Metabolsk tilgjengelighet av metionin i mungbønner

Vurderingene før studien vil inkludere måling av basal stoffskiftehastighet (BMR) / Resting Energy Expenditure (REE) ved indirekte kalorimetri i åpen krets, og kroppssammensetning (fett og fettfri masse) ved fortynningsteknikk for deuteriumoksid.

Studieprotokollen er en 3-dagers eksperimentell protokoll (2 dager med tilpasning pluss 1 studiedag), med et intervall på ≥1 uke for å sikre fullstendig utvasking av sporstoff.

Hver deltaker er tilpasset testdiettene i to dager for å gi dem tilstrekkelig energi og protein (isonitrogen diett), og for å stabilisere deres metabolske pool. Energien i tilpasningsperioden tilføres ved hvileenergiforbruk (REE/BMR) x 1,7 og protein 1,0 g.kg-1.d-1. I løpet av denne perioden vil hver deltaker forventes å innta 4 måltider per dag bestående av en flytende proteindrikk og proteinfrie kjeks og/eller kokt mungbønnemåltid, som etterforskerne vil sørge for.

På studiedagen, etter en 10-12 timers faste over natten, vil deltakerne komme til forskningsenheten i 8-9 timer og motta 9 isonitrogene, isokaloriske timemåltider, som hver representerer en tiendedel av deltakerens totale daglige protein (1) g.kg-1.d-1) og energibehov (1,5 x REE/BMR).

Proteinet leveres enten som referanseaminosyreblandingen eller som en kombinasjon av referanseaminosyreblandingen og testproteinene. Mengden av hvert testprotein gitt på hvert nivå av valgt IAA-inntak bør beregnes basert på konsentrasjonen fra alle kilder.

Indikator AA, fenylalanin er gitt ved 30 mg.kg-1.d -1 i alle studiedietter (fra matprotein og isotop). Mengden fenylalanin fra krystallinsk aminosyre skal trekkes fra avhengig av det naturlige fenylalanininnholdet i testproteinet.

Ikke-proteinenergien i testdiettene tilveiebringes gjennom en smaksatt sukker-oljedrikk og proteinfrie hvetestivelseskjeks.

Referanseaminosyreblandingen, ikke-merket krystallinsk fenylalanin, tyrosin og utvalgt IAA tilsettes og blandes med sukker-oljedrikken før minimåltidene hver time administreres. Testproteinene administreres separat til deltakerne med hvert minimåltid.

Pusteprøver tas før start av det første minimåltidet, ved baseline (før sporstoffprotokollen; en stabil matet tilstand i pusten 13CO2 bakgrunnsoverflod oppstår etter 4 timers minimåltider) og hvert 15. minutt under isotopisk steady state (ca. 2,5 timer etter). starter isotopen). Tre pusteprøver bør samles i 10 mL ikke-silisiumbelagte rør ved å bruke en oppsamlingsmekanisme som tillater fjerning av dødromsluft på hvert tidspunkt. Når pusteinnsamling faller sammen med et timemåltid, bør pusteprøven tas først, etterfulgt av måltidet. Deretter lagres alle pusteprøver ved romtemperatur i påvente av analyse.

Anrikning av 13C i pusten analyseres med kontinuerlig strømningsisotopforhold massespektrometer. 13CO2-anrikningen i pusteprøvene på grunn av isotopadministrering under matet tilstand uttrykkes som atom % overskudd (APE) over baseline. Deretter beregnes andelen 13CO2 (F13CO2) fra sporstoffet fenylalaninoksidasjon i forhold til administrert mengde.

Referanse- og test-IAO-responshellingene beregnes fra F13CO2-målinger og de respektive IAA-inntakene ved å bruke en lineær regresjonsmodus med blandet effekt, med en felles opprinnelse til F13CO2-respons ved basistest IAA-inntak. Den metabolske tilgjengeligheten (MA) av testaminosyren i testmåltidet bestemmes av skråningsforholdsmetoden ved å bruke følgende ligning:

MA (%) = (Testproteinhelling × 100)/ Referansehelling