Metabolisk tilgængelighed af methionin i mungbønner

Forundersøgelsesvurderingerne vil omfatte måling af basal metabolisk hastighed (BMR) / Resting Energy Expenditure (REE) ved indirekte kalorimetri i åbent kredsløb og kropssammensætning (fedt- og fedtfri masse) ved hjælp af deuteriumoxidfortyndingsteknik.

Studieprotokollen er en 3-dages eksperimentel protokol (2 dages tilpasning plus 1 undersøgelsesdag), med et interval på ≥1 uge for at sikre fuldstændig udvaskning af sporstoffer.

Hver deltager tilpasses testdiæterne i to dage for at give dem tilstrækkelig energi og protein (isonitrogen kost) og for at stabilisere deres metaboliske pool. Energien i tilpasningsperioden tilføres ved hvileenergiforbrug (REE/BMR) x 1,7 og protein 1,0 g.kg-1.d-1. I denne periode forventes det, at hver deltager indtager 4 måltider om dagen bestående af en flydende proteindrik og proteinfrie cookies og/eller kogt mungbønnemåltid, som efterforskerne vil sørge for.

På undersøgelsesdagen, efter en 10-12 timers faste natten over, vil deltagerne komme til forskningsenheden i 8-9 timer og modtage 9 isonitrogene, isokaloriske timemåltider, som hver repræsenterer en tiendedel af deltagerens samlede daglige protein (1) g.kg-1.d-1) og energibehov (1,5 x REE/BMR).

Proteinet leveres enten som referenceaminosyreblandingen eller som en kombination af referenceaminosyreblandingen og testproteinerne. Mængden af ​​hvert testprotein tilvejebragt på hvert niveau af valgt IAA-indtagelse bør beregnes baseret på koncentrationen fra alle kilder.

Indikator AA, phenylalanin gives ved 30 mg.kg-1.d -1 i alle undersøgelsesdiæter (fra fødevareprotein og isotop). Mængden af ​​phenylalanin leveret fra krystallinsk aminosyre skal fratrækkes afhængigt af det naturlige phenylalaninindhold i testproteinet.

Den ikke-protein-energi i testdiæterne tilføres gennem en aromatiseret sukker-oliedrik og proteinfri hvedestivelse cookies.

Reference-aminosyreblandingen, ikke-mærket krystallinsk phenylalanin, tyrosin og udvalgt IAA tilsættes og blandes med sukker-olie-drikken før indgivelse af minimåltider hver time. Testproteinerne administreres separat til deltagerne med hvert minimåltid.

Åndedrætsprøver opsamles før start af det første minimåltid, ved baseline (før sporstofprotokollen; en stabil fødetilstand i åndedrættet 13CO2-baggrundsoverflod forekommer efter 4 timers minimåltider) og hvert 15. minut under isotopisk steady state (ca. 2,5 timer efter). start af isotopen). Tre udåndingsprøver bør opsamles i 10 mL ikke-siliciumbelagte rør ved hjælp af en opsamlingsmekanisme, der tillader fjernelse af dødrumsluft på hvert tidspunkt. Når udåndingsindsamling falder sammen med et timemåltid, skal udåndingsprøven først tages efterfulgt af måltidet. Derefter opbevares alle udåndingsprøver ved stuetemperatur i afventning af analyse.

Berigelse af 13C i ånde analyseres ved kontinuerligt flow isotopforhold massespektrometer. 13CO2-berigelsen i udåndingsprøverne på grund af isotopadministration under fødetilstanden udtrykkes som atom % overskud (APE) i forhold til baseline. Derefter beregnes fraktionen af ​​13CO2 (F13CO2) fra sporstoffet phenylalaninoxidation i forhold til den indgivne mængde.

Reference- og test-IAO-responshældningerne beregnes ud fra F13CO2-målinger og de respektive IAA-indtag ved brug af en lineær blandet effekt-regressionstilstand, med en fælles oprindelse for F13CO2-respons ved basistest IAA-indtag. Den metaboliske tilgængelighed (MA) af testaminosyren i testmåltidet bestemmes ved hældningsforholdsmetoden ved hjælp af følgende ligning:

MA (%) = (Testproteinhældning × 100)/ Referencehældning