Metabolisk tillgänglighet av metionin i mungbönor

Förstudiebedömningarna kommer att omfatta mätning av basal ämnesomsättning (BMR) / Resting Energy Expenditure (REE) genom indirekt kalorimetri med öppen krets och kroppssammansättning (fett- och fettfri massa) med deuteriumoxidutspädningsteknik.

Studieprotokollet är ett 3-dagars experimentellt protokoll (2 dagars anpassning plus 1 studiedag), med ett intervall på ≥1 vecka för att säkerställa fullständig tvättning av spårämnen.

Varje deltagare är anpassad till testdieterna under två dagar för att förse dem med tillräcklig energi och protein (isonitrogen kost), och för att stabilisera deras metaboliska pool. Energin under anpassningsperioden tillhandahålls vid vilande energiförbrukning (REE/BMR) x 1,7 och protein 1,0 g.kg-1.d-1. Under denna period förväntas varje deltagare konsumera 4 måltider per dag bestående av en flytande proteindryck och proteinfria kakor och/eller kokt mungbönamåltid, som utredarna kommer att tillhandahålla.

På studiedagen, efter en 10-12 timmars fasta över natten, kommer deltagarna till forskningsenheten i 8-9 timmar och får 9 isonitrogena, isokaloriska timmåltider, som var och en representerar en tiondel av deltagarens totala dagliga protein (1) g.kg-1.d-1) och energibehov (1,5 x REE/BMR).

Proteinet tillhandahålls antingen som referensaminosyrablandningen eller som en kombination av referensaminosyrablandningen och testproteinerna. Mängden av varje testprotein som tillhandahålls vid varje nivå av valt IAA-intag bör beräknas baserat på koncentrationen från alla källor.

Indikator AA, fenylalanin tillhandahålls vid 30 mg.kg-1.d -1 i alla studiedieter (från matprotein och isotop). Mängden fenylalanin som tillhandahålls från kristallin aminosyra bör dras av beroende på den naturliga fenylalaninhalten i testproteinet.

Den proteinfria energin i testdieterna tillhandahålls genom en smaksatt socker-oljedryck och proteinfria vetestärkelsekakor.

Referensaminosyrablandningen, omärkt kristallint fenylalanin, tyrosin och utvald IAA tillsätts och blandas med socker-oljedrycken innan minimåltiderna varje timme administreras. Testproteinerna administreras separat till deltagarna med varje minimåltid.

Andningsprover tas innan den första minimåltiden påbörjas, vid baslinjen (före spårningsprotokollet; ett stabilt mattillstånd i andedräkt 13CO2 bakgrundsöverflöd uppstår efter 4 timmars minimåltider) och var 15:e minut under isotopisk steady state (cirka 2,5 timmar efter). startar isotopen). Tre utandningsprover ska samlas in i 10 mL icke-kiselbelagda rör med hjälp av en uppsamlingsmekanism som tillåter avlägsnande av dödutrymmesluft vid varje tidpunkt. När utandningsprovet sammanfaller med en måltid varje timme, bör utandningsprovet tas först, följt av måltiden. Sedan förvaras alla utandningsprover i rumstemperatur i väntan på analys.

Anrikning av 13C i andedräkt analyseras med kontinuerligt flödesisotopförhållande masspektrometer. 13CO2-anrikningen i utandningsproverna på grund av isotopadministrering under matningstillståndet uttrycks som atom % överskott (APE) över baslinjen. Därefter beräknas andelen 13CO2 (F13CO2) från spårämnet fenylalaninoxidation i förhållande till den administrerade mängden.

Referens- och test-IAO-svarslutningarna beräknas från F13CO2-mätningar och respektive IAA-intag med hjälp av ett linjärt blandat regressionsläge, med ett gemensamt ursprung för F13CO2-svar vid bastest IAA-intag. Den metaboliska tillgängligheten (MA) av testaminosyran i testmåltiden bestäms av lutningsförhållandemetoden med hjälp av följande ekvation:

MA (%) = (Testproteinlutning × 100)/ Referenslutning