Expression des neuropeptides pendant le cycle ovarien et chez les patientes atteintes du SOPK (PCO-NP)

Ce projet vise à étudier les mécanismes neurosensoriels sous-jacents à l'un des troubles les plus courants liés à la folliculogenèse, comme le SOPK. L'étude vise à caractériser le SOPK en termes d'expression des neuropeptides et à faire la comparaison entre les femmes avec et sans SOPK, en allant analyser des échantillons de sang veineux prélevés durant les trois phases du cycle ovarien et de liquide folliculaire, prélevés durant la phase ovulatoire dans le cadre du prélèvement d'ovocytes. Plus précisément, l'expression des neuropeptides tels que le CGRP, le SP, le VIP et les enképhalines dans les trois phases du cycle ovarien (phase folliculaire, phase ovulatoire et phase lutéale) dans les trois groupes de femmes considérées sera évaluée.

Étudier le design:

L'étude recrutera 45 patientes au total, référées au Centre PMA, réparties en 3 groupes de 15 patientes chacun : groupe 1 (témoin) femmes avec cycle ovarien régulier ; Groupe 2 - femmes non SOPK subissant une stimulation ovarienne et un traitement ICSI ; Groupe 3 - femmes atteintes du SOPK subissant une stimulation ovarienne et un traitement ICSI.

L'étude aura une durée totale de 24 mois répartis comme suit:

• Suivi pré-phase et recrutement des sujets (20 mois).

  • Le groupe 1 suivra le protocole de surveillance ovarienne, au cours duquel des prélèvements sanguins seront effectués aux trois étapes du cycle ovarien.
  • Les groupes 2 et 3 subiront une stimulation ovarienne et un traitement ICSI, prélevés avec des échantillons de sang et de liquide folliculaire aux phases de cycle spécifiées.
• Réalisation d'analyses chimiques/biochimiques réalisées au laboratoire d'électrophysiologie de l'Université de Pérouse (2 mois).
• Réalisation de tests statistiques et traitement des données obtenues (2 mois)

Les sujets recevront une prise de sang veineux de 4 ml conformément à la pratique clinique habituelle pour effectuer le dosage hormonal pendant la surveillance du cycle ovarien.

Aucun test de diagnostic en dehors de la pratique clinique de routine n'est prévu et les patients ne seront pas tenus de se rendre au centre PMA pour des visites supplémentaires au-delà de celles requises par la pratique clinique régulière.

Sujets et recrutement Lieu : 45 patientes seront recrutées : 15 femmes avec un diagnostic de SOPK et 30 femmes non SOPK au Centre de procréation médicalement assistée de l'hôpital de Pérouse (Responsable : Prof. S. Gerli).

MATÉRIELS ET MÉTHODES:

GROUPE 1 : Les patients, conformément à la pratique clinique normale, subiront trois prises de sang dans les phases folliculaire, ovulatoire et lutéale.

GROUPE 2 et 3 : Les patientes subiront un traitement de stimulation ovarienne avec des gonadotrophines et un prélèvement d'ovules. Dans le cadre de ce processus, conformément à la pratique clinique, un prélèvement de sang et de liquide folliculaire sera effectué.

Méthodes Prélèvement de matériel biologique : Lors du suivi du cycle ovarien, un prélèvement de sang veineux sera effectué le matin après au moins 10 heures de jeûne chez les patientes pendant les phases décrites dans le tableau 1. Un échantillon de liquide folliculaire sera également prélevé lors du prélèvement des ovocytes (groupe 2 et 3). Plus précisément, une aliquote d'échantillon sanguin, dont le fluide folliculaire sera évalué pour doser le taux de neuropeptides (CGRP, SP, VIP et enképhalines). Le niveau de CGRP sera mesuré à l'aide d'un kit d'immunodosage enzymatique sans extraction (Peninsula Laboratories LLC, CA, USA) suivant le protocole du fabricant. Pour la mesure quantitative de la substance P humaine, le kit ELISA de dosage de l'enzyme P humaine (ELK1453-96T - Twin Elix srl) sera utilisé. Pour le VIP, le kit ELISA pour VIP humain (ELK1453-96T - Twin Elix srl) sera utilisé, et pour le dosage des enképhalines, le kit ELISA pour enképhalines humaines (ELK5246-96T - Twin Elix srl) sera utilisé. Les dosages de neuropeptides seront effectués au Laboratoire de physiologie du Département de chimie, biologie et biotechnologie de l'Université de Pérouse, en collaboration avec le professeur Fioretti.

Les sérums seront également analysés pour la glycémie à jeun, les triglycérides (TG), le cholestérol total (TC), le cholestérol des lipoprotéines de haute densité (HDL), l'insuline, le sulfate de déhydroépiandrostérone (DHEAS), la globuline liant les hormones sexuelles (SHBG), la progestérone, l'estradiol, hormone folliculo-stimulante (FSH), LH et testostérone totale. Les concentrations sériques de glucose (hexokinase), de cholestérol total (CHOD-PAP) et de triglycérides (GPO-PAP) seront également mesurées à l'aide de méthodes enzymatiques standard (Roche Diagnostics, IN, USA) avec un analyseur entièrement automatisé (Roche Modular PE, Roche Diagnostics , AUX ÉTATS-UNIS).