Neuropeptidexpression während des Eierstockzyklus und bei Patienten mit PCOS (PCO-NP)

Ziel dieses Projekts ist es, die neurosensorischen Mechanismen zu untersuchen, die einer der häufigsten Störungen im Zusammenhang mit der Follikulogenese wie PCOS zugrunde liegen. Die Studie zielt darauf ab, PCOS anhand der Neuropeptidexpression zu charakterisieren und einen Vergleich zwischen Frauen mit und ohne PCOS anzustellen, indem venöse Blutproben analysiert werden, die während der drei Phasen des Eierstockzyklus entnommen werden, sowie Follikelflüssigkeit, die während der Ovulationsphase entnommen wird der Eizellentnahme. Insbesondere wird die Expression von Neuropeptiden wie CGRP, SP, VIP und Enkephalinen in den drei Phasen des Eierstockzyklus (Follikelphase, Ovulationsphase und Lutealphase) in den drei betrachteten Gruppen von Frauen bewertet.

Studiendesign:

An der Studie werden insgesamt 45 Patientinnen teilnehmen, die an das PMA-Zentrum überwiesen werden und in drei Gruppen zu je 15 Patientinnen aufgeteilt sind: Gruppe 1 (Kontrolle) Frauen mit regelmäßigem Eierstockzyklus; Gruppe 2 – Nicht-PCOS-Frauen, die sich einer Eierstockstimulation und einer ICSI-Behandlung unterziehen; Gruppe 3 – Frauen mit PCOS, die sich einer Eierstockstimulation und einer ICSI-Behandlung unterziehen.

Die Studie wird eine Gesamtdauer von 24 Monaten haben, die wie folgt aufgeteilt ist:

• Überwachung und Einschreibung der Probanden vor der Phase (20 Monate).

  • Gruppe 1 folgt dem Protokoll zur Überwachung der Eierstöcke, bei dem in den drei Phasen des Eierstockzyklus Blutproben entnommen werden.
  • Gruppe 2 und 3 werden einer Stimulation der Eierstöcke und einer ICSI-Behandlung unterzogen, bei der in den angegebenen Zyklusphasen Blut- und Follikelflüssigkeitsproben entnommen werden.
• Durchführung einer chemischen/biochemischen Analyse im elektrophysiologischen Labor der Universität Perugia (2 Monate).
• Durchführung statistischer Tests und Verarbeitung der gewonnenen Daten (2 Monate)

Den Probanden wird gemäß der regulären klinischen Praxis eine venöse Blutentnahme von 4 ml verabreicht, um die Hormondosierung während der Überwachung des Eierstockzyklus durchzuführen.

Es sind keine diagnostischen Tests außerhalb der routinemäßigen klinischen Praxis geplant, und Patienten müssen nicht für zusätzliche Besuche zum PMA-Zentrum reisen, die über die in der regulären klinischen Praxis erforderlichen Besuche hinausgehen.

Themen und Rekrutierungsort: 45 Patienten werden rekrutiert: 15 Frauen mit einer PCOS-Diagnose und 30 Nicht-PCOS-Frauen im Zentrum für medizinisch unterstützte Reproduktion des Perugia-Krankenhauses (Leiter: Prof. S. Gerli).

MATERIALEN UND METHODEN:

GRUPPE 1: Patienten werden gemäß der normalen klinischen Praxis drei Blutabnahmen in der Follikel-, Ovulations- und Lutealphase unterzogen.

GRUPPE 2 und 3: Die Patientinnen werden einer Behandlung zur Stimulation der Eierstöcke mit Gonadotropinen und einer Eizellentnahme unterzogen. Im Rahmen dieses Prozesses werden gemäß der klinischen Praxis Blut- und Follikelflüssigkeitsproben entnommen.

Methoden Sammlung biologischen Materials: Während der Überwachung des Eierstockzyklus wird bei Patienten während der in Tabelle 1 beschriebenen Phasen morgens nach mindestens 10 Stunden Fasten eine venöse Blutentnahme durchgeführt. Bei der Eizellentnahme wird auch eine Follikelflüssigkeitsprobe entnommen (Gruppe 2 und 3). Insbesondere wird ein Aliquot einer Blutprobe, deren Follikelflüssigkeit, ausgewertet, um den Gehalt an Neuropeptiden (CGRP, SP, VIP und Enkephaline) zu bestimmen. Der CGRP-Spiegel wird mit einem extraktionsfreien Enzymimmunoassay-Kit (Peninsula Laboratories LLC, CA, USA) gemäß dem Protokoll des Herstellers gemessen. Für die quantitative Messung der menschlichen Substanz P wird das Human Substance P Enzyme ELISA Assay Kit (ELK1453-96T – Twin Elix srl) verwendet. Für VIP wird das ELISA-Kit für menschliches VIP (ELK1453-96T – Twin Elix srl) verwendet, und für den Enkephalin-Assay wird das ELISA-Kit für menschliche Enkephaline (ELK5246-96T – Twin Elix srl) verwendet. Neuropeptidtests werden im Physiologielabor der Fakultät für Chemie, Biologie und Biotechnologie der Universität Perugia in Zusammenarbeit mit Prof. Fioretti durchgeführt.

Die Seren werden auch auf Nüchternglukose, Triglyceride (TG), Gesamtcholesterin (TC), High-Density-Lipoprotein-Cholesterin (HDL), Insulin, Dehydroepiandrosteronsulfat (DHEAS), Sexualhormon-bindendes Globulin (SHBG), Progesteron, Östradiol, Follikelstimulierendes Hormon (FSH), LH und Gesamttestosteron. Die Serumkonzentrationen von Glukose (Hexokinase), Gesamtcholesterin (CHOD-PAP) und Triglyceriden (GPO-PAP) werden ebenfalls unter Verwendung enzymatischer Standardmethoden (Roche Diagnostics, IN, USA) mit einem vollautomatischen Analysegerät (Roche Modular PE, Roche Diagnostics) gemessen , IN DEN USA).