner og rekrutteringssted: 45 pasienter vil bli rekruttert: 15 kvinner med diagnosen PCOS og 30 ikke-PCOS kvinner ved det medisinsk assisterte reproduksjonssenteret ved Perugia Hospital (leder: Prof. S. Gerli).

MATERIALER OG METODER:

GRUPPE 1: Pasienter vil, i henhold til normal klinisk praksis, gjennomgå tre blodprøver i follikkelfasen, eggløsningsfasen og lutealfasen.

GRUPPE 2 og 3: Pasienter vil gjennomgå eggstokkstimuleringsbehandling med gonadotropiner og egguttak. Som en del av denne prosessen, i henhold til klinisk praksis, vil blod- og follikkelvæskeprøver bli utført.

Metoder Biologisk materialeinnsamling: Under overvåking av eggstokksyklus vil en venøs blodprøve tas om morgenen etter minst 10 timers faste hos pasienter i fasene beskrevet i tabell 1. En follikkelvæskeprøve vil også bli tatt under oocytthenting (gruppe 2 og 3). Nærmere bestemt, en alikvot av blodprøve, hvilken follikkelvæske vil bli evaluert for å analysere nivået av nevropeptider (CGRP, SP, VIP og enkefaliner). Nivået av CGRP vil bli målt ved hjelp av et ekstraksjonsfritt enzymimmunoassay-sett (Peninsula laboratories LLC, CA, USA) i henhold til produsentens protokoll. For kvantitativ måling av human substans P, vil Human Substance P Enzyme ELISA Assay Kit (ELK1453-96T - Twin Elix srl) bli brukt. For VIP vil ELISA Kit for Human VIP (ELK1453-96T - Twin Elix srl) brukes, og for enkefalinanalysen vil ELISA Kit for Human Enkephalins (ELK5246-96T - Twin Elix srl) brukes. Nevropeptidanalyser vil bli utført ved Fysiologilaboratoriet ved Institutt for kjemi, biologi og bioteknologi, University of Perugia, i samarbeid med prof. Fioretti.

Sera vil også bli analysert for fastende glukose, triglyserider (TG), totalkolesterol (TC), høydensitetslipoproteinkolesterol (HDL), insulin, dehydroepiandrosteronsulfat (DHEAS), kjønnshormonbindende globulin (SHBG), progesteron, østradiol, follikkelstimulerende hormon (FSH), LH og totalt testosteron. Serumkonsentrasjoner av glukose (heksokinase), totalkolesterol (CHOD-PAP) og triglyserider (GPO-PAP) vil også bli målt ved bruk av standard enzymatiske metoder (Roche Diagnostics, IN, USA) med en helautomatisert analysator (Roche Modular PE, Roche Diagnostics , I USA).