緑豆のメチオニンの代謝利用率

研究前の評価には、開回路間接熱量測定による基礎代謝率 (BMR) / 安静時エネルギー消費 (REE) の測定と、酸化重水素希釈技術による体組成 (脂肪および除脂肪量) の測定が含まれます。

研究プロトコールは 3 日間の実験プロトコール (2 日間の適応と 1 研究日) であり、完全なトレーサーの洗い流しを保証するために 1 週​​間以上の間隔があります。

各参加者は、十分なエネルギーとタンパク質（等窒素生成食）を提供し、代謝プールを安定させるために、2 日間試験食に適応させます。 適応期間中のエネルギーは、安静時エネルギー消費量 (REE/BMR) x 1.7 およびタンパク質 1.0 g.kg-1.d-1 で提供されます。 この期間中、各参加者は、プロテイン液体飲料とプロテインフリーのクッキーおよび/または研究者が提供する調理済み緑豆ミールからなる1日4食を摂取することが期待されます。

研究当日、10～12時間の一晩絶食後、参加者は研究ユニットに8～9時間来て、等窒素生成、等カロリーの1時間当たりの食事を9回摂取します。各食事は参加者の1日の総タンパク質の10分の1に相当します(1 g.kg-1.d-1) およびエネルギー要件 (1.5 x REE/BMR)。

タンパク質は、参照アミノ酸混合物として、または参照アミノ酸混合物と試験タンパク質の組み合わせとして供給されます。 選択した IAA 摂取量の各レベルで提供される各試験タンパク質の量は、すべての供給源からの濃度に基づいて計算する必要があります。

指標 AA、フェニルアラニンは 30 mg.kg-1.d で提供されます。 すべての研究食事で -1 (食物タンパク質と同位体から)。 結晶性アミノ酸から得られるフェニルアラニンの量は、試験タンパク質中の天然フェニルアラニン含有量に応じて差し引かれる必要があります。

試験食中の非タンパク質エネルギーは、フレーバー付きシュガーオイルドリンクとタンパク質を含まない小麦デンプンクッキーを通じて提供されます。

参照アミノ酸混合物、非標識結晶性フェニルアラニン、チロシン、および選択された IAA を、1 時間ごとのミニミールを投与する前に砂糖と油の飲み物に加えて混合します。 試験タンパク質は、ミニ食事ごとに参加者に個別に投与されます。

呼気サンプルは、最初のミニ食事の開始前、ベースライン時（トレーサープロトコルの前、呼気中の安定した摂食状態、13CO2バックグラウンド量は4時間のミニ食事後に発生する）、および同位体定常状態中の15分ごと（その後約2.5時間）に収集されます。同位体を開始します)。 各時点でデッドスペース空気を除去できる収集機構を使用して、3 つの呼気サンプルを 10 mL の非シリコンコーティングチューブに収集する必要があります。 呼気の採取が 1 時間ごとの食事と同時に行われる場合は、最初に呼気サンプルを採取し、次に食事の後に採取する必要があります。 その後、すべての呼気サンプルは分析が行われるまで室温で保管されます。

呼気中の 13C の濃縮は、連続フロー同位体比質量分析計によって分析されます。 摂食状態での同位体投与による呼気サンプル中の 13CO2 濃縮は、ベースラインに対する原子 % 過剰 (APE) として表されます。 次に、投与量に対するトレーサーフェニルアラニン酸化からの 13CO2 (F13CO2) の割合が計算されます。

基準および試験 IAAO 応答の傾きは、線形混合効果回帰モードを使用して、F13CO2 測定値とそれぞれの IAA 摂取量から計算され、基本試験 IAA 摂取時の F13CO2 応答の共通の起源が使用されます。 試験食事中の試験アミノ酸の代謝利用率 (MA) は、次の方程式を使用した傾き比法によって決定されます。

MA (%) = (試験タンパク質の傾き × 100)/ 参照の傾き